目录 | 第1-6页 |
摘要 | 第6-8页 |
Abstract | 第8-12页 |
第一章 文献综述 | 第12-33页 |
引言 | 第12-13页 |
第一节 高通量测序技术在中药分子生物学研究中的应用 | 第13-15页 |
1 现代高通量测序技术的研究进展 | 第13页 |
2 现代高通量测序技术在中药领域中的研究意义 | 第13-15页 |
第二节 灵芝三萜及其生物合成途径研究进展 | 第15-26页 |
1 灵芝三萜研究进展 | 第15-16页 |
·灵芝三萜种类 | 第15-16页 |
·灵芝三萜药理活性研究进展 | 第16页 |
2 灵芝三萜生物合成的分子生物学研究 | 第16-23页 |
3 三萜途径中细胞色素P450(CYP450)研究进展 | 第23-26页 |
·P450在中药三萜类化合物生物合成途径中研究进展 | 第24页 |
·真菌细胞色素P450的其他功能 | 第24-26页 |
第三节 金银花成分及其生物合成途径研究进展 | 第26-33页 |
1 金银花化学成分研究进展 | 第27页 |
2 绿原酸的药理作用及其生物合成机制研究 | 第27-30页 |
·绿原酸药理研究进展 | 第27-29页 |
·绿原酸生物合成分子机制研究进展 | 第29-30页 |
·绿原酸生物合成途径关键酶 | 第30页 |
3 木犀草素的药理作用及其生物合成分子机制研究 | 第30-33页 |
·木犀草素的药理进展 | 第30-32页 |
·木犀草素生物合成分子机制研究进展 | 第32-33页 |
第二章 灵芝三萜生物合成途径关键酶基因的分析 | 第33-69页 |
第一节 灵芝三萜合成途径关键酶基因的挖掘 | 第33-56页 |
1 材料与方法 | 第33-34页 |
·基因信息来源 | 第33页 |
·基因注释及序列分析 | 第33-34页 |
·P450家族进化分析 | 第34页 |
2 结果与讨论 | 第34-54页 |
·灵芝三萜生物合成上游途径关键酶基因的分析 | 第34-40页 |
·赤芝P450s基因的生物信息学分析 | 第40-54页 |
3 小结 | 第54-56页 |
第二节 灵芝三萜生物合成关键酶基因的定量分析 | 第56-69页 |
1 材料与方法 | 第56-57页 |
·材料培养 | 第56页 |
·仪器与试剂 | 第56页 |
·实时荧光定量PCR | 第56-57页 |
2 结果与讨论 | 第57-68页 |
·灵芝三萜生物合成上游途径关键酶基因的表达分析 | 第57-58页 |
·赤芝全基因组P450s的表达分析 | 第58-59页 |
·赤芝P450s与LAS的共表达分析 | 第59-68页 |
3 小结 | 第68-69页 |
第三章 绿原酸生物合成途径关键酶基因的挖掘和克隆 | 第69-108页 |
第一节 基于高通量测序454 GS FLX的金银花转录组分析 | 第69-98页 |
1 材料与方法 | 第69-74页 |
·植物材料 | 第69-70页 |
·试剂 | 第70页 |
·仪器 | 第70页 |
·方法 | 第70-74页 |
2 结果与分析 | 第74-96页 |
·叶、花、茎RNA质量 | 第74-75页 |
·合成cDNA 2链 | 第75-76页 |
·测序结果 | 第76-77页 |
·拼接组装结果 | 第77-78页 |
·注释结果概述 | 第78-84页 |
·金银花中合成关键酶酶基因的挖掘 | 第84-95页 |
·金银花叶和花共表达基因分析 | 第95-96页 |
3 小结 | 第96-98页 |
第二节 绿原酸合成关键基因HCT/HQT的克隆 | 第98-108页 |
1 材料与方法 | 第98-100页 |
·材料 | 第98-99页 |
·RACE技术 | 第99-100页 |
2 结果与分析 | 第100-106页 |
·HQT/HCT基因的克隆及序列分析 | 第100-106页 |
·HQT/HCT基因编码蛋白理化性质的预测分析 | 第106页 |
·HQT基因过表达载体构建和原核表达载体构建 | 第106页 |
3 小结 | 第106-108页 |
第四章 结论与展望 | 第108-110页 |
一 研究结论 | 第108-109页 |
二 问题及展望 | 第109-110页 |
参考文献 | 第110-121页 |
附录 | 第121-136页 |
1 附图 | 第121-130页 |
2 附表 | 第130-136页 |
致谢 | 第136-137页 |
个人简历 | 第137页 |