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S.aureus毒力因子ClfA、Hla和Sbi的克隆表达以及真核表达质粒的构建

摘要第1-7页
ABSTRACT第7-11页
第一章 金黄色葡萄球菌性疫苗研究进展第11-22页
   ·金黄色葡萄球菌研究进展第11页
   ·金黄色葡萄球菌的致病机制第11-17页
     ·黏附作用第11-13页
     ·对机体的杀伤作用第13-16页
     ·免疫逃逸作用第16-17页
   ·金黄色葡萄球菌性乳腺炎研究进展第17-19页
     ·乳腺炎的危害第17-18页
     ·乳腺炎病原菌第18-19页
   ·金黄色葡萄球菌性乳腺炎疫苗的研究进展第19-22页
     ·传统的金黄色葡萄球菌疫苗第19页
     ·基因工程疫苗第19-22页
第二章 金黄色葡萄球菌毒力因子 ClfA、Hla、Sbi 的克隆与原核表达第22-37页
   ·材料第22-23页
     ·菌种与载体第22页
     ·主要试剂第22页
     ·主要仪器第22-23页
     ·主要溶液第23页
   ·方法第23-29页
     ·ClfA、Hla 及 Sbi 全长基因的克隆第23-25页
     ·ClfA、Hla 及 Sbi 功能区基因的克隆第25-27页
     ·CA、Hla 片段与 Sbi(Ⅰ-Ⅳ)的原核表达第27-29页
   ·结果第29-35页
     ·ClfA、Hla 及 Sbi 全长基因的扩增结果第29页
     ·CA、Hla 片段与 Sbi(Ⅰ-Ⅳ)的扩增结果第29-30页
     ·ClfA、Hla 与 Sbi 的序列分析第30-34页
     ·目的蛋白的 SDS-PAGE 电泳第34页
     ·目的蛋白的 Western Blot 检测第34-35页
   ·讨论第35-36页
     ·ClfA 的克隆与表达第35页
     ·Hla 的克隆与表达第35-36页
     ·Sbi 的克隆与表达第36页
   ·小结第36-37页
第三章 金黄色葡萄球菌 Hla 的突变、原核表达与活性测定第37-43页
   ·材料第37页
     ·菌种与载体第37页
     ·主要试剂第37页
   ·方法第37-39页
     ·突变毒素 H35A 的全长基因克隆第37-39页
     ·H35A 去信号肽片段的克隆第39页
     ·H35A 片段的原核表达第39页
     ·融合蛋白 Hla 与 H35A 的溶血活性测定第39页
   ·结果第39-42页
     ·H35A 全长和 H35A 片段的克隆第39页
     ·H35A 片段的基因序列分析第39-41页
     ·融合蛋白 H35A 的表达与检测第41页
     ·融合蛋白 Hla 与 H35A 的溶血活性测定第41-42页
   ·讨论第42页
   ·小结第42-43页
第四章 金黄色葡萄球菌性乳腺炎 DNA 疫苗的构建与检测第43-50页
   ·材料第43页
     ·试验动物第43页
     ·菌种与载体第43页
     ·主要试剂第43页
   ·方法第43-46页
     ·动物免疫第43-44页
     ·DNA 疫苗的构建第44-46页
   ·结果第46-48页
     ·抗体滴度测定结果第46页
     ·DNA 疫苗的构建第46-47页
     ·DNA 疫苗的鉴定第47-48页
   ·讨论第48-49页
     ·多抗制备第48页
     ·DNA 疫苗的构建第48-49页
   ·小结第49-50页
结论第50-51页
参考文献第51-60页
致谢第60-61页
作者简介第61页

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