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MiR-196a调控p27kip1促进胃癌细胞增殖的机制研究

摘要第1-7页
Abstract第7-9页
前言第9-14页
1. 实验材料与仪器第14-16页
     ·实验动物第14页
     ·细胞系第14页
     ·胃癌组织标本第14页
     ·实验试剂第14-15页
     ·实验仪器第15-16页
2. 实验方法第16-33页
     ·细胞培养第16页
     ·总 RNA 的提取第16-18页
     ·实时定量 PCR第18-20页
     ·蛋白质的提取与浓度测定第20-22页
     ·蛋白质免疫印迹(Western blot)第22-25页
     ·免疫组化第25-27页
     ·MiR-196a inhibitors 和 mimics 的瞬时转染第27页
     ·G418 筛选稳转细胞第27-28页
     ·MTT 法检测细胞增殖活力第28页
     ·流式细胞术检测细胞周期第28-29页
     ·Hoechst 33258 染色第29页
     ·流式细胞术检测细胞凋亡第29-30页
     ·克隆形成试验第30页
     ·Transwell 实验检测细胞侵袭能力第30-31页
     ·荧光素酶实验检测 miR-196a 与靶基因 p27~(kip1)mRNA3’UTR 的结合第31-32页
     ·裸鼠成瘤实验第32页
     ·数据处理第32-33页
3. 实验结果第33-50页
     ·miR-196a 在胃癌组织中的表达显著上调第33-36页
     ·外源性上调或封闭胃癌细胞系中 miR-196a 的表达第36-37页
     ·miR-196a 对细胞增殖功能及周期的影响第37-38页
     ·miR-196a 对胃癌细胞凋亡能力的影响第38-39页
     ·miR-196a 促进胃癌细胞的肿瘤形成能力第39-42页
     ·p27~(kip1)是 miR-196a 的靶基因第42-44页
     ·SGC-7901 细胞中过表达 p27~(kip1)第44-45页
     ·p27~(kip1)对胃癌细胞增殖及周期的影响第45-46页
     ·miR-196a 发挥癌基因的功能依赖于 p27~(kip1)的下调第46-48页
     ·p27~(kip1)与 miR-196a 的表达水平呈负性相关第48-50页
4. 讨论第50-54页
参考文献第54-59页
致谢第59-60页
综述第60-72页
 参考文献第68-72页
附录(二)缩略词表第72-73页
附录(三)硕士期间发表文章第73-74页
附件第74-79页

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