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兔出血热病毒重组疫苗的构建与筛选

摘要第1-5页
Abstract第5-9页
一、引言第9-14页
   ·兔出血热病毒简介第9-10页
     ·兔出血热病毒RHDV简介第9页
     ·兔出血症在各地的爆发第9页
     ·兔出血症病症差异第9-10页
     ·兔出血热病毒RHDV的分类,基因组,及病毒粒子第10页
   ·兔粘液瘤病毒MV介绍第10-11页
     ·兔粘液瘤病毒的感染特性第10-11页
     ·兔粘液瘤病毒的分类及性质第11页
   ·以痘病毒为载体的重组病毒的研究第11-12页
   ·非必需基因MST3N第12页
   ·研究目的和意义第12-14页
第二章 材料与方法第14-23页
   ·实验仪器和设备第14页
   ·实验材料第14-16页
     ·主要实验耗材第14页
     ·细胞和病毒第14页
     ·菌株和质粒第14-15页
     ·引物第15页
     ·常用试剂第15-16页
   ·实验方法第16-18页
     ·从病毒液中提取病毒DNA第16-17页
     ·大肠杆菌质粒DNA提取第17页
     ·大肠杆菌转化第17-18页
   ·基因的PCR扩增第18-19页
   ·DNA沉淀第19页
   ·DNA去磷酸化第19页
   ·DNA体外连接反应第19-20页
   ·琼脂糖凝胶电泳第20页
   ·纯化PCR产物第20页
   ·细胞培养及相关操作第20-22页
     ·空斑实验测定病毒滴度第20页
     ·转染第20-21页
     ·重组病毒的筛选第21页
     ·重组病毒的纯化第21-22页
     ·重组病毒的扩大及鉴定第22页
   ·ELISA测定抗体效价第22-23页
第三章 结果与分析第23-33页
   ·重组质粒的构建第23-26页
     ·构建重组质粒两边的同源重组区第23-25页
     ·以pMVP60-UP-DOWN为载体构建含有GFP筛选标记的重组质粒第25-26页
   ·适宜毒力的载体病毒的选择第26-27页
     ·动物实验检验不同毒株粘液瘤病毒毒力第26页
     ·不同毒株粘液瘤病毒滴度测定第26页
     ·家兔皮下注射第26-27页
     ·症状观察,拍照,记录,总结第27页
   ·重组病毒的筛选第27-29页
     ·重组质粒的转染及转染效率的测定第27-28页
     ·重组病毒的筛选及纯化第28-29页
   ·重组病毒的鉴定第29-30页
     ·重组病毒的PCR验证第29页
     ·重组病毒的Western-blot验证第29-30页
   ·重组病毒的毒力对比实验第30-31页
   ·重组病毒疫苗的病毒保护试验第31页
   ·重组病毒疫苗抗体效价测试第31-33页
第四章 讨论与展望第33-34页
   ·结果讨论第33页
   ·展望第33-34页
参考文献第34-38页
本文缩写词第38-39页
致谢第39页

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