| 摘要 | 第1-10页 |
| Abstract | 第10-12页 |
| 缩略词表 | 第12-14页 |
| 第1章 文献综述 | 第14-27页 |
| ·副猪嗜血杆菌概述 | 第14-18页 |
| ·HPS培养及生化特性 | 第14页 |
| ·HPS的血清学分型和基因分型 | 第14-16页 |
| ·HPS的功能基因 | 第16-18页 |
| ·格拉瑟氏病的防控 | 第18页 |
| ·细胞致死膨胀毒素(CDT)致病作用的研究进展 | 第18-21页 |
| ·CDT对细胞的致病作用 | 第19-20页 |
| ·CDT在细菌性传染病中的致病作用 | 第20-21页 |
| ·自然转化研究进展 | 第21-23页 |
| ·自然转化的研究历史 | 第21页 |
| ·自然转化的机制 | 第21-23页 |
| ·自然转化用于基因缺失突变株构建 | 第23页 |
| ·IgA蛋白酶研究进展 | 第23-27页 |
| ·IgA蛋白酶的结构特征 | 第24-25页 |
| ·IgA蛋白酶的生物学功能 | 第25-27页 |
| 第2章 HPS细胞致死膨胀毒素的致病作用研究 | 第27-59页 |
| ·前言 | 第27页 |
| ·试验材料 | 第27-32页 |
| ·细菌、质粒与细胞 | 第27-29页 |
| ·主要的酶与试剂盒 | 第29页 |
| ·主要细菌、细胞培养基及配制 | 第29页 |
| ·主要的细胞试验相关溶剂及配制 | 第29-30页 |
| ·Western blot相关试剂及配制 | 第30-31页 |
| ·Southern blot相关试剂及配制 | 第31页 |
| ·主要的实验室器材 | 第31-32页 |
| ·引物 | 第32页 |
| ·实验动物 | 第32页 |
| ·试验方法 | 第32-41页 |
| ·pK18mobsacB(Km~R,oriT,sacB)的扩增,测序与保存 | 第32页 |
| ·pK18-C_1G的构建 | 第32-34页 |
| ·pK18-C_2K的构建 | 第34-35页 |
| ·HPS模型菌株的筛选 | 第35页 |
| ·自然转化法筛选基因缺失突变株及突变株检测 | 第35-38页 |
| ·缺失菌株和野生菌株生长曲线的测定 | 第38页 |
| ·野生菌株和缺失菌株分泌蛋白和全菌蛋白的提取 | 第38页 |
| ·CDT分泌蛋白和菌体蛋白对PK15细胞形态的影响 | 第38-39页 |
| ·HPS CDT与细胞凋亡的关系 | 第39-40页 |
| ·HPS CDT对豚鼠的致病作用 | 第40-41页 |
| ·结果与分析 | 第41-57页 |
| ·质粒pK18-C_1G的构建 | 第41-42页 |
| ·质粒pK18-C_2K的构建 | 第42-43页 |
| ·自然转化法筛选cdt基因缺失突变株及突变株鉴定 | 第43-48页 |
| ·缺失菌株和野生菌株生长曲线的测定 | 第48-49页 |
| ·CDT对PK15形态的影响 | 第49-51页 |
| ·CDT对细胞凋亡的作用 | 第51-55页 |
| ·HPS CDT对豚鼠的致病作用 | 第55-57页 |
| ·讨论 | 第57-59页 |
| ·自然转化法构建cdt缺失突变株 | 第57页 |
| ·HPS CDT对细胞的致病作用 | 第57-58页 |
| ·HPS CDT对豚鼠的致病作用 | 第58-59页 |
| 第3章 丝氨酸蛋白酶EspPs的IgA蛋白酶活性研究 | 第59-67页 |
| ·前言 | 第59页 |
| ·试验材料 | 第59-60页 |
| ·主要的菌株和质粒 | 第59页 |
| ·用于蛋白表达纯化的主要试剂 | 第59-60页 |
| ·用于IgA切割试验的蛋白和试剂 | 第60页 |
| ·Western blot相关试剂 | 第60页 |
| ·试验方法 | 第60-61页 |
| ·重组蛋白EspP2pd的原核表达和纯化 | 第60-61页 |
| ·HPS分泌蛋白的提取 | 第61页 |
| ·IgA切割试验 | 第61页 |
| ·结果与分析 | 第61-65页 |
| ·重组蛋白EspP2pd在E.coli BL21(DE3)中的表达和纯化 | 第61-62页 |
| ·IgA切割试验 | 第62-64页 |
| ·IgA切割试验最佳切割时间的确定 | 第64-65页 |
| ·IgA切割试验与蛋白的剂量依赖性 | 第65页 |
| ·讨论 | 第65-67页 |
| 结论 | 第67-68页 |
| 参考文献 | 第68-73页 |
| 附录 | 第73-74页 |
| 附图 | 第74-75页 |
| 致谢 | 第75页 |
