摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-9页 |
一、引言 | 第9-14页 |
·兔出血热病毒简介 | 第9-10页 |
·兔出血热病毒RHDV简介 | 第9页 |
·兔出血症在各地的爆发 | 第9页 |
·兔出血症病症差异 | 第9-10页 |
·兔出血热病毒RHDV的分类,基因组,及病毒粒子 | 第10页 |
·兔粘液瘤病毒MV介绍 | 第10-11页 |
·兔粘液瘤病毒的感染特性 | 第10-11页 |
·兔粘液瘤病毒的分类及性质 | 第11页 |
·以痘病毒为载体的重组病毒的研究 | 第11-12页 |
·非必需基因MST3N | 第12页 |
·研究目的和意义 | 第12-14页 |
第二章 材料与方法 | 第14-23页 |
·实验仪器和设备 | 第14页 |
·实验材料 | 第14-16页 |
·主要实验耗材 | 第14页 |
·细胞和病毒 | 第14页 |
·菌株和质粒 | 第14-15页 |
·引物 | 第15页 |
·常用试剂 | 第15-16页 |
·实验方法 | 第16-18页 |
·从病毒液中提取病毒DNA | 第16-17页 |
·大肠杆菌质粒DNA提取 | 第17页 |
·大肠杆菌转化 | 第17-18页 |
·基因的PCR扩增 | 第18-19页 |
·DNA沉淀 | 第19页 |
·DNA去磷酸化 | 第19页 |
·DNA体外连接反应 | 第19-20页 |
·琼脂糖凝胶电泳 | 第20页 |
·纯化PCR产物 | 第20页 |
·细胞培养及相关操作 | 第20-22页 |
·空斑实验测定病毒滴度 | 第20页 |
·转染 | 第20-21页 |
·重组病毒的筛选 | 第21页 |
·重组病毒的纯化 | 第21-22页 |
·重组病毒的扩大及鉴定 | 第22页 |
·ELISA测定抗体效价 | 第22-23页 |
第三章 结果与分析 | 第23-33页 |
·重组质粒的构建 | 第23-26页 |
·构建重组质粒两边的同源重组区 | 第23-25页 |
·以pMVP60-UP-DOWN为载体构建含有GFP筛选标记的重组质粒 | 第25-26页 |
·适宜毒力的载体病毒的选择 | 第26-27页 |
·动物实验检验不同毒株粘液瘤病毒毒力 | 第26页 |
·不同毒株粘液瘤病毒滴度测定 | 第26页 |
·家兔皮下注射 | 第26-27页 |
·症状观察,拍照,记录,总结 | 第27页 |
·重组病毒的筛选 | 第27-29页 |
·重组质粒的转染及转染效率的测定 | 第27-28页 |
·重组病毒的筛选及纯化 | 第28-29页 |
·重组病毒的鉴定 | 第29-30页 |
·重组病毒的PCR验证 | 第29页 |
·重组病毒的Western-blot验证 | 第29-30页 |
·重组病毒的毒力对比实验 | 第30-31页 |
·重组病毒疫苗的病毒保护试验 | 第31页 |
·重组病毒疫苗抗体效价测试 | 第31-33页 |
第四章 讨论与展望 | 第33-34页 |
·结果讨论 | 第33页 |
·展望 | 第33-34页 |
参考文献 | 第34-38页 |
本文缩写词 | 第38-39页 |
致谢 | 第39页 |