中文摘要 | 第1-9页 |
ABSTRACT | 第9-13页 |
符号说明 | 第13-15页 |
第一部分 干旱对玉米雌雄穗基因表达的影响 | 第15-68页 |
第一章 前言 | 第15-32页 |
·耐旱相关基因的研究进展 | 第15-20页 |
·胁迫信号转导及诱导基因表达的调控 | 第20-22页 |
·干旱对雌雄配子体发育的影响及可能的机制 | 第22-25页 |
·芯片技术简介 | 第25-29页 |
·DNA阵列的制备 | 第25-26页 |
·样品制备、标记及分子杂交 | 第26-27页 |
·数据的处理及分析 | 第27-29页 |
·利用芯片检测技术研究玉米在胁迫条件下的基因表达 | 第29-31页 |
·本研究的意义和目的 | 第31-32页 |
第二章 利用基因组芯片检测干旱胁迫对玉米雌雄穗基因表达的影响 | 第32-68页 |
·实验材料和方法 | 第32-44页 |
·玉米材料 | 第32页 |
·材料培养与处理 | 第32页 |
·实验方法 | 第32-44页 |
·玉米总RNA的提取 | 第32-33页 |
·荧光标记cDNA的合成 | 第33-36页 |
·芯片杂交 | 第36-37页 |
·芯片的扫描和数据分析 | 第37-39页 |
·半定量RT-PCR | 第39页 |
·cDNA宏阵列(macroarray)制备 | 第39-41页 |
·同位素标记cDNA的合成 | 第41-42页 |
·宏阵列的杂交、清洗和扫描 | 第42页 |
·宏阵列图像的采集与数据分析 | 第42-44页 |
·结果与分析 | 第44-61页 |
·缺水胁迫下玉米叶片渗透势的变化 | 第44页 |
·干旱胁迫对植株性状的影响 | 第44-45页 |
·芯片杂交结果 | 第45-57页 |
·雌、雄穗总RNA的提取及反转录 | 第45-46页 |
·芯片杂交结果 | 第46-51页 |
·RT-PCR对芯片结果的验证 | 第51-52页 |
·参与糖代谢的转录本变化 | 第52-53页 |
·参与细胞壁代谢的转录本变化 | 第53-55页 |
·参与基因表达调节的转录本变化 | 第55-57页 |
·宏阵列(macroarray)的制备 | 第57页 |
·缺水胁迫下的EST表达谱 | 第57-61页 |
·讨论 | 第61-68页 |
·缺水胁迫对基因表达谱的影响 | 第61-62页 |
·缺水胁迫对糖代谢的影响 | 第62-63页 |
·缺水胁迫对细胞壁代谢的影响 | 第63-64页 |
·缺水胁迫对转录因子的影响 | 第64-65页 |
·cDNA macroarray的运用 | 第65-66页 |
·芯片实验成功的关键之一:样品制备的应注意的三个原则 | 第66-68页 |
第二部分 玉米谷氨酸脱羧酶基因ZmGAD的克隆与酶活性分析 | 第68-109页 |
·前言 | 第68-75页 |
·高等植物中GABA的代谢 | 第69-73页 |
·GABA在植物中的生理作用 | 第73页 |
·本研究的目的和意义 | 第73-75页 |
·材料方法 | 第75-85页 |
·材料 | 第75页 |
·玉米ZmGAD基因的克隆 | 第75-77页 |
·玉米谷氨酸脱羧酶ZmGAD1在大肠杆菌中的表达与酶活性分析 | 第77-80页 |
·Southern blotting分析 | 第80-82页 |
·玉米ZmGAD1基因的表达模式分析和酶活性分析 | 第82-83页 |
·玉米ZmGAD1基因启动子序列的克隆及序列分析 | 第83页 |
·玉米谷氨酸脱酶ZmGAD1植物表达载体的构建 | 第83-85页 |
·结果与分析 | 第85-105页 |
·玉米GAD cDNA的克隆 | 第85-86页 |
·玉米侯选谷氨酸脱羧酶基因ZmGAD1在大肠杆菌中的表达及酶活性测定 | 第86-90页 |
·玉米ZmGAD1基因的Southern blotting分析和ZmGAD2的电子克隆 | 第90-92页 |
·玉米谷氨酸脱羧酶基因序列的生物信息学分析 | 第92-97页 |
·玉米ZmGAD1基因的表达模式分析和酶活性分析 | 第97-101页 |
·玉米ZmGAD1基因启动子序列的克隆和生物信息学分析 | 第101-103页 |
·玉米ZmGAD1基因植物表达载体的构建 | 第103-105页 |
·讨论 | 第105-109页 |
第三部分 总结和展望 | 第109-112页 |
附录 | 第112-120页 |
参考文献 | 第120-135页 |
ACKNOWLEDGEMENTS | 第135-136页 |
攻读博士学位期间发表的学术论文目录 | 第136-137页 |
学位论文评阅及答辩情况表 | 第137-138页 |
英文论文 | 第138-160页 |