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梨火疫病菌中未配对的luxR同源基因的功能初析以及ExpR蛋白的原核表达及纯化

目录第1-8页
摘要第8-10页
ABSTRACT第10-12页
上篇:文献综述第12-44页
 第一章 梨火疫病菌第12-20页
  1 梨火疫病菌的简史、传播及防治第12-20页
   ·梨火疫病菌简史及危害症状第12-14页
     ·梨火疫病菌简史第12页
     ·症状第12-14页
   ·梨火疫病菌的病原生物学第14页
   ·梨火疫病菌的世界分布及寄主范围第14-15页
   ·梨火疫病菌的传播、侵染及病害循环第15-16页
     ·梨火疫病菌的传播第15页
     ·梨火疫病菌的侵染第15页
     ·梨火疫病害防治第15-16页
   ·梨火疫病菌的检验检疫方法第16页
   ·基因的水平转移与病原菌的进化第16-17页
   ·梨火疫病原菌发病分子机制第17-20页
 第二章 细菌群体感应系统概述第20-44页
  1 细菌的群体感应第20-27页
   ·群体感应系统组成与类型第20-22页
     ·革兰阳性菌中寡肽介导的双组分感应系统第20页
     ·革兰阴性菌的AHL—LuxI/luxR系统第20页
     ·LuxS/AI-2依赖的QS系统第20-21页
     ·其他QS系统第21-22页
   ·细菌感知种内数量的QS系统第22-25页
     ·革兰氏阴性细菌中感知种内数量的QS系统第22-23页
     ·革兰氏阳性细菌中感知种内数量的QS系统第23-24页
     ·细菌感知种间数量的QS系统第24-25页
   ·微生物群体感应在感染性疾病治疗新策略中的潜在应用第25-27页
     ·生物膜与抗性第25页
     ·群体感应与新药物靶标第25-26页
     ·群体感应抑制剂第26-27页
     ·群体感应淬灭酶第27页
  2 群体感应LuxR家族蛋白第27-42页
   ·独立的LuxR同源物第28页
   ·LuxR家族调控蛋白的结构第28-31页
     ·LuxR的结构特点第28-29页
     ·LuxR与目的基因的相互作用第29-30页
     ·LuxR在细菌中的分布第30-31页
   ·未配对的luxR家族:信号分子的感应因子/调节因子第31-41页
     ·未配对的LuxR受体蛋白的工作模式第33-34页
     ·产AHL细菌中未配对的LuxR蛋白第34-37页
     ·不产AHL细菌中的未配对的LuxR第37-40页
     ·结论第40-41页
   ·luxR同源蛋白第41-42页
  3 展望第42-44页
下篇:研究内容第44-82页
 第一章 梨火疫病菌中未配对的LUXR同源基因的功能初析第44-66页
  摘要第44-45页
  1 材料及方法第45-54页
   ·材料第45-48页
   ·方法第48-54页
     ·培养条件第48页
     ·方法第48-52页
     ·luxR基因突变体EaAluxR及互补菌株EaAluxR(pBBRRH)的构建第52-53页
     ·luxR基因对梨火疫病菌生物学特性的影响第53-54页
  2 结果与分析第54-63页
   ·梨火疫病菌luxR基因的克隆及序列分析第55页
   ·luxR基因突变株EaAluxR及互补菌株的构建第55-56页
   ·梨火疫病菌luxR突变体的Southern杂交检测及互补株验证第56-57页
   ·luxR基因对梨火疫病菌生物学特性的影响第57-63页
     ·luxR基因能够对梨火疫病菌的致病性产生影响第57-58页
     ·luxR基因能够对梨火疫病菌的生长产生影响第58-59页
     ·luxR基因能够对梨火疫病菌的抗氧化压力产生影响第59-60页
     ·luxR基因对梨火疫病菌的应答反应产生影响第60页
     ·胞外多糖分泌量的检测第60-62页
     ·luxR基因能够对梨火疫病菌对抗生素的耐受性不产生影响第62页
     ·luxR基因对梨火疫病菌的烟草过敏性反应没有影响第62-63页
  3 讨论第63-66页
 第二章 梨火疫病菌EXPR蛋白的原核表达及纯化第66-82页
  摘要第66-67页
  1 材料及方法第67-75页
   ·材料第67-69页
     ·菌株和载体第67页
     ·培养基第67页
     ·单向电泳试剂第67-68页
     ·缓冲液配制第68页
     ·包涵体透析复性所用缓冲液(pH7.0)第68页
     ·试剂配制第68-69页
   ·试验方法第69-75页
     ·梨火疫NCPPB1665基因组及质粒的大量提取参见第一章第69页
     ·感受态细胞的制备参见第一章第69页
     ·连接产物的转化参见第一章第69页
     ·EaexpR基因引物设计第69-70页
     ·pMD18-T-EaexpR阳性克隆载体的构建第70-71页
       ·PCR反应体系第70页
       ·PCR产物纯化第70页
       ·将纯化后产物与克隆载体PMD18-T载体连接,连接体系第70-71页
       ·阳性克隆的筛选第71页
     ·Rosepta(DE3)pLysS-pET28a-expR表达载体的构建第71-72页
     ·SDS-PAGE检测目的蛋白第72页
     ·细胞破碎第72-73页
     ·目的蛋白表达的鉴定第73-75页
  2 结果与分析第75-79页
   ·EaexpR基因克隆载体的构建第75-76页
   ·原核表达载体Rosepta(DE3)pLysS-pET28a-expR的构建验证第76页
   ·目的蛋白的表达鉴定第76-77页
   ·目的蛋白的纯化结果第77-79页
  3 结果讨论第79-82页
参考文献第82-92页
发表论文第92-94页
致谢第94页

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