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干旱对玉米雌雄穗基因表达的影响和谷氨酸脱羧酶基因的克隆与分析

中文摘要第1-9页
ABSTRACT第9-13页
符号说明第13-15页
第一部分 干旱对玉米雌雄穗基因表达的影响第15-68页
 第一章 前言第15-32页
   ·耐旱相关基因的研究进展第15-20页
   ·胁迫信号转导及诱导基因表达的调控第20-22页
   ·干旱对雌雄配子体发育的影响及可能的机制第22-25页
   ·芯片技术简介第25-29页
     ·DNA阵列的制备第25-26页
     ·样品制备、标记及分子杂交第26-27页
     ·数据的处理及分析第27-29页
   ·利用芯片检测技术研究玉米在胁迫条件下的基因表达第29-31页
   ·本研究的意义和目的第31-32页
 第二章 利用基因组芯片检测干旱胁迫对玉米雌雄穗基因表达的影响第32-68页
   ·实验材料和方法第32-44页
     ·玉米材料第32页
     ·材料培养与处理第32页
     ·实验方法第32-44页
       ·玉米总RNA的提取第32-33页
       ·荧光标记cDNA的合成第33-36页
       ·芯片杂交第36-37页
       ·芯片的扫描和数据分析第37-39页
       ·半定量RT-PCR第39页
       ·cDNA宏阵列(macroarray)制备第39-41页
       ·同位素标记cDNA的合成第41-42页
       ·宏阵列的杂交、清洗和扫描第42页
       ·宏阵列图像的采集与数据分析第42-44页
   ·结果与分析第44-61页
     ·缺水胁迫下玉米叶片渗透势的变化第44页
     ·干旱胁迫对植株性状的影响第44-45页
     ·芯片杂交结果第45-57页
       ·雌、雄穗总RNA的提取及反转录第45-46页
       ·芯片杂交结果第46-51页
       ·RT-PCR对芯片结果的验证第51-52页
       ·参与糖代谢的转录本变化第52-53页
       ·参与细胞壁代谢的转录本变化第53-55页
       ·参与基因表达调节的转录本变化第55-57页
     ·宏阵列(macroarray)的制备第57页
     ·缺水胁迫下的EST表达谱第57-61页
   ·讨论第61-68页
     ·缺水胁迫对基因表达谱的影响第61-62页
     ·缺水胁迫对糖代谢的影响第62-63页
     ·缺水胁迫对细胞壁代谢的影响第63-64页
     ·缺水胁迫对转录因子的影响第64-65页
     ·cDNA macroarray的运用第65-66页
     ·芯片实验成功的关键之一:样品制备的应注意的三个原则第66-68页
第二部分 玉米谷氨酸脱羧酶基因ZmGAD的克隆与酶活性分析第68-109页
   ·前言第68-75页
     ·高等植物中GABA的代谢第69-73页
     ·GABA在植物中的生理作用第73页
     ·本研究的目的和意义第73-75页
   ·材料方法第75-85页
     ·材料第75页
     ·玉米ZmGAD基因的克隆第75-77页
     ·玉米谷氨酸脱羧酶ZmGAD1在大肠杆菌中的表达与酶活性分析第77-80页
     ·Southern blotting分析第80-82页
     ·玉米ZmGAD1基因的表达模式分析和酶活性分析第82-83页
     ·玉米ZmGAD1基因启动子序列的克隆及序列分析第83页
     ·玉米谷氨酸脱酶ZmGAD1植物表达载体的构建第83-85页
   ·结果与分析第85-105页
     ·玉米GAD cDNA的克隆第85-86页
     ·玉米侯选谷氨酸脱羧酶基因ZmGAD1在大肠杆菌中的表达及酶活性测定第86-90页
     ·玉米ZmGAD1基因的Southern blotting分析和ZmGAD2的电子克隆第90-92页
     ·玉米谷氨酸脱羧酶基因序列的生物信息学分析第92-97页
     ·玉米ZmGAD1基因的表达模式分析和酶活性分析第97-101页
     ·玉米ZmGAD1基因启动子序列的克隆和生物信息学分析第101-103页
     ·玉米ZmGAD1基因植物表达载体的构建第103-105页
   ·讨论第105-109页
第三部分 总结和展望第109-112页
附录第112-120页
参考文献第120-135页
ACKNOWLEDGEMENTS第135-136页
攻读博士学位期间发表的学术论文目录第136-137页
学位论文评阅及答辩情况表第137-138页
英文论文第138-160页

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