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灵芝三萜和金银花绿原酸生物合成途径关键酶基因的挖掘及分析

目录第1-6页
摘要第6-8页
Abstract第8-12页
第一章 文献综述第12-33页
 引言第12-13页
 第一节 高通量测序技术在中药分子生物学研究中的应用第13-15页
  1 现代高通量测序技术的研究进展第13页
  2 现代高通量测序技术在中药领域中的研究意义第13-15页
 第二节 灵芝三萜及其生物合成途径研究进展第15-26页
  1 灵芝三萜研究进展第15-16页
   ·灵芝三萜种类第15-16页
   ·灵芝三萜药理活性研究进展第16页
  2 灵芝三萜生物合成的分子生物学研究第16-23页
  3 三萜途径中细胞色素P450(CYP450)研究进展第23-26页
   ·P450在中药三萜类化合物生物合成途径中研究进展第24页
   ·真菌细胞色素P450的其他功能第24-26页
 第三节 金银花成分及其生物合成途径研究进展第26-33页
  1 金银花化学成分研究进展第27页
  2 绿原酸的药理作用及其生物合成机制研究第27-30页
   ·绿原酸药理研究进展第27-29页
   ·绿原酸生物合成分子机制研究进展第29-30页
   ·绿原酸生物合成途径关键酶第30页
  3 木犀草素的药理作用及其生物合成分子机制研究第30-33页
   ·木犀草素的药理进展第30-32页
   ·木犀草素生物合成分子机制研究进展第32-33页
第二章 灵芝三萜生物合成途径关键酶基因的分析第33-69页
 第一节 灵芝三萜合成途径关键酶基因的挖掘第33-56页
  1 材料与方法第33-34页
   ·基因信息来源第33页
   ·基因注释及序列分析第33-34页
   ·P450家族进化分析第34页
  2 结果与讨论第34-54页
   ·灵芝三萜生物合成上游途径关键酶基因的分析第34-40页
   ·赤芝P450s基因的生物信息学分析第40-54页
  3 小结第54-56页
 第二节 灵芝三萜生物合成关键酶基因的定量分析第56-69页
  1 材料与方法第56-57页
   ·材料培养第56页
   ·仪器与试剂第56页
   ·实时荧光定量PCR第56-57页
  2 结果与讨论第57-68页
   ·灵芝三萜生物合成上游途径关键酶基因的表达分析第57-58页
   ·赤芝全基因组P450s的表达分析第58-59页
   ·赤芝P450s与LAS的共表达分析第59-68页
  3 小结第68-69页
第三章 绿原酸生物合成途径关键酶基因的挖掘和克隆第69-108页
 第一节 基于高通量测序454 GS FLX的金银花转录组分析第69-98页
  1 材料与方法第69-74页
   ·植物材料第69-70页
   ·试剂第70页
   ·仪器第70页
   ·方法第70-74页
  2 结果与分析第74-96页
   ·叶、花、茎RNA质量第74-75页
   ·合成cDNA 2链第75-76页
   ·测序结果第76-77页
   ·拼接组装结果第77-78页
   ·注释结果概述第78-84页
   ·金银花中合成关键酶酶基因的挖掘第84-95页
   ·金银花叶和花共表达基因分析第95-96页
  3 小结第96-98页
 第二节 绿原酸合成关键基因HCT/HQT的克隆第98-108页
  1 材料与方法第98-100页
   ·材料第98-99页
   ·RACE技术第99-100页
  2 结果与分析第100-106页
   ·HQT/HCT基因的克隆及序列分析第100-106页
   ·HQT/HCT基因编码蛋白理化性质的预测分析第106页
   ·HQT基因过表达载体构建和原核表达载体构建第106页
  3 小结第106-108页
第四章 结论与展望第108-110页
 一 研究结论第108-109页
 二 问题及展望第109-110页
参考文献第110-121页
附录第121-136页
 1 附图第121-130页
 2 附表第130-136页
致谢第136-137页
个人简历第137页

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