| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-15页 |
| 中英文缩略词表 | 第15-18页 |
| 第一章 成熟精子中mRNA的研究现状 | 第18-50页 |
| 一、精子发生的生理学过程 | 第18-22页 |
| 1、精子发生(spermatogenesis) | 第18-20页 |
| 2、精子的结构 | 第20页 |
| 3、精子发生过程中的基因表达与调控 | 第20-22页 |
| 二、精子中mRNA的研究概况 | 第22-33页 |
| 1、关于精子中RNA存在的争议及其原因 | 第22-23页 |
| 2、精子mRNA存在的证据 | 第23-25页 |
| 3、成熟精子中mRNA的种类和特征 | 第25-28页 |
| 4、精子中mRNA的可能功能 | 第28-33页 |
| 三、SAGE技术发展概况及其特点 | 第33-45页 |
| 1、功能基因组学的发展及其技术方法概况 | 第33-36页 |
| 2、SAGE技术原理、步骤 | 第36-39页 |
| 3、SAGE技术应用及优点 | 第39-43页 |
| 4、SAGE后续数据分析及其不足 | 第43-45页 |
| 四、SAGE技术在人类成熟精子mRNA分析中应用 | 第45-50页 |
| 1、人类成熟精子mRNA的SAGE库构建策略及分析 | 第45-46页 |
| 2、人类成熟精子mRNA的SAGE库的未知标签产生 | 第46-47页 |
| 3、人类成熟精子mRNA的SAGE库的未知基因克隆的难点及方法 | 第47-50页 |
| 第二章 构建克隆SAGE标签对应的3’端cDNA片段方法体系 | 第50-80页 |
| 一、前言 | 第50-52页 |
| 二、材料与方法 | 第52-61页 |
| 1、材料与试剂 | 第52-56页 |
| 2、实验方法 | 第56-61页 |
| 三、结果 | 第61-73页 |
| 1、精子纯化的检测情况 | 第61-62页 |
| 2、TSATPCR原理及技术路线 | 第62-65页 |
| 3、总cDNAs全长的扩增 | 第65-67页 |
| 4、两步PCR克隆未知SAGE标签方法体系(TSATPCR)结果 | 第67-68页 |
| 5、TSATPCR产物测序BLAST结果分析 | 第68-72页 |
| 6、TSATPCR与(GLGI)方法的比较 | 第72-73页 |
| 四、讨论 | 第73-80页 |
| 第三章 精子中的新基因QSA克隆及功能的初步研究 | 第80-128页 |
| 一、前言 | 第80-81页 |
| 二、材料和方法 | 第81-103页 |
| 1、材料与试剂 | 第81-86页 |
| 2、试验方法 | 第86-103页 |
| 三、结果 | 第103-121页 |
| 1、QSA全长序列的获得 | 第103-105页 |
| 2、生物信息学法分析基因（QSA）序列结果 | 第105-110页 |
| 3、RTPCR法验证（QSA）序列组织特异性表达的结果 | 第110-111页 |
| 4、原位杂交验证（QSA）序列特异性表达的结果 | 第111-116页 |
| 5、重组质粒pET28aQSA的鉴定 | 第116页 |
| 6、pET28aQSA重组融合蛋白的诱导表达及纯化的鉴定 | 第116-118页 |
| 7、pET28aQSA重组蛋白抗体效价结果 | 第118页 |
| 8、Westernblot及免疫组化 | 第118-120页 |
| 9、pET28aQSA重组蛋白的蛋白芯片实验的结果 | 第120-121页 |
| 四、讨论 | 第121-128页 |
| 第四章、展望 | 第128-129页 |
| 参考文献 | 第129-146页 |
| 致谢 | 第146-147页 |
| 攻读博士学位期间发表的学术论文 | 第147-149页 |
| 攻读博士学位期间申请的专利 | 第149-150页 |
| 附件 | 第150-168页 |
