| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-8页 |
| 第一章 绪论 | 第8-16页 |
| ·概述 | 第8-11页 |
| ·L-乳酸的性质 | 第8页 |
| ·L-乳酸的应用 | 第8-9页 |
| ·L-乳酸的生产 | 第9-11页 |
| ·国内外发酵法制备L-乳酸研究进展 | 第11-14页 |
| ·米根霉发酵法生产L-乳酸的研究进展 | 第11-12页 |
| ·细菌发酵法生产L-乳酸的研究进展 | 第12页 |
| ·酿酒酵母生产L-乳酸的研究进展 | 第12-14页 |
| ·立题意义 | 第14页 |
| ·本论文主要研究内容 | 第14-16页 |
| 第二章 材料与方法 | 第16-24页 |
| ·菌株与培养基 | 第16-17页 |
| ·菌株与质粒 | 第16页 |
| ·培养基 | 第16-17页 |
| ·仪器和试剂 | 第17页 |
| ·仪器 | 第17页 |
| ·试剂 | 第17页 |
| ·分子生物学实验 | 第17-21页 |
| ·LiAc 高效转化法 | 第17-18页 |
| ·菌落PCR | 第18页 |
| ·LDH 游离表达载体pY13TEF1-LDH 的构建 | 第18-19页 |
| ·LDH 整合表达片段的构建 | 第19-20页 |
| ·LDH 整合表达片段转化酿酒酵母及突变株的验证 | 第20-21页 |
| ·nox 表达载体pY14MET25-nox 的构建 | 第21页 |
| ·突变株CEN.Pk2-1C[LDH]-nox 的构建及筛选 | 第21页 |
| ·培养方法 | 第21-22页 |
| ·大肠杆菌培养条件 | 第21页 |
| ·摇瓶发酵培养条件 | 第21页 |
| ·1.3 L 罐发酵条件 | 第21-22页 |
| ·不同溶氧水平发酵条件 | 第22页 |
| ·分析方法 | 第22-24页 |
| ·发酵过程中糖浓度的测定 | 第22页 |
| ·生长曲线的测定 | 第22页 |
| ·L-乳酸、乙醇及其他代谢物的测定 | 第22页 |
| ·NADH 氧化酶活性测定 | 第22页 |
| ·胞内NADH/NAD+的测定 | 第22-24页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第24-50页 |
| ·LDH 游离表达菌株CEN.PK2-1C-LDH 的构建与代谢分析 | 第24-26页 |
| ·LDH 游离表达菌株的构建和验证 | 第24-25页 |
| ·LDH 游离表达菌株CEN.PK2-1C-LDH 的代谢分析 | 第25-26页 |
| ·LDH 整合表达菌株的构建与代谢分析 | 第26-38页 |
| ·LDH 整合表达菌株CEN.PK2-1C[LDH]的构建 | 第26-28页 |
| ·LDH 整合表达菌株CEN.PK2-1C[LDH]的PCR 验证 | 第28-29页 |
| ·60 g/L 初始葡萄糖浓度的分批发酵实验 | 第29-31页 |
| ·90 g/L 初始葡萄糖浓度的分批发酵实验 | 第31-35页 |
| ·不同溶氧条件下突变株CEN.PK2-1C[LDH]的代谢产物分析 | 第35-38页 |
| ·过量表达nox 促进L-乳酸积累 | 第38-48页 |
| ·重组质粒pY14MET25-nox 的构建与验证 | 第39-41页 |
| ·突变株CEN.K2-1C[LDH]-nox 的代谢分析 | 第41-43页 |
| ·不同初始葡萄糖浓度下突变株CEN.PK2-1C[LDH]-nox 的发酵情况 | 第43-44页 |
| ·不同发酵模式下突变株CEN.PK2-1C[LDH]-nox 的发酵情况 | 第44-48页 |
| ·结论 | 第48-50页 |
| 第四章 展望 | 第50-51页 |
| 致谢 | 第51-53页 |
| 参考文献 | 第53-58页 |
| 附录：作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第58页 |
