| 缩略词表 | 第1-8页 |
| 中文摘要 | 第8-11页 |
| 英文摘要(ABSTRACT) | 第11-14页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-59页 |
| 第一节 腺病毒载体现状和发展 | 第14-24页 |
| 1、腺病毒及腺病毒载体简介 | 第14-17页 |
| 2、腺病毒载体在基因治疗中的优缺点 | 第17-21页 |
| 3、腺病毒载体应用的发展和改良 | 第21-24页 |
| 第二节 RNA干扰在基因治疗中的作用 | 第24-30页 |
| 1、RNA干扰的体内应用 | 第25-27页 |
| 2、基于RNA干扰的治疗策略 | 第27-30页 |
| 第三节 趋化因子CX3CL1功能综述 | 第30-36页 |
| 1、CX3CL1的基本生物学功能 | 第30-34页 |
| 2、CX3CL1在临床疾病中的作用 | 第34-36页 |
| 参考文献 | 第36-59页 |
| 第二章 前言 | 第59-60页 |
| 第三章 材料和方法 | 第60-87页 |
| 1 动物 | 第60页 |
| 2 试剂 | 第60-63页 |
| 3 质粒的转化、扩增及纯化 | 第63-64页 |
| 4 腺病毒的构建 | 第64-74页 |
| 5 高压尾静脉注射 | 第74-75页 |
| 6 免疫组织化学 | 第75页 |
| 7 流式细胞术分析 | 第75-76页 |
| 8 细胞复苏 | 第76页 |
| 9 细胞计数 | 第76页 |
| 10 血清转氨酶ALT/AST检测(赖式法) | 第76-77页 |
| 11 病理学分析(H-E染色 | 第77-78页 |
| 12 细胞清除 | 第78页 |
| 13 RT-PCR及荧光定量PCR分析 | 第78-81页 |
| 14 单个核细胞分离 | 第81-82页 |
| 15 肝细胞分离 | 第82页 |
| 16 X-gal染色检测bacterial galactosidase活性 | 第82-83页 |
| 17 抗体阻断 | 第83页 |
| 18 Westerm Blotting | 第83-85页 |
| 19 免疫荧光 | 第85页 |
| 20 流式细胞分选 | 第85-86页 |
| 21 小鼠背部荷瘤模型的观察 | 第86页 |
| 22 数据统计和分析 | 第86页 |
| 附:以上实验所需主要仪器设备 | 第86-87页 |
| 第四章 结果和讨论 | 第87-140页 |
| 第一节 新型高压注射重组腺病毒诱导肝损伤模型的建立 | 第87-106页 |
| 1、腺病毒载体质粒pAdFKN的鉴定 | 第88-89页 |
| 2、小RNA腺病毒载体的构建 | 第89-93页 |
| 3、高压注射促进腺病毒载体对肝脏的体内感染 | 第93-94页 |
| 4、高压注射导入肝脏的腺病毒感染肝细胞的机制 | 第94-96页 |
| 5、高压注射腺病毒可以特异性感染肝脏淋巴细胞 | 第96-97页 |
| 6、高压注射腺病毒引起急性的肝脏损伤及淋巴细胞浸润 | 第97-100页 |
| 7、高压注射腺病毒促进了肝脏NK细胞浸润 | 第100-101页 |
| 8、NK细胞介导了高压注射腺病毒诱导的肝损伤 | 第101-104页 |
| 9、NK细胞介导了高压注射腺病毒诱导的IFN-γ的产生 | 第104-106页 |
| 第二节 治疗性RNA干扰CX3CL1抑制腺病毒引起的肝脏损伤 | 第106-118页 |
| 1、高压注射腺病毒感染诱导肝脏内部趋化因子CX3CL1表达上调 | 第106-108页 |
| 2、高压注射腺病毒感染诱导CX3CR1~+活化的NK细胞浸润 | 第108-109页 |
| 3、肝脏内过表达CX3CL1/FKN加重了肝脏的炎症反应 | 第109-111页 |
| 4、过表达CX3CL1/FKN的肝脏内CX3CR1~+NK细胞浸润增加 | 第111-113页 |
| 5、治疗性RNA干扰CX3CL1抑制腺病毒诱导的肝脏损伤 | 第113-116页 |
| 6、抗体阻断CX3CL1-CX3CR1相互作用减弱腺病毒诱导的肝脏损伤 | 第116-118页 |
| 第三节 RNA干扰CX3CL1抑制黑色素瘤体内生长及机制研究 | 第118-128页 |
| 1、CX3CL1在小鼠黑色素瘤及人肿瘤组织上的表达 | 第118-120页 |
| 2、构建携带荧光蛋白标签的CX3CL1干扰腺病毒载体 | 第120-123页 |
| 3、制备CX3CL1-knockdown小鼠B16细胞 | 第123-124页 |
| 4、RNA干扰CX3CL1抑制小鼠B16细胞体内生长 | 第124-126页 |
| 5、CX3CL1通过促进肿瘤血管生成来帮助肿瘤生长 | 第126-128页 |
| 第四节 讨论 | 第128-140页 |
| 1、新型高压注射重组腺病毒诱导肝损伤模型的建立 | 第128-129页 |
| 2、治疗性RNA干扰CX3CL1抑制腺病毒引起的肝脏损伤 | 第129-132页 |
| 3、RNA干扰CX3CL1抑制黑色素瘤体内生长及机制研究 | 第132-140页 |
| 致谢 | 第140-141页 |
| 附录 | 第141-142页 |
| 一、攻读学位期间发表和拟发表的论文 | 第141页 |
| 二、攻读学位期间所获得的奖励 | 第141页 |
| 三、攻读学位期间所参加的国际学术会议 | 第141-142页 |
| 附件 | 第142-144页 |
