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提高烟草氮钾营养利用率的遗传操作及烟草低钾响应基因的鉴定

摘要第1-9页
Abstract第9-23页
第一章 绪言第23-51页
   ·植物钾素营养研究第23-35页
     ·钾在植物生长发育过程中的作用第23-25页
     ·植物钾素吸收利用的生理机制第25-28页
     ·植物钾素吸收利用的分子生物学研究第28-34页
     ·提高植物耐低钾胁迫能力的遗传工程第34-35页
   ·植物氮素营养研究第35-47页
     ·氮素对植物生理生化过程的影响第36-37页
     ·植物氮素吸收利用的生理机制第37-41页
     ·植物对氮素吸收利用的分子生物学研究第41-44页
     ·提高植物氮素营养利用能力的遗传操作第44-47页
   ·植物氮钾营养的交互作用第47-48页
   ·本研究的目的和意义第48-51页
第二章 高钾基因型烟草品种的筛选第51-63页
   ·材料与方法第51-55页
     ·植物材料及培养第51-53页
     ·烟草的生长表型测定第53页
     ·叶片钾含量的测定第53-55页
     ·根系活力测定第55页
     ·数据统计方法第55页
   ·结果第55-61页
     ·各基因型烤烟品种地上部干重、鲜重和水分含量的差异第55-57页
     ·各基因型烤烟品种叶片含钾量差异第57-59页
     ·各基因型烤烟品种间含钾量的相关分析以及分类标准第59-60页
     ·不同基因型烟草根系活力的差异与烟叶含钾量的关系第60-61页
   ·讨论第61-63页
第三章 低钾胁迫下中烟98 SSH cDNA文库的构建及表达序列标签分析第63-89页
   ·材料和方法第64-69页
     ·植物材料及培养方法第64页
     ·中烟98生长表型的测定第64页
     ·根系活力的测定第64-65页
     ·叶片中脯氨酸和丙二醛含量的测定第65页
     ·可溶性总蛋白和可溶性糖含量的测定第65-66页
     ·钾离子含量的测定第66页
     ·过氧化氢含量的测定第66页
     ·构建低钾胁迫条件下烟草SSH cDNA文库样品的处理及收集第66页
     ·根系总RNA的提取及mRNA的分离第66-67页
     ·SSH cDNA文库的构建第67页
     ·SSH文库克隆插入片段的长度检测及测序分析第67页
     ·SSH文库EST基因功能聚类第67-68页
     ·RT-PCR分析第68-69页
   ·结果第69-82页
     ·低钾胁迫下中烟98生长表型测定第69-71页
     ·低钾胁迫对中烟98叶片中脯氨酸和丙二醛含量的影响第71-72页
     ·低钾胁迫对中烟98叶片中可溶性糖及总蛋白含量的影响第72-73页
     ·低钾胁迫对中烟98叶片及根系中K~+含量的影响第73-74页
     ·低钾胁迫对中烟98过氧化氢含量的影响第74-75页
     ·中烟98在低钾胁迫条件下正向SSH cDNA文库的构建第75-76页
     ·SSH cDNA文库克隆的序列分析及基因功能聚类第76-80页
     ·SSH文库基因表达谱分析第80-82页
   ·讨论第82-89页
第四章 过量表达AtKUP1和AKT2基因对烟草低钾胁迫耐受性的影响第89-113页
   ·材料与方法第90-96页
     ·植物表达载体的构建第90-92页
     ·烟草的转化以及转基因植株的筛选第92页
     ·基因组的提取及PCR分析第92页
     ·RNA的提取及RT-PCR分析第92-93页
     ·烟草不同器官中的基因表达谱分析第93-94页
     ·低钾胁迫下烟草的生长表型分析第94-95页
     ·荧光定量PCR分析第95页
     ·烟草叶片中叶绿素含量的测定第95页
     ·烟草叶片中可溶性蛋白含量的测定第95页
     ·烟草叶片中糖类物质含量的测定第95页
     ·烟草叶片中脯氨酸及丙二醛含量的测定第95-96页
     ·烟草叶片钾离子含量的测定第96页
     ·烟草根系过氧化氢含量和SOD活性的测定第96页
     ·数据统计分析第96页
   ·结果第96-108页
     ·转基因烟草中AtKUP1和AKT2基因的插入及表达情况第96-98页
     ·转基因烟草不同部位外源基因的表达谱分析第98页
     ·转基因烟草中插入基因的表达水平分析第98-99页
     ·转基因烟草的表型差异第99-101页
     ·烟草叶片中叶绿素含量的测定第101-102页
     ·烟草叶片中可溶性蛋白及糖类物质含量测定第102-104页
     ·烟草叶片中脯氨酸及丙二醛含量的测定第104-105页
     ·烟草叶片中H_2O_2及SOD活性的测定第105-107页
     ·烟草叶片中K~+含量的差异第107-108页
   ·讨论第108-113页
第五章 过量表达Dof1和/或GS基因对烟草低氮胁迫耐受性的影响第113-139页
   ·材料与方法第114-121页
     ·植物表达载体的构建第114-115页
     ·烟草的转化及转基因植株的筛选第115-116页
     ·基因组PCR和RT-PCR分析第116页
     ·RNA的提取及RT-PCR分析第116-117页
     ·低氮条件下烟草生长表型分析第117-118页
     ·荧光定量PCR分析第118页
     ·低氮胁迫条件下烟草多项生理指标分析第118-121页
     ·数据统计分析第121页
   ·结果第121-135页
     ·转基因烟草中Dof1、GS1和GS2基因的插入及表达情况第121-122页
     ·低氮胁迫下转基因烟草的表型差异第122-126页
     ·低氮胁迫下插入基因的表达水平分析第126-127页
     ·低氮胁迫下烟草叶片中代谢物含量分析第127-135页
   ·讨论第135-139页
第六章 总结与展望第139-143页
致谢第143-145页
参考文献第145-169页
附录第169页

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