番木瓜苄基硫苷生物合成相关基因克隆与表达分析
| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-9页 |
| 缩略词表 | 第9-12页 |
| 1 前言 | 第12-27页 |
| ·番木瓜及其营养保健作用 | 第12-13页 |
| ·异硫氰酸苄酯类的抗癌活性和机理 | 第13-15页 |
| ·硫苷的结构与生物合成途径 | 第15-18页 |
| ·基因克隆与番木瓜全基因组研究 | 第18-19页 |
| ·基因功能研究 | 第19-22页 |
| ·常用基因功能研究方法 | 第19-20页 |
| ·pRNAi-LIC质粒的结构和原理 | 第20-22页 |
| ·原生质体相关研究 | 第22-23页 |
| ·实时荧光定量与基因功能研究 | 第23-25页 |
| ·实时荧光定量研究进展 | 第23-25页 |
| ·荧光定量与基因功能研究 | 第25页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第25-26页 |
| ·研究技术路线 | 第26-27页 |
| 2 材料与方法 | 第27-49页 |
| ·材料、仪器与试剂 | 第27-29页 |
| ·材料 | 第27页 |
| ·仪器与试剂 | 第27-29页 |
| ·方法 | 第29-49页 |
| ·苄基硫苷(BG)含量测定 | 第29-31页 |
| ·异硫氰酸苄酯(BITC)含量测定及体外活性研究 | 第31-33页 |
| ·番木瓜BG生物合成相关基因克隆与生物信息学分析 | 第33-39页 |
| ·番木瓜BG生物合成相关基因荧光定量分析 | 第39-43页 |
| ·番木瓜CYP83B基因功能分析 | 第43-49页 |
| 3 结果与分析 | 第49-86页 |
| ·番木瓜BG含量测定结果 | 第49-54页 |
| ·对照品的色谱图 | 第49页 |
| ·线性关系测定结果 | 第49-50页 |
| ·精密度测定结果 | 第50-51页 |
| ·重复性测定结果 | 第51页 |
| ·稳定性测定结果 | 第51页 |
| ·加样回收率测定结果 | 第51-52页 |
| ·样品含量测定结果 | 第52-54页 |
| ·番木瓜BITC含量测定结果 | 第54-59页 |
| ·对照品的气相色谱图 | 第54-55页 |
| ·线性关系测定结果 | 第55页 |
| ·精密度测定结果 | 第55-56页 |
| ·重复性测定结果 | 第56页 |
| ·稳定性实验测定结果 | 第56页 |
| ·加样回收率测定结果 | 第56-57页 |
| ·样品含量测定结果 | 第57-58页 |
| ·BITC体外对人肺癌H69细胞的抑制作用结果 | 第58-59页 |
| ·番木瓜BG合成相关基因克隆与生物信息学分析结果 | 第59-70页 |
| ·番木瓜叶子总RNA的提取 | 第59-60页 |
| ·番木瓜BG生物合成相关基因的克隆 | 第60页 |
| ·基因测序与生物信息学分析 | 第60-70页 |
| ·番木瓜BG生物合成相关基因荧光定量结果 | 第70-81页 |
| ·总RNA提取结果分析 | 第70-71页 |
| ·扩增曲线和融解曲线分析 | 第71-72页 |
| ·标准曲线和扩增效率分析 | 第72-74页 |
| ·各基因荧光定量PCR结果 | 第74-77页 |
| ·荧光定量结果分析 | 第77-81页 |
| ·番木瓜CYP83B基因功能分析结果 | 第81-86页 |
| ·原生质体制备结果 | 第81页 |
| ·载体构建 | 第81-82页 |
| ·质粒转化原生质体结果 | 第82-83页 |
| ·CYP83B沉默结果 | 第83-84页 |
| ·BG含量测定结果 | 第84-86页 |
| 4 讨论与结论 | 第86-91页 |
| ·讨论 | 第86-89页 |
| ·研究样品的选择 | 第86页 |
| ·BG和BITC的含量及活性 | 第86-87页 |
| ·引物设计与生物信息学分析 | 第87-89页 |
| ·荧光定量结果 | 第89页 |
| ·研究展望 | 第89页 |
| ·结论 | 第89-91页 |
| 参考文献 | 第91-97页 |
| 附图：生物信息学分析结果 | 第97-115页 |
| 致谢 | 第115页 |
