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禽波氏杆菌的定植规律、基因分型以及与REV共感染的协同致病作用研究

中文摘要第1-16页
ABSTRACT第16-20页
1 引言第20-39页
   ·规模化种鸡场多病原共感染现状分析第20-24页
     ·种鸡场病原分析第20-21页
     ·病原共感染现状第21-22页
     ·多种病原共感染的危害第22-23页
     ·多病原共感染的预防与控制第23-24页
   ·禽波氏杆菌病研究进展第24-30页
     ·病原特征第24页
     ·致病因子第24-26页
     ·感染过程和发病机理第26页
     ·感染宿主第26-27页
     ·流行病学第27-28页
     ·临诊症状和病理变化第28页
     ·致病性第28-30页
     ·诊断及防治第30页
   ·RAPD方法在病原基因分型方面的应用第30-36页
     ·细菌基因分型技术的发展第30-33页
     ·RAPD 技术的原理第33页
     ·RAPD 技术的特点第33-34页
     ·RAPD 在病原菌基因分型中的应用第34-36页
   ·本研究的目的意义第36-39页
2 材料与方法第39-59页
   ·材料第39-45页
     ·病料第39页
     ·菌株、毒株、单抗、疫苗第39-40页
     ·引物第40-42页
     ·试验鸡胚、动物第42-43页
     ·试剂及培养基第43页
     ·主要培养基和试剂的配制第43-45页
     ·仪器第45页
   ·方法第45-59页
     ·规模化种鸡孵化场胚胎性疫病病原分析第45-49页
       ·病毒性病原的分子生物学检测第45-46页
       ·支原体的分离培养第46-47页
       ·细菌性病原的分离鉴定第47-48页
       ·分离菌的耐药性分析第48-49页
     ·B. avium鸡胚分离株的生物学特性及致病性研究第49-51页
       ·B. avium分离株的复苏增殖第49页
       ·B. avium 分离株的培养特性第49页
       ·B. avium 分离株的生化鉴定第49页
       ·B. avium 分离株的耐药性分析第49页
       ·B. avium 鸡胚分离株对 11 日龄鸡胚 ELD50的测定第49-50页
       ·B. avium 鸡胚分离株腹腔感染 1 日龄雏鸡的 LD50比较第50页
       ·B. avium 鸡胚分离株鼻腔感染 1 日龄雏鸡的比较第50页
       ·B. avium 强毒株不同方式感染 1 日龄雏鸡的比较第50页
       ·数据统计分析第50-51页
     ·B. avium鸡胚分离株鼻腔攻毒雏鸡的定植规律研究第51-54页
       ·兔抗 B. avium 外膜蛋白 IgG 的制备第51页
       ·待检组织石蜡切片的制备第51-52页
       ·间接免疫酶组化检测B. avium抗原定位方法的建立第52-53页
       ·间接免疫荧光组化检测 B. avium 抗原定位方法的建立第53-54页
       ·B. avium 鼻腔攻毒 1 日龄雏鸡定植规律检测第54页
     ·禽波氏杆菌RAPD基因分型研究第54-56页
       ·禽波氏杆菌的复苏第54页
       ·细菌基因组 DNA 的准备第54-55页
       ·RAPD 反应第55-56页
       ·RAPD 指纹图谱统计分析第56页
       ·亲缘关系树状图的绘制第56页
     ·禽波氏杆菌与REV共感染的致病作用研究第56-59页
       ·B. avium Ba15株的复苏增殖及计数第56-57页
       ·REV 的增殖及 TCID50的测定第57页
       ·REV 与 B. avium 共感染对鸡胚的致病作用第57页
       ·胚胎期及 1 日龄 REV 感染对 B. avium 腹腔感染不同日龄雏鸡 LD50的影响第57-58页
       ·胚胎期 REV 感染对 B. avium 鼻腔感染 1 日龄雏鸡致病性的影响第58页
       ·雏鸡 1 日龄感染 REV 对 B. avium 在不同日龄鼻腔感染的影响第58页
       ·数据统计分析第58-59页
3 结果与分析第59-115页
   ·规模化种鸡孵化场胚胎性疫病病原分析第59-66页
     ·病毒性病原的检测结果第59页
     ·支原体的分离结果第59页
     ·细菌性病原的分离鉴定结果第59-65页
       ·细菌的分离培养结果第59-61页
       ·分离菌的染色镜检结果第61页
       ·分离菌的生化特性第61-63页
       ·分离菌的血清学鉴定第63页
       ·分离菌的 PCR 鉴定第63-64页
       ·分离菌的耐药性分析第64-65页
     ·种鸡孵化场病原感染状况第65-66页
   ·禽波氏杆菌的生物学特性及致病性研究第66-75页
     ·B. avium 分离株的培养特性第66-67页
     ·B. avium 分离株的生化特性第67页
     ·B. avium 分离株的耐药性分析第67-70页
     ·B. avium鸡胚分离株对11日龄鸡胚ELD50的测定第70页
     ·B. avium 鸡胚分离株腹腔感染 1 日龄雏鸡的 LD50比较第70-71页
     ·B. avium 鸡胚分离株鼻腔感染 1 日龄雏鸡的比较第71-73页
     ·B. avium Ba15 株不同方式感染 1 日龄雏鸡的致病性比较第73-75页
   ·禽波氏杆菌鼻腔感染雏鸡的定植规律第75-89页
     ·兔抗B. avium外膜蛋白抗体的制备第75页
     ·待检组织石蜡切片的制备第75-76页
     ·间接免疫酶组化检测方法的建立第76页
       ·间接免疫酶组化法最佳工作条件的优化第76页
       ·特异性试验和重复性试验第76页
     ·间接免疫荧光检测方法的建立第76-77页
       ·间接免疫荧光组化最佳工作条件的优化第76页
       ·特异性试验和重复性试验第76-77页
     ·B. avium 鼻腔攻毒雏鸡的定植规律第77-89页
       ·鼻腔攻毒后雏鸡病变死亡结果统计第77-78页
       ·B. avium 抗体的跟踪检测第78-79页
       ·匀浆涂布计数法检测细菌在各内脏器官中的分布第79-81页
       ·间接免疫酶组化检测 B. avium 定植规律结果第81-85页
       ·间接免疫荧光组化检测 B. avium 定植规律结果第85页
       ·接种环划线法分离细菌结果第85页
       ·脏器抹片法检测 B. avium 结果第85-89页
       ·不同方法对脏器中 B. avium 阳性率的检出结果比较第89页
   ·禽波氏杆菌 RAPD 基因分型结果第89-97页
     ·细菌基因组 DNA 的提取结果第89-90页
     ·RAPD 反应条件的优化结果第90-92页
     ·RAPD 反应随机引物的筛选结果第92页
     ·RAPD 稳定性试验第92-93页
     ·RAPD 反应随机引物的扩增结果第93-94页
     ·禽波氏杆菌菌株的共有带率及聚类分析第94-97页
   ·REV 与 B. avium 共感染的致病作用第97-115页
     ·REV 与 B. avium 共感染对鸡胚的致病作用第97-102页
     ·胚胎期及 1 日龄 REV 感染对 B. avium 腹腔感染不同日龄雏鸡 LD50的影响第102页
     ·胚胎期 REV 感染对 B. avium 鼻腔感染 1 日龄雏鸡致病性的影响第102-111页
     ·雏鸡 1 日龄感染 REV 对 B. avium 在不同日龄感染的影响第111-115页
4 讨论第115-127页
   ·规模化种鸡孵化场胚胎性疫病病原分析第115-116页
     ·病料来源第115页
     ·病料采集标准第115页
     ·病原的分离鉴定第115-116页
     ·孵化场病原分析第116页
     ·细菌病原的耐药性分析第116页
   ·B.avium 分离株的生物学特性和致病性第116-118页
     ·B.avium 分离株的生物学特性第116-117页
     ·B. avium 分离株的耐药性分析第117页
     ·B. avium鸡胚分离株对鸡胚和雏鸡半数致死量的测定第117页
     ·B. avium 鸡胚分离株鼻腔感染 1 日龄雏鸡的比较第117-118页
     ·B.avium Ba15 株经不同方式感染雏鸡的致病性比较第118页
   ·B.avium 鸡胚分离株鼻腔攻毒雏鸡的定植规律第118-121页
     ·菌株的选择第118-119页
     ·攻毒方法和日龄的选择第119页
     ·检测方法的建立第119页
     ·定植规律的检测第119-121页
     ·不同检测方法的比较第121页
   ·禽波氏杆菌 RAPD 基因分型第121-123页
     ·传统分型方法的局限性第121-122页
     ·细菌基因分型方法第122页
     ·RAPD 基因分型的优越性第122页
     ·禽波氏杆菌 RAPD 基因分型的标准化第122-123页
     ·RAPD 多态性分析第123页
   ·REV 与 B.avium 共感染的协同致病作用第123-127页
     ·REV 与 B. avium 共感染鸡胚的协同致病作用第123-124页
     ·胚胎期及 1 日龄 REV 感染对 B. avium 腹腔感染不同日龄雏鸡 LD50的影响第124页
     ·胚胎期 REV 感染对 B. avium 鼻腔感染 1 日龄雏鸡致病性的影响第124-125页
     ·雏鸡 1 日龄感染 REV 对 B. avium 在不同日龄感染的影响第125-127页
5 结论第127-129页
   ·规模化种鸡孵化场胚胎性疫病病原分析第127页
   ·B.avium 分离株的生物学特性及致病性第127页
   ·B.avium 鸡胚分离株鼻腔攻毒雏鸡的定植规律第127页
   ·B.avium 分离株的 RAPD 基因分型第127-128页
   ·胚胎期及 1 日龄 REV 感染对 B. avium 腹腔感染不同日龄雏鸡 LD50的影响第128页
   ·胚胎期 REV 感染对 B. avium 鼻腔感染 1 日龄雏鸡致病性的影响第128页
   ·雏鸡 1 日龄感染 REV 对 B. avium 在不同日龄鼻腔感染的影响第128-129页
参考文献第129-142页
致谢第142-143页
攻读学位期间论文发表、录用情况第143页

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