摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-9页 |
前言 | 第9-14页 |
1. 实验材料与仪器 | 第14-16页 |
·实验动物 | 第14页 |
·细胞系 | 第14页 |
·胃癌组织标本 | 第14页 |
·实验试剂 | 第14-15页 |
·实验仪器 | 第15-16页 |
2. 实验方法 | 第16-33页 |
·细胞培养 | 第16页 |
·总 RNA 的提取 | 第16-18页 |
·实时定量 PCR | 第18-20页 |
·蛋白质的提取与浓度测定 | 第20-22页 |
·蛋白质免疫印迹(Western blot) | 第22-25页 |
·免疫组化 | 第25-27页 |
·MiR-196a inhibitors 和 mimics 的瞬时转染 | 第27页 |
·G418 筛选稳转细胞 | 第27-28页 |
·MTT 法检测细胞增殖活力 | 第28页 |
·流式细胞术检测细胞周期 | 第28-29页 |
·Hoechst 33258 染色 | 第29页 |
·流式细胞术检测细胞凋亡 | 第29-30页 |
·克隆形成试验 | 第30页 |
·Transwell 实验检测细胞侵袭能力 | 第30-31页 |
·荧光素酶实验检测 miR-196a 与靶基因 p27~(kip1)mRNA3’UTR 的结合 | 第31-32页 |
·裸鼠成瘤实验 | 第32页 |
·数据处理 | 第32-33页 |
3. 实验结果 | 第33-50页 |
·miR-196a 在胃癌组织中的表达显著上调 | 第33-36页 |
·外源性上调或封闭胃癌细胞系中 miR-196a 的表达 | 第36-37页 |
·miR-196a 对细胞增殖功能及周期的影响 | 第37-38页 |
·miR-196a 对胃癌细胞凋亡能力的影响 | 第38-39页 |
·miR-196a 促进胃癌细胞的肿瘤形成能力 | 第39-42页 |
·p27~(kip1)是 miR-196a 的靶基因 | 第42-44页 |
·SGC-7901 细胞中过表达 p27~(kip1) | 第44-45页 |
·p27~(kip1)对胃癌细胞增殖及周期的影响 | 第45-46页 |
·miR-196a 发挥癌基因的功能依赖于 p27~(kip1)的下调 | 第46-48页 |
·p27~(kip1)与 miR-196a 的表达水平呈负性相关 | 第48-50页 |
4. 讨论 | 第50-54页 |
参考文献 | 第54-59页 |
致谢 | 第59-60页 |
综述 | 第60-72页 |
参考文献 | 第68-72页 |
附录(二)缩略词表 | 第72-73页 |
附录(三)硕士期间发表文章 | 第73-74页 |
附件 | 第74-79页 |