| 中文摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-9页 |
| 第一章 文献综述及选题目的、意义 | 第9-17页 |
| 1 引言 | 第9-10页 |
| 2 烟草花叶病毒构建功能性复合材料的研究进展 | 第10-14页 |
| ·烟草花叶病毒外壳蛋白的生物学特性 | 第10-11页 |
| ·烟草花叶病毒构建功能性复合材料在数字化电子设备方面的研究进展 | 第11-12页 |
| ·烟草花叶病毒构建功能性复合材料用于生物产氢的研究背景 | 第12-13页 |
| ·生物分子构建的功能性复合材料在光催化水氧化方面的研究进展 | 第13-14页 |
| 3 无机结合肽的相关研究进展及其应用 | 第14-15页 |
| 4 本实验的目的和意义 | 第15-17页 |
| 第二章 烟草轻绿花叶病毒外壳蛋白重组表达载体的构建及原核表达可溶性探索 | 第17-33页 |
| 1 材料 | 第17-19页 |
| ·实验仪器 | 第17页 |
| ·克隆用主要试剂 | 第17-18页 |
| ·质粒和菌株 | 第17页 |
| ·酶和主要试剂 | 第17-18页 |
| ·表达用主要试剂 | 第18-19页 |
| 2 实验方法 | 第19-24页 |
| ·合成TMGMV-CP第123位氨基酸突变为半胱氨酸且末段编码氧化铱无机结合肽的基因 | 第19-20页 |
| ·TMGMV-CP-IrO_2和TMGMV-CP基因引物的设计 | 第19-20页 |
| ·TMGMV-CP-IrO_2和TMGMV-CP基因的PCR扩增 | 第20页 |
| ·重组质粒的构建 | 第20-22页 |
| ·双酶切目的基因和载体,露出粘性末端 | 第20-21页 |
| ·连接并转化DH5α感受态细胞 | 第21页 |
| ·鉴定重组表达载体是否构建成功 | 第21-22页 |
| ·融合蛋白的原核表达 | 第22页 |
| ·融合蛋白表达量与诱导时间的关系 | 第22-23页 |
| ·融合蛋白的可溶性摸索 | 第23-24页 |
| ·重组表达质粒转化表达宿主菌 | 第23页 |
| ·诱导温度为20℃时,融合蛋白的可溶性表达条件探索 | 第23页 |
| ·诱导温度为30℃时,融合蛋白的可溶性表达条件探索 | 第23页 |
| ·诱导温度为37℃时,融合蛋白的可溶性表达条件探索 | 第23-24页 |
| 3 结果与分析 | 第24-30页 |
| ·PCR扩增结果 | 第24页 |
| ·PCR鉴定和酶切鉴定及测序鉴定 | 第24-25页 |
| ·融合蛋白的表达情况 | 第25-26页 |
| ·不同诱导剂浓度下融合蛋白的表达量随时间的变化情况 | 第26-28页 |
| ·蛋白的可溶性表达条件探索 | 第28-30页 |
| 4 讨论与结论 | 第30-33页 |
| ·重组表达质粒的构建 | 第30-31页 |
| ·重组质粒 PGEX-4T-1/ TMGMV-CP-IrOz 的表达 | 第31页 |
| ·融合蛋白的可溶性表达条件探索 | 第31-33页 |
| 第三章 重组蛋白的包涵体纯化、GST“标签”切除及氧化铱纳米粉的结合 | 第33-46页 |
| 1 材料 | 第33-35页 |
| ·实验仪器 | 第33页 |
| ·材料试剂 | 第33-35页 |
| ·重组质粒与菌种 | 第33-34页 |
| ·其他试剂和溶液 | 第34-35页 |
| 2 包涵体蛋白的纯化 | 第35-37页 |
| ·工程菌的培养 | 第35页 |
| ·提取包涵体 | 第35页 |
| ·包涵体复性 | 第35-36页 |
| ·AKTA~(TM) purifier凝胶层析纯化 | 第36页 |
| ·SDS-PAGE和Western Blotting检测鉴定纯化产物 | 第36-37页 |
| 3 融合蛋白与氧化铱纳米粉的结合和GST“标签”的切除 | 第37-38页 |
| ·结合氧化铱纳米粉 | 第37页 |
| ·制作蛋白标准曲线 | 第37页 |
| ·纳米粉的处理 | 第37页 |
| ·纳米粉与重组蛋白结合 | 第37页 |
| ·检测结合纳米粉后蛋白的浓度变化 | 第37页 |
| ·凝血酶切除融合蛋白上带有的GST标签 | 第37-38页 |
| 4 结果与分析 | 第38-42页 |
| ·工程菌的培养 | 第38页 |
| ·提取包涵体 | 第38页 |
| ·AKTATM purifier凝胶层析纯化 | 第38-40页 |
| ·融合蛋白与氧化铱纳米粉的结合和GST标签的切除 | 第40-42页 |
| 5 讨论与结论 | 第42-46页 |
| ·包涵体的提取及变性、复性 | 第42-43页 |
| ·分子筛纯化复性后的融合蛋白 | 第43-45页 |
| ·融合蛋白与氧化铱纳米粉的结合和GST“标签”的切除 | 第45-46页 |
| 第四章 结论与展望 | 第46-47页 |
| 参考文献 | 第47-51页 |
| 致谢 | 第51页 |
