| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-11页 |
| 第1章 前言 | 第11-16页 |
| ·IgE 及核酸适配子简介 | 第11-12页 |
| ·核酸适配子在检测方法中的应用 | 第12-13页 |
| ·适配子在 IgE 检测及在免疫性疾病治疗中的应用 | 第13-15页 |
| ·本课题的内容及意义 | 第15-16页 |
| 第2章 随机寡核苷酸文库的构建及 PCR 条件优化 | 第16-25页 |
| ·实验试剂及仪器 | 第16-17页 |
| ·实验方法 | 第17-20页 |
| ·结果 | 第20-23页 |
| ·随机 ssDNA 文库和引物设计结果 | 第20页 |
| ·随机 ssDNA 文库及引物合成产物的质量鉴定 | 第20页 |
| ·对称 PCR 扩增条件优化 | 第20-22页 |
| ·不对称 PCR 扩增条件优化 | 第22-23页 |
| ·讨论 | 第23-25页 |
| 第3章 SELEX 技术筛选 Cε3-Cε4 蛋白 ssDNA 适配子 | 第25-40页 |
| ·实验试剂及仪器 | 第25-26页 |
| ·实验方法 | 第26-31页 |
| ·结果 | 第31-38页 |
| ·SDS-PAGE 检测人及鼠 Cε3-Cε4 蛋白结果 | 第31页 |
| ·筛选参数 | 第31-32页 |
| ·亚文库的制备 | 第32-33页 |
| ·各轮 ssDNA 适配子与 Cε3-Cε4 蛋白亲和力 | 第33页 |
| ·PCR 产物的纯化 | 第33-34页 |
| ·各适配子与靶蛋白亲和力及特异性分析结果 | 第34-35页 |
| ·适配子测序及分析结果 | 第35-38页 |
| ·讨论 | 第38-40页 |
| 第4章 Cε3-Cε4 蛋白 ssDNA 适配子的定量检测及活性测定 | 第40-55页 |
| ·实验试剂及仪器 | 第40-41页 |
| ·实验方法 | 第41-43页 |
| ·结果 | 第43-52页 |
| ·ELASA 法检测人 IgE 蛋白含量 | 第43-45页 |
| ·适配子与鼠 Cε3-Cε4 蛋白亲和力及特异性检测结果 | 第45页 |
| ·Western blotting 检测高亲和力适配子与鼠 Cε3-Cε4 蛋白亲和力 | 第45-47页 |
| ·适配子与鼠 Cε3-Cε4 蛋白 Kd 值测定 | 第47-48页 |
| ·大鼠 PCA 实验 | 第48-51页 |
| ·RBL-2H3 细胞中 Ca2+浓度检测 | 第51页 |
| ·RBL-2H3 细胞中β-氨基己糖苷酶检测 | 第51-52页 |
| ·讨论 | 第52-55页 |
| 第5章 结论 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-61页 |
| 致谢 | 第61页 |
