| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 第一章 前言 | 第11-26页 |
| ·木聚糖结构 | 第11-12页 |
| ·木聚糖酶 | 第12-25页 |
| ·木聚糖酶定义 | 第12页 |
| ·木聚糖酶的结构 | 第12-14页 |
| ·木聚糖酶的分类 | 第14-16页 |
| ·木聚糖酶理化性质 | 第16-17页 |
| ·木聚糖酶催化机制 | 第17页 |
| ·木聚糖酶的基因工程研究 | 第17-19页 |
| ·木聚糖酶基因的定点突变 | 第19-21页 |
| ·木聚糖酶的应用 | 第21-25页 |
| ·立题依据和研究意义 | 第25-26页 |
| 第二章 Kocuria sp.3-3的鉴定及其木聚糖酶的纯化 | 第26-39页 |
| ·材料和方法 | 第26-33页 |
| ·实验仪器 | 第26页 |
| ·主要药品和试剂 | 第26-27页 |
| ·实验菌株 | 第27页 |
| ·培养基 | 第27页 |
| ·菌株形态观察 | 第27-28页 |
| ·基因组DNA提取 | 第28页 |
| ·16S rDNA扩增 | 第28-29页 |
| ·16S rDNA测序及系统发育学分析 | 第29页 |
| ·菌株生理特征鉴定 | 第29页 |
| ·菌株生化特征鉴定 | 第29-30页 |
| ·木糖标准曲线的制作 | 第30-31页 |
| ·木聚糖酶酶活检测 | 第31页 |
| ·Kxp粗酶液的制备 | 第31页 |
| ·Kxp的纯化 | 第31-33页 |
| ·结果与分析 | 第33-37页 |
| ·菌株形态观察 | 第33页 |
| ·菌株生理生化特征检测及比对 | 第33-34页 |
| ·菌株16S rDNA测序及系统发育学分析 | 第34-35页 |
| ·木糖标准曲线的制作 | 第35-36页 |
| ·Kxp粗酶液的制备 | 第36页 |
| ·Kxp粗酶液的纯化 | 第36-37页 |
| 本章小结 | 第37-39页 |
| 第三章 Kocuria sp.3-3基因组文库的构建和木聚糖酶基因Kxg的筛选 | 第39-51页 |
| ·材料和方法 | 第39-44页 |
| ·实验仪器 | 第39页 |
| ·药品和试剂 | 第39页 |
| ·菌株和质粒 | 第39页 |
| ·培养基 | 第39-40页 |
| ·3-3 Kocuria sp.3-3基因组DNA提取 | 第40页 |
| ·基因组的酶切 | 第40页 |
| ·酶切片段切胶回收 | 第40-41页 |
| ·感受态细胞制备 | 第41页 |
| ·菌株基因组文库的构建 | 第41-42页 |
| ·Kocuria sp.3-3基因组文库质量的鉴定 | 第42-43页 |
| ·含目的基因的阳性转化子的筛选 | 第43页 |
| ·木聚糖酶DNA序列测定 | 第43页 |
| ·3-3木聚糖酶分析 | 第43-44页 |
| ·结果和讨论 | 第44-50页 |
| ·Kocuria sp.3-3基因组DNA提取 | 第44页 |
| ·Kocuria sp.3-3基因组DNA的酶切 | 第44-46页 |
| ·基因组文库构建 | 第46-47页 |
| ·含木聚糖酶基因的阳性转化子的筛选 | 第47页 |
| ·木聚糖酶基因DNA序列测定 | 第47-48页 |
| ·木聚糖酶Kxp分析 | 第48-50页 |
| 本章小结 | 第50-51页 |
| 第四章 木聚糖酶Kxp在大肠杆菌中的诱导表达、纯化及酶学性质研究 | 第51-64页 |
| ·材料和方法 | 第51-55页 |
| ·实验仪器 | 第51页 |
| ·药品和试剂 | 第51页 |
| ·实验菌株及质粒 | 第51页 |
| ·培养基 | 第51页 |
| ·木聚糖酶基因Kxg的克隆 | 第51-52页 |
| ·木聚糖酶Kxp的表达 | 第52-53页 |
| ·诱导产酶条件优化 | 第53-54页 |
| ·重组木聚糖酶的纯化 | 第54页 |
| ·重组木聚糖酶酶学性质研究 | 第54-55页 |
| ·结果和讨论 | 第55-63页 |
| ·木聚糖酶基因克隆结果 | 第55-56页 |
| ·木聚糖酶表达结果 | 第56页 |
| ·诱导产酶条件优化 | 第56-57页 |
| ·木聚糖酶的纯化 | 第57-58页 |
| ·重组木聚糖酶酶学性质研究 | 第58-63页 |
| 本章小结 | 第63-64页 |
| 第五章 木聚糖酶Kxp定点突变初步研究 | 第64-77页 |
| ·材料和方法 | 第64-69页 |
| ·实验仪器 | 第64页 |
| ·药品和试剂 | 第64页 |
| ·实验菌株及质粒 | 第64页 |
| ·实验用引物 | 第64-65页 |
| ·培养基 | 第65页 |
| ·定点突变PCR扩增模板的构建 | 第65-66页 |
| ·引物设计 | 第66页 |
| ·对木聚糖酶各位点进行定点突变 | 第66-68页 |
| ·突变蛋白表达体系的构建 | 第68页 |
| ·突变蛋白的诱导表达 | 第68页 |
| ·突变木聚糖酶的纯化 | 第68页 |
| ·突变木聚糖酶酶动力学常数测定 | 第68页 |
| ·突变木聚糖酶KxpH102C热稳定性研究 | 第68-69页 |
| ·结果和讨论 | 第69-76页 |
| ·突变木聚糖酶基因的PCR扩增 | 第69页 |
| ·突变蛋白的诱导表达 | 第69-70页 |
| ·突变蛋白的纯化 | 第70-71页 |
| ·突变木聚糖酶酶动力学常数测定 | 第71-72页 |
| ·H102C热稳定性研究 | 第72页 |
| ·讨论 | 第72-76页 |
| 本章小结 | 第76-77页 |
| 参考文献 | 第77-85页 |
| 致谢 | 第85-86页 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 | 第86页 |
