| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-15页 |
| 插图或附表清单 | 第15-18页 |
| 注释说明清单 | 第18-19页 |
| 引言 | 第19-20页 |
| 1 红花黄素的药理研究近况 | 第20-27页 |
| ·红花黄索的理化特性 | 第20页 |
| ·红花黄素的药理作用 | 第20-26页 |
| ·红花黄素对心血管系统的作用 | 第20-22页 |
| ·对血液系统的作用 | 第22-23页 |
| ·对神经系统的作用 | 第23-24页 |
| ·对免疫系统的作用 | 第24-25页 |
| ·抗氧化作用 | 第25页 |
| ·抗炎作用 | 第25页 |
| ·抗肿瘤作用 | 第25-26页 |
| ·其他药理作用 | 第26页 |
| ·小结 | 第26-27页 |
| 2 建立小鼠椎间盘软骨终板细胞炎症退变的细胞模型 | 第27-42页 |
| ·实验材料 | 第27-29页 |
| ·细胞来源 | 第27页 |
| ·主要生化试剂 | 第27-28页 |
| ·主要试剂盒和分子量标准 | 第28页 |
| ·主要仪器设备 | 第28页 |
| ·主要溶液及缓冲液的配制 | 第28-29页 |
| ·实验方法 | 第29-33页 |
| ·椎间盘软骨终板细胞的分离及原代培养 | 第29-30页 |
| ·椎间盘软骨终板细胞的传代培养 | 第30页 |
| ·诱导椎间盘软骨终板细胞退变方法及实验分组方法 | 第30页 |
| ·细胞甲苯胺蓝染色 | 第30页 |
| ·cck-8法检测 | 第30-31页 |
| ·透射电镜观察细胞退变情况 | 第31页 |
| ·细胞免疫荧光检测 | 第31页 |
| ·Western blot检测蛋白表达 | 第31-33页 |
| ·统计分析 | 第33页 |
| ·实验结果 | 第33-39页 |
| ·倒置显微镜下观察结果 | 第33页 |
| ·IL-1β对软骨终板细胞形态学影响 | 第33-34页 |
| ·IL-1β对软骨终板细胞增殖作用的影响 | 第34-35页 |
| ·IL-1β对软骨终板细胞亚细胞结构的影响 | 第35-36页 |
| ·细胞免疫荧光检测IL-1β对软骨终板细胞蛋白表达的影响结果 | 第36-38页 |
| ·IL-1β对软骨终板细胞蛋白表达的影响 | 第38-39页 |
| ·讨论 | 第39-40页 |
| ·实验小结 | 第40-42页 |
| 3 羟基红花黄素A对IL-1β诱导小鼠软骨终板细胞增殖的影响 | 第42-50页 |
| ·实验材料 | 第42-44页 |
| ·细胞来源 | 第42页 |
| ·药品来源 | 第42页 |
| ·主要生化试剂 | 第42-43页 |
| ·主要试剂盒和分子量标准 | 第43页 |
| ·主要仪器设备 | 第43页 |
| ·主要溶液及缓冲液的配制 | 第43-44页 |
| ·实验方法 | 第44-46页 |
| ·椎间盘软骨终板细胞的分离及原代培养 | 第44页 |
| ·椎间盘软骨终板细胞的传代培养 | 第44页 |
| ·实验分组 | 第44页 |
| ·细胞计数 | 第44页 |
| ·cck-8法检测不同时间点HSYA对IL-1β诱导的软骨终板细胞增殖的影响 | 第44-45页 |
| ·western Blot检测增殖细胞核抗原(Proliferating Cell NuclearAntigen,PCNA)蛋白表达 | 第45页 |
| ·统计分析 | 第45-46页 |
| ·实验结果 | 第46-48页 |
| ·羟基红花黄素A对IL-1β抑制软骨细胞增殖作用的影响 | 第46-47页 |
| ·加药培养6天时,各组PCNA表达量 | 第47-48页 |
| ·加药培养10天时,各组PCNA表达量 | 第48页 |
| ·讨论 | 第48-49页 |
| ·实验小结 | 第49-50页 |
| 4 羟基红花黄素A对IL-1β诱导小鼠软骨终板细胞凋亡的影响 | 第50-63页 |
| ·实验材料 | 第50-52页 |
| ·细胞来源 | 第50页 |
| ·药品来源 | 第50页 |
| ·主要生化试剂 | 第50-51页 |
| ·主要试剂盒和引物来源 | 第51页 |
| ·主要仪器设备 | 第51页 |
| ·主要溶液及缓冲液的配制 | 第51-52页 |
| ·实验方法 | 第52-57页 |
| ·椎间盘软骨终板细胞的分离及原代培养 | 第52页 |
| ·椎间盘软骨终板细胞的传代培养 | 第52页 |
| ·实验分组方法 | 第52页 |
| ·流式细胞分析样本制备及检测 | 第52-53页 |
| ·Real-time RT-PCR检测 | 第53-56页 |
| ·细胞免疫荧光分析Bax、Bcl-2蛋白表达 | 第56页 |
| ·Western blot检测给药24h后Bax,Bcl-2蛋白表达 | 第56-57页 |
| ·统计学方法 | 第57页 |
| ·结果 | 第57-60页 |
| ·流式细胞仪分析细胞周期结果 | 第57页 |
| ·流式细胞仪分析细胞凋亡 | 第57-58页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳结果 | 第58页 |
| ·Real-time RT-PCR检测凋亡相关基因表达 | 第58-59页 |
| ·凋亡相关蛋白荧光染色结果 | 第59-60页 |
| ·Western blot检测给药24h后各组Bax,Bcl-2蛋白表达情况 | 第60页 |
| ·讨论 | 第60-62页 |
| ·实验小结 | 第62-63页 |
| 5 羟基红花黄素A对IL-1β诱导小鼠软骨终板细胞退变的影响 | 第63-92页 |
| ·实验材料 | 第63-64页 |
| ·细胞来源 | 第63页 |
| ·药品来源 | 第63页 |
| ·主要生化试剂 | 第63-64页 |
| ·主要试剂盒和引物来源 | 第64页 |
| ·主要仪器设备 | 第64页 |
| ·主要溶液及缓冲液的配制 | 第64页 |
| ·实验方法 | 第64-67页 |
| ·椎间盘软骨终板细胞的分离及原代培养 | 第64页 |
| ·椎间盘软骨终板细胞的传代培养 | 第64页 |
| ·实验分组 | 第64-65页 |
| ·细胞甲苯胺蓝染色 | 第65页 |
| ·透射电镜观察细胞退变情况 | 第65页 |
| ·细胞免疫荧光检测细胞退变情况 | 第65页 |
| ·Real-time RT-PCR检测 | 第65-66页 |
| ·Westernblot蛋白检测 | 第66-67页 |
| ·统计学方法 | 第67页 |
| ·实验结果 | 第67-89页 |
| ·HSYA对IL-1β诱导细胞细胞形态学影响 | 第67-68页 |
| ·HSYA对IL-1β诱导细胞细胞生物化学染色影响 | 第68-69页 |
| ·HSYA对IL-1β诱导细胞亚细胞结构的影响 | 第69-71页 |
| ·HSYA对诱导软骨终板细胞炎性细胞因子IL-1β胞质内表达的影响 | 第71页 |
| ·HSYA对诱导软骨终板细胞col Ⅱ、colⅩ、aggrecan、MMP-1、MMP-13、TIMP-1胞质内表达的影响 | 第71-77页 |
| ·HSYA对诱导软骨终板细胞IL-1β、TNF-α、IL-6、iNOs mRNA表达的影响 | 第77-82页 |
| ·HSYA对诱导软骨终板细胞col Ⅱ,colⅩ,aggrecan,MMP-1,MMP-13,TIMP-1mRNA表达的影响 | 第82-88页 |
| ·HSYA对诱导软骨终板细胞MMP-1和TIMP-1蛋白表达的影响 | 第88-89页 |
| ·讨论 | 第89-91页 |
| ·实验小结 | 第91-92页 |
| 结论 | 第92-93页 |
| 参考文献 | 第93-100页 |
| 附录A 科技查新报告 | 第100-104页 |
| 后记或致谢 | 第104-105页 |
| 作者简介及读研期间主要科研成果 | 第105-106页 |
