| 致谢 | 第1-6页 |
| 摘要 | 第6-7页 |
| Abstract | 第7-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-27页 |
| 1.双生病毒概述 | 第11-16页 |
| ·双生病毒的发生与危害 | 第11-12页 |
| ·双生病毒的分类和基因组结构 | 第12-15页 |
| ·Mastrevirus属 | 第12-13页 |
| ·Curtovirus属 | 第13页 |
| ·Topocuvirus属 | 第13页 |
| ·Begomovirus属 | 第13-15页 |
| ·双生病毒种的划分标准 | 第15-16页 |
| 2.双生病毒病害复合体是一类新的致病类型 | 第16-19页 |
| ·双生病毒伴随的类似Nanovirus的DNA1分子 | 第16-17页 |
| ·双生病毒伴随新型的卫星分子——DNAβ | 第17-18页 |
| ·双生病毒病害复合体是作物生产上的潜在威胁 | 第18-19页 |
| 3.双生病毒的致病因子及其作用途径 | 第19-27页 |
| ·双生病毒的致病相关因子 | 第19-23页 |
| ·C2/AC2 | 第19-20页 |
| ·C4/AC4 | 第20页 |
| ·BC1 | 第20-21页 |
| ·BV1 | 第21页 |
| ·卫星DNAβ编码的βC1 | 第21-23页 |
| a) 卫星DNAβ分子基因组结构 | 第22-23页 |
| ·双生病毒的致病因子及其可能的作用途径 | 第23-27页 |
| ·调控细胞周期与病毒致病性的关系 | 第23页 |
| ·干扰细胞运动与病毒致病性的关系 | 第23-24页 |
| ·双生病毒抑制植物RNA沉默与病毒侵染和症状形成的关系 | 第24-27页 |
| 第二章 材料与方法 | 第27-38页 |
| 1 材料 | 第27-28页 |
| ·植物材料 | 第27页 |
| ·病毒侵染性克隆 | 第27页 |
| ·菌株和质粒 | 第27页 |
| ·试剂 | 第27页 |
| ·常用缓冲液的配制 | 第27-28页 |
| 2 方法 | 第28-38页 |
| ·PCR技术 | 第28-29页 |
| ·常规PCR技术 | 第28页 |
| ·Overlap Extension PCR | 第28-29页 |
| ·PCR产物纯化 | 第29-30页 |
| ·DNA克隆技术 | 第30-32页 |
| ·连接 | 第30页 |
| ·DNA末端去磷酸化 | 第30-31页 |
| ·感受态细胞制备 | 第31页 |
| ·转化 | 第31-32页 |
| ·重组质粒的提取与鉴定 | 第32-33页 |
| ·碱裂解法 | 第32页 |
| ·质粒微量提取试剂盒 | 第32-33页 |
| ·PCR鉴定 | 第33页 |
| ·酶切鉴定 | 第33页 |
| ·序列测定与分析 | 第33页 |
| ·植物总DNA提取和Southern分析 | 第33-38页 |
| ·总DNA提取(CTAB法) | 第33-34页 |
| ·电泳及转膜 | 第34-35页 |
| ·探针标记 | 第35页 |
| ·预杂交和杂交 | 第35-38页 |
| 第三章 TYLCCNV与TbCSV卫星DNA分子上症状决定因子的定位 | 第38-57页 |
| 1 材料与方法 | 第38-45页 |
| ·病毒材料 | 第38页 |
| ·TbCSV-Y35 DNAβ与TYLCCNV-Y10 DNAβ AP区置换的嵌合体卫星构建 | 第38-40页 |
| ·嵌合体卫星Y10-35AP与Y35-10AP的侵染性克隆构建 | 第40-41页 |
| ·三亲交配及农杆菌接种 | 第41-44页 |
| ·假重组(Pseudorecombination)实验 | 第44页 |
| ·Southern印迹检测 | 第44-45页 |
| 2 结果与分析 | 第45-54页 |
| ·Overlap Extension PCR构建的嵌合体卫星分子 | 第45-47页 |
| ·TbCSV-Y35与TYLCCNV-Y10假重组实验结果分析 | 第47-48页 |
| ·嵌合体卫星诱导的症状类型分析 | 第48-52页 |
| ·Southern印迹检测 | 第52-54页 |
| 3 讨论 | 第54-57页 |
| 参考文献 | 第57-65页 |
| 附录A 常用生化及分子生物学试剂与仪器 | 第65-66页 |
| 附录B 常用缓冲液及培养基配方 | 第66-69页 |
