| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-9页 |
| 1 引言 | 第9-17页 |
| ·隐孢子虫的分类 | 第10-11页 |
| ·隐孢子虫的生活史 | 第11-12页 |
| ·隐孢子虫的传播及致病性 | 第12-13页 |
| ·隐孢子虫的流行病学 | 第13-14页 |
| ·隐孢子虫的检测 | 第14-15页 |
| ·隐孢子虫病的治疗与预防 | 第15-16页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第16-17页 |
| 2 材料与方法 | 第17-28页 |
| ·材料 | 第17-18页 |
| ·质粒与菌种 | 第17页 |
| ·主要试剂 | 第17页 |
| ·引物合成 | 第17-18页 |
| ·主要仪器设备 | 第18页 |
| ·方法 | 第18-28页 |
| ·Cp15基因的PCR扩增 | 第18-19页 |
| ·Cp15基因PCR扩增产物胶回收 | 第19页 |
| ·Cp15基因的连接反应 | 第19页 |
| ·Cp15基因连接产物的转化 | 第19-21页 |
| ·pMD19—Cp15的酶切和PCR鉴定和测序 | 第21-22页 |
| ·蛋白氨基酸序列分析 | 第22页 |
| ·GST融合表达载体pGEX-Cp15的构建 | 第22-23页 |
| ·重组质粒pGEX-Cp15的转化 | 第23-24页 |
| ·重组质粒pGEX-Cp15阳性克隆的筛选 | 第24页 |
| ·重组质粒pGEX-Cp15的双酶切鉴定 | 第24页 |
| ·重组质粒pGEX-Cp15的PCR鉴定 | 第24-25页 |
| ·Cp15基因正确阅读框的确定 | 第25页 |
| ·重组质粒pGEX-Cp15转化到E.coli BL21 | 第25页 |
| ·IPTG诱导表达 | 第25-26页 |
| ·CP15融合蛋白的大量表达 | 第26-27页 |
| ·GST融合蛋白的Western-blotting鉴定 | 第27页 |
| ·CP15蛋白和GST蛋白的纯化 | 第27页 |
| ·田间血清学调查实验 | 第27-28页 |
| 3 结果 | 第28-41页 |
| ·Cp15基因PCR扩增的结果 | 第28页 |
| ·重组质粒pMD19—Cp15的PCR鉴定以及测序结果 | 第28-31页 |
| ·pMD19—Cp15质粒 | 第28-29页 |
| ·pMD19—Cp15的PCR鉴定 | 第29页 |
| ·pMD19—Cp15质粒测序及比对结果 | 第29-31页 |
| ·蛋白氨基酸序列分析 | 第31-35页 |
| ·CP15蛋白氨基酸序列 | 第31页 |
| ·Cp15蛋白疏水性和相关特性分析 | 第31-32页 |
| ·CP15蛋白二级结构预测 | 第32-35页 |
| ·GST融合表达载体pGEX-Cp15的构建 | 第35-37页 |
| ·pGEX-Cp15的双酶切鉴定 | 第35-36页 |
| ·pGEX-Cp15的PCR鉴定 | 第36页 |
| ·阅读框的鉴定 | 第36-37页 |
| ·Cp15基因原核表达条件的优化 | 第37-38页 |
| ·Western-blotting鉴定 | 第38-39页 |
| ·鉴定破碎菌体沉淀以及上清中的重组CP15蛋白含量 | 第39-40页 |
| ·田间血清学调查实验结果 | 第40-41页 |
| 4 讨论 | 第41-44页 |
| 5 结论 | 第44-45页 |
| 致谢 | 第45-46页 |
| 参考文献 | 第46-53页 |
| 作者简介 | 第53页 |
