| 目录 | 第1-8页 |
| 摘要 | 第8-10页 |
| ABSTRACT | 第10-12页 |
| 上篇:文献综述 | 第12-44页 |
| 第一章 梨火疫病菌 | 第12-20页 |
| 1 梨火疫病菌的简史、传播及防治 | 第12-20页 |
| ·梨火疫病菌简史及危害症状 | 第12-14页 |
| ·梨火疫病菌简史 | 第12页 |
| ·症状 | 第12-14页 |
| ·梨火疫病菌的病原生物学 | 第14页 |
| ·梨火疫病菌的世界分布及寄主范围 | 第14-15页 |
| ·梨火疫病菌的传播、侵染及病害循环 | 第15-16页 |
| ·梨火疫病菌的传播 | 第15页 |
| ·梨火疫病菌的侵染 | 第15页 |
| ·梨火疫病害防治 | 第15-16页 |
| ·梨火疫病菌的检验检疫方法 | 第16页 |
| ·基因的水平转移与病原菌的进化 | 第16-17页 |
| ·梨火疫病原菌发病分子机制 | 第17-20页 |
| 第二章 细菌群体感应系统概述 | 第20-44页 |
| 1 细菌的群体感应 | 第20-27页 |
| ·群体感应系统组成与类型 | 第20-22页 |
| ·革兰阳性菌中寡肽介导的双组分感应系统 | 第20页 |
| ·革兰阴性菌的AHL—LuxI/luxR系统 | 第20页 |
| ·LuxS/AI-2依赖的QS系统 | 第20-21页 |
| ·其他QS系统 | 第21-22页 |
| ·细菌感知种内数量的QS系统 | 第22-25页 |
| ·革兰氏阴性细菌中感知种内数量的QS系统 | 第22-23页 |
| ·革兰氏阳性细菌中感知种内数量的QS系统 | 第23-24页 |
| ·细菌感知种间数量的QS系统 | 第24-25页 |
| ·微生物群体感应在感染性疾病治疗新策略中的潜在应用 | 第25-27页 |
| ·生物膜与抗性 | 第25页 |
| ·群体感应与新药物靶标 | 第25-26页 |
| ·群体感应抑制剂 | 第26-27页 |
| ·群体感应淬灭酶 | 第27页 |
| 2 群体感应LuxR家族蛋白 | 第27-42页 |
| ·独立的LuxR同源物 | 第28页 |
| ·LuxR家族调控蛋白的结构 | 第28-31页 |
| ·LuxR的结构特点 | 第28-29页 |
| ·LuxR与目的基因的相互作用 | 第29-30页 |
| ·LuxR在细菌中的分布 | 第30-31页 |
| ·未配对的luxR家族:信号分子的感应因子/调节因子 | 第31-41页 |
| ·未配对的LuxR受体蛋白的工作模式 | 第33-34页 |
| ·产AHL细菌中未配对的LuxR蛋白 | 第34-37页 |
| ·不产AHL细菌中的未配对的LuxR | 第37-40页 |
| ·结论 | 第40-41页 |
| ·luxR同源蛋白 | 第41-42页 |
| 3 展望 | 第42-44页 |
| 下篇:研究内容 | 第44-82页 |
| 第一章 梨火疫病菌中未配对的LUXR同源基因的功能初析 | 第44-66页 |
| 摘要 | 第44-45页 |
| 1 材料及方法 | 第45-54页 |
| ·材料 | 第45-48页 |
| ·方法 | 第48-54页 |
| ·培养条件 | 第48页 |
| ·方法 | 第48-52页 |
| ·luxR基因突变体EaAluxR及互补菌株EaAluxR(pBBRRH)的构建 | 第52-53页 |
| ·luxR基因对梨火疫病菌生物学特性的影响 | 第53-54页 |
| 2 结果与分析 | 第54-63页 |
| ·梨火疫病菌luxR基因的克隆及序列分析 | 第55页 |
| ·luxR基因突变株EaAluxR及互补菌株的构建 | 第55-56页 |
| ·梨火疫病菌luxR突变体的Southern杂交检测及互补株验证 | 第56-57页 |
| ·luxR基因对梨火疫病菌生物学特性的影响 | 第57-63页 |
| ·luxR基因能够对梨火疫病菌的致病性产生影响 | 第57-58页 |
| ·luxR基因能够对梨火疫病菌的生长产生影响 | 第58-59页 |
| ·luxR基因能够对梨火疫病菌的抗氧化压力产生影响 | 第59-60页 |
| ·luxR基因对梨火疫病菌的应答反应产生影响 | 第60页 |
| ·胞外多糖分泌量的检测 | 第60-62页 |
| ·luxR基因能够对梨火疫病菌对抗生素的耐受性不产生影响 | 第62页 |
| ·luxR基因对梨火疫病菌的烟草过敏性反应没有影响 | 第62-63页 |
| 3 讨论 | 第63-66页 |
| 第二章 梨火疫病菌EXPR蛋白的原核表达及纯化 | 第66-82页 |
| 摘要 | 第66-67页 |
| 1 材料及方法 | 第67-75页 |
| ·材料 | 第67-69页 |
| ·菌株和载体 | 第67页 |
| ·培养基 | 第67页 |
| ·单向电泳试剂 | 第67-68页 |
| ·缓冲液配制 | 第68页 |
| ·包涵体透析复性所用缓冲液(pH7.0) | 第68页 |
| ·试剂配制 | 第68-69页 |
| ·试验方法 | 第69-75页 |
| ·梨火疫NCPPB1665基因组及质粒的大量提取参见第一章 | 第69页 |
| ·感受态细胞的制备参见第一章 | 第69页 |
| ·连接产物的转化参见第一章 | 第69页 |
| ·EaexpR基因引物设计 | 第69-70页 |
| ·pMD18-T-EaexpR阳性克隆载体的构建 | 第70-71页 |
| ·PCR反应体系 | 第70页 |
| ·PCR产物纯化 | 第70页 |
| ·将纯化后产物与克隆载体PMD18-T载体连接,连接体系 | 第70-71页 |
| ·阳性克隆的筛选 | 第71页 |
| ·Rosepta(DE3)pLysS-pET28a-expR表达载体的构建 | 第71-72页 |
| ·SDS-PAGE检测目的蛋白 | 第72页 |
| ·细胞破碎 | 第72-73页 |
| ·目的蛋白表达的鉴定 | 第73-75页 |
| 2 结果与分析 | 第75-79页 |
| ·EaexpR基因克隆载体的构建 | 第75-76页 |
| ·原核表达载体Rosepta(DE3)pLysS-pET28a-expR的构建验证 | 第76页 |
| ·目的蛋白的表达鉴定 | 第76-77页 |
| ·目的蛋白的纯化结果 | 第77-79页 |
| 3 结果讨论 | 第79-82页 |
| 参考文献 | 第82-92页 |
| 发表论文 | 第92-94页 |
| 致谢 | 第94页 |