缩略词表 | 第1-5页 |
摘要 | 第5-7页 |
Abstract | 第7-9页 |
第一章 文献综述 | 第9-18页 |
·引言 | 第9页 |
·植物抗逆机制研究进展 | 第9-13页 |
·逆境胁迫对植物的危害 | 第9-12页 |
·植物抗逆性研究的应用及其进展 | 第12-13页 |
·棉花抗逆机制研究进展 | 第13-14页 |
·细胞色素 b5 蛋白的研究进展 | 第14-17页 |
·细胞色素 b5 蛋白的结构特征 | 第14-15页 |
·细胞色素 b5 蛋白的光谱吸收特性 | 第15页 |
·细胞色素 b5 蛋白的还原机制 | 第15-16页 |
·细胞色素 b5 蛋白在动物细胞中的功能 | 第16页 |
·细胞色素 b5 蛋白在植物中的功能及研究现状 | 第16-17页 |
·本研究的目的和意义 | 第17-18页 |
第二章 材料与方法 | 第18-43页 |
·材料 | 第18-23页 |
·菌株和载体 | 第18页 |
·植物材料 | 第18页 |
·酶及试剂盒 | 第18页 |
·培养基 | 第18-20页 |
·常用溶液配方及各种抗生素与激素的配置 | 第20-21页 |
·常用溶液配方 | 第20-21页 |
·常用抗生素与激素的配置 | 第21页 |
·蛋白质电泳胶配制 | 第21-22页 |
·蛋白质纯化相关溶液 | 第22-23页 |
·方法 | 第23-43页 |
·GhCyt b5 基因的克隆 | 第23-32页 |
·棉花幼苗的培养 | 第23页 |
·棉花根、茎、叶中总 RNA 的提取 | 第23-24页 |
·陆地棉 GhCyt b5 基因的克隆 | 第24-32页 |
·植物表达载体的构建 | 第32-35页 |
·带有酶切位点的 GhCyt b5 基因的扩增 | 第32-33页 |
·PCR 产物回收与纯化 | 第33页 |
·酶切获得目标片段 | 第33-34页 |
·目的基因和表达载体的连接 | 第34页 |
·转化感受态大肠杆菌 | 第34页 |
·pBin438- GhCyt b5 质粒的抽提及酶切鉴定 | 第34-35页 |
·农杆菌的电击转化 | 第35页 |
·过量表达陆地棉 GhCyt b5 烟草植株的获得 | 第35-36页 |
·烟草无菌苗的培养 | 第35-36页 |
·根癌农杆菌介导的烟草遗传转化 | 第36页 |
·转基因烟草植株筛选 | 第36-38页 |
·转基因烟草苗及野生型烟草基因组 DNA 的提取 | 第36-37页 |
·转基因烟草植株 DNA 的检测 | 第37页 |
·转基因烟草植株及野生型烟草植株 RNA 的提取 | 第37-38页 |
·转基因烟草植株抗旱性检测 | 第38页 |
·原核表达载体 pET32a-GhCyt b5 的构建及其蛋白表达纯化 | 第38-41页 |
·原核表达载体 pET32a-GhCyt b5 的构建 | 第38-40页 |
·GhCyt b5 蛋白的诱导表达 | 第40-41页 |
·GhCyt b5 蛋白的电子传递功能分析 | 第41-43页 |
第三章 结果与分析 | 第43-55页 |
·GhCyt b5 基因 cDNA 全长的克隆及分析 | 第43-46页 |
·棉花根、茎、叶总 RNA 的提取 | 第43页 |
·棉花 Cyt b5 基因 cDNA 全长的克隆及序列分析 | 第43-44页 |
·GhCyt b5 基因的进化分析 | 第44-46页 |
·真核表达载体 pBin438- GhCyt b5 的构建 | 第46-47页 |
·带有酶切位点的 GhCyt b5 基因的扩增及序列分析 | 第46-47页 |
·真核表达载体的构建及分析 | 第47页 |
·烟草的遗传转化结果 | 第47-51页 |
·工程菌制备及检测 | 第47-48页 |
·转基因烟草植株的获得 | 第48-49页 |
·转基因烟草 DNA 的检测 | 第49-50页 |
·转基因烟草植株 RNA 的检测 | 第50-51页 |
·转基因烟草苗抗旱性功能分析 | 第51页 |
·原核表达载体的构建及其蛋白的诱导表达 | 第51-53页 |
·原核表达载体 pET32a-GhCyt b5 的构建 | 第51-52页 |
·GhCyt b5 重组蛋白表达及其条件优化 | 第52-53页 |
·GhCyt b5 蛋白的电子传递功能分析 | 第53-55页 |
第四章 讨论 | 第55-60页 |
·关于基因克隆的问题 | 第55-56页 |
·RNA 的提取 | 第55页 |
·RACE 法克隆 | 第55-56页 |
·关于 PCR 扩增 | 第56页 |
·关于原核表达的问题 | 第56-57页 |
·关于真核表达的问题 | 第57-58页 |
·转基因植物表达体系的构建 | 第57-58页 |
·烟草转化 | 第58页 |
·GhCyt b5 基因功能分析及后期的实验设想 | 第58-60页 |
参考文献 | 第60-65页 |
致谢 | 第65-66页 |
作者介绍 | 第66-67页 |
导师简介 | 第67-69页 |