| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-28页 |
| 1 高等植物启动子 | 第10-14页 |
| ·高等植物启动子的一般特性 | 第10-12页 |
| ·转录起始位点 | 第10-11页 |
| ·TATA-box | 第11页 |
| ·CAAT-box | 第11页 |
| ·GC-box | 第11页 |
| ·特有的上游启动子元件 | 第11-12页 |
| ·植物启动子类型 | 第12-14页 |
| ·组成型启动子 | 第12-13页 |
| ·组织特异型启动子 | 第13页 |
| ·诱导型启动子 | 第13-14页 |
| 2 高等植物转录因子 | 第14-15页 |
| ·DNA 结合域 | 第14页 |
| ·转录调控域 | 第14页 |
| ·寡聚化位点 | 第14-15页 |
| ·核定位信号 | 第15页 |
| 3 顺式作用元件及转录因子的研究方法 | 第15-24页 |
| ·生物信息学分析与预测 | 第16-17页 |
| ·突变分析法 | 第17-20页 |
| ·5′端缺失法 | 第17-18页 |
| ·3′端缺失法 | 第18-19页 |
| ·内部缺失法 | 第19页 |
| ·点突变法 | 第19-20页 |
| ·凝胶阻滞分析法 | 第20-22页 |
| ·DNase | 足迹分析法 | 第22-23页 |
| ·酵母单杂交体系 | 第23-24页 |
| 4 植物非生物胁迫响应顺式作用元件及转录因子 | 第24-26页 |
| ·NAC 元件及 NAC 类转录因子 | 第24-25页 |
| ·MYB 元件及 MYB 类转录因子 | 第25页 |
| ·MYC 元件及 MYC 类转录因子 | 第25页 |
| ·WRKY 元件及WRKY 类转录因子 | 第25-26页 |
| ·GT-1 元件及GT-1 类转录因子 | 第26页 |
| 5 BADH 基因及其启动子 | 第26-27页 |
| ·BADH 基因 | 第26页 |
| ·BADH 启动子 | 第26-27页 |
| 6 本研究的主要内容及意义 | 第27页 |
| 7 技术路线 | 第27-28页 |
| 第二章 BADH 启动子盐诱导功能元件鉴定 | 第28-43页 |
| 1 实验材料 | 第28-29页 |
| ·植物材料 | 第28页 |
| ·主要试剂 | 第28页 |
| ·主要仪器设备 | 第28-29页 |
| 2 实验方法 | 第29-36页 |
| ·辽宁碱蓬叶片核蛋白的制备 | 第29-32页 |
| ·核蛋白提取 | 第29-30页 |
| ·核蛋白完整性检测 | 第30-31页 |
| ·核蛋白浓度的测定 | 第31-32页 |
| ·探针的制备 | 第32页 |
| ·探针的设计 | 第32页 |
| ·探针的合成与标记 | 第32页 |
| ·凝胶阻滞分析实验 | 第32-36页 |
| ·结合反应 | 第33页 |
| ·上样混合液的制备 | 第33页 |
| ·非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第33-34页 |
| ·转膜 | 第34-35页 |
| ·交联固定DNA | 第35页 |
| ·化学发光反应 | 第35-36页 |
| ·信号检测 | 第36页 |
| 3 结果与分析 | 第36-41页 |
| ·核蛋白完整性检测 | 第36-37页 |
| ·核蛋白浓度检测 | 第37页 |
| ·探针的设计 | 第37-38页 |
| ·探针纯度检测 | 第38-39页 |
| ·凝胶阻滞分析 | 第39-41页 |
| 4 讨论 | 第41-43页 |
| ·辽宁碱蓬叶片核蛋白的制备 | 第41页 |
| ·凝胶阻滞分析 | 第41页 |
| ·BADH 启动子中的盐诱导功能元件 | 第41-43页 |
| 第三章 与B A DH 启动子盐诱导功能元件相互作用的转录因子的分离 | 第43-62页 |
| 1 实验材料 | 第43-44页 |
| ·植物材料 | 第43页 |
| ·菌株和质粒载体 | 第43页 |
| ·菌株 | 第43页 |
| ·质粒载体 | 第43页 |
| ·所用试剂盒 | 第43-44页 |
| ·主要试剂 | 第44页 |
| ·主要仪器设备 | 第44页 |
| 2 实验方法 | 第44-53页 |
| ·诱饵菌株的构建 | 第44-47页 |
| ·诱饵片段的合成 | 第44页 |
| ·诱饵片段退火 | 第44-45页 |
| ·诱饵载体构建 | 第45页 |
| ·诱饵载体线性 | 第45-46页 |
| ·诱饵酵母菌株的构建 | 第46-47页 |
| ·辽宁碱蓬叶片cDNA 的合成 | 第47-49页 |
| ·碱蓬总RNA 提取 | 第47-48页 |
| ·cDNA 合成 | 第48-49页 |
| ·酵母单杂交文库构建及筛选 | 第49-53页 |
| ·诱饵菌株感受态细胞制作 | 第49页 |
| ·cDNA 转化诱饵菌株 | 第49-51页 |
| ·阳性克隆的鉴定及插入片段的测序分析 | 第51-53页 |
| ·转录因子的生物信息学分析 | 第53页 |
| 3 结果与分析 | 第53-60页 |
| ·诱饵菌株的构建 | 第53-55页 |
| ·诱饵载体的构建 | 第53-54页 |
| ·诱饵载体线性化 | 第54-55页 |
| ·诱饵酵母菌株的构建 | 第55页 |
| ·辽宁碱蓬叶片cDNA 合成 | 第55-56页 |
| ·总RNA 的提取 | 第55-56页 |
| ·cDNA 合成 | 第56页 |
| ·酵母单杂交文库构建及筛选 | 第56-60页 |
| ·库容量的检测 | 第56-57页 |
| ·转化诱饵菌株的检测 | 第57-58页 |
| ·阳性克隆质粒插入片段的克隆及测序分析 | 第58-60页 |
| ·转录因子的生物信息学分析 | 第60页 |
| 4 讨论 | 第60-62页 |
| ·诱饵片段的设计 | 第60-61页 |
| ·酵母单杂交分析 | 第61页 |
| ·与N AC 元件相互作用的转录因子 | 第61-62页 |
| 结论 | 第62-63页 |
| 参考文献 | 第63-71页 |
| 附录A： BADH 启动子（-300～+62 bp）序列 | 第71-72页 |
| 附录B： 启动子生物信息学分析结果 | 第72-75页 |
| 附录C： pAbAi 载体图 | 第75-76页 |
| 附录D： pGADT7-Rec 载体图 | 第76-77页 |
| 附录E： pGEM-T 载体图 | 第77-78页 |
| 附录F： DL2000plus Marker | 第78-79页 |
| 附录G： 蛋白 Marker | 第79-80页 |
| 攻读硕士学位期间发表学术论文情况 | 第80-81页 |
| 致谢 | 第81页 |