| 摘要 | 第7-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 缩略词表 | 第12-13页 |
| 1 前言 | 第13-31页 |
| 1.1 课题的提出 | 第13-14页 |
| 1.2 文献综述 | 第14-29页 |
| 1.2.1 雄蕊发育相关的重要生物过程研究进展 | 第14-21页 |
| 1.2.1.1 孢粉素合成 | 第14-17页 |
| 1.2.1.2 花药中淀粉合成和糖代谢及运输的重要性 | 第17页 |
| 1.2.1.3 雄蕊中能量代谢对育性发育的影响 | 第17-19页 |
| 1.2.1.4 活性氧(ROS)代谢在雄蕊育性发育中的重要作用 | 第19-21页 |
| 1.2.2 柑橘无核研究进展 | 第21-24页 |
| 1.2.2.1 花粉育性降低 | 第22-23页 |
| 1.2.2.2 胚囊败育 | 第23-24页 |
| 1.2.3 植物雄蕊发育相关蛋白组学的研究 | 第24-29页 |
| 1.2.3.1 雄蕊发育早期至成熟花粉的蛋白组学研究 | 第24-25页 |
| 1.2.3.2 花粉母细胞减数分裂蛋白组学研究 | 第25-27页 |
| 1.2.3.4 植物细胞质雄性不育(CMS)相关比较蛋白组研究 | 第27-29页 |
| 1.3 本研究的目的和内容 | 第29-31页 |
| 2 实验材料 | 第31页 |
| 2.1 ‘黔阳无核’椪柑和‘鄂柑一号’椪柑花药及胚囊发育细胞学研究实验材料 | 第31页 |
| 2.2 比较蛋白质组学研究QS与EG早期花蕾发育实验材料 | 第31页 |
| 3 方法 | 第31-38页 |
| 3.1 细胞学研究实验方法 | 第31-33页 |
| 3.1.1 花粉母细胞减数分裂观察 | 第31-32页 |
| 3.1.2 切片 | 第32页 |
| 3.1.3 组织化学检测 | 第32-33页 |
| 3.1.3.1 淀粉、多糖检测 | 第32页 |
| 3.1.3.2 胼胝质检测 | 第32-33页 |
| 3.1.4 小孢子发育荧光检测 | 第33页 |
| 3.2 蛋白组学实验方法 | 第33-38页 |
| 3.2.1 总蛋白提取 | 第33页 |
| 3.2.2 蛋白质定量 | 第33-34页 |
| 3.2.3 蛋白质双向电泳 | 第34-36页 |
| 3.2.3.1 水化上样 | 第34-35页 |
| 3.2.3.2 第一向等点聚焦 | 第35页 |
| 3.2.3.3 第二向SDS-PAGE电泳 | 第35-36页 |
| 3.2.3.4 凝胶染色 | 第36页 |
| 3.2.3.5 凝胶扫描与图像分析 | 第36页 |
| 3.2.4 蛋白质胶内酶解和质谱鉴定 | 第36-37页 |
| 3.2.5 RNA提取和q RT-PCR（quantitative Real-time PCR）分析 | 第37-38页 |
| 4 结果与分析 | 第38-59页 |
| 4.1 EG和QS花药及胚囊发育细胞学结果与分析 | 第38-44页 |
| 4.1.1 EG和QS小孢子发育过程特点及比较 | 第38-39页 |
| 4.1.2 胚囊发育过程比较 | 第39页 |
| 4.1.3 花粉母细胞染色体减数分裂行为观察 | 第39-40页 |
| 4.1.4 四分体观察及统计 | 第40-41页 |
| 4.1.5 小孢子发育过程中淀粉和多糖的分布 | 第41-43页 |
| 4.1.6 小孢子发育过程中组织化学检测 | 第43-44页 |
| 4.1.6.1 胼胝质分布 | 第43页 |
| 4.1.6.2 花粉内壁和外壁观察 | 第43-44页 |
| 4.2 比较蛋白质组学研究EG与QS早期花蕾发育结果与分析 | 第44-59页 |
| 4.2.1 双向电泳图谱和差异蛋白鉴定 | 第44-46页 |
| 4.2.2 差异表达蛋白质的分析 | 第46-54页 |
| 4.2.3 VitualPlant下BioMaps工具软件分析获得差异表达蛋白 | 第54-57页 |
| 4.2.4 部分蛋白质转录水平测定与分析 | 第57-59页 |
| 5 讨论 | 第59-66页 |
| 5.1 EG和QS花药及胚囊发育细胞学讨论 | 第59-62页 |
| 5.1.1 ‘黔阳无核’椪柑败育原因 | 第59-61页 |
| 5.1.2 ‘黔阳无核’椪柑小孢子淀粉积累过程受影响导致空腔花粉粒形成 | 第61页 |
| 5.1.3 ‘黔阳无核’椪柑花粉外壁发育异常原因探究 | 第61-62页 |
| 5.2 比较蛋白质组学研究EG与QS早期花蕾发育讨论 | 第62-66页 |
| 5.2.1 导致‘黔阳无核’椪柑花粉外壁缺陷发育的关键蛋白的探讨 | 第62-63页 |
| 5.2.2 差异表达蛋白涉及的主要生物过程及在‘黔阳无核’椪柑不育中的作用 | 第63-65页 |
| 5.2.2.1 能量代谢 | 第63-64页 |
| 5.2.2.2 氧化逆境及ROS (reactive oxygen species) | 第64-65页 |
| 5.2.3 探讨小孢子早期发育过程中可能关键蛋白 | 第65-66页 |
| 6 总结与展望 | 第66-68页 |
| 参考文献 | 第68-82页 |
| 图版和说明 | 第82-94页 |
| 附录A 实验操作方法 | 第94-97页 |
| 致谢 | 第97页 |
