| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 引言 | 第10-12页 |
| 第一部分 材料与方法 | 第12-17页 |
| 1 材料及来源 | 第12-13页 |
| ·菌株和质粒 | 第12页 |
| ·主要试剂 | 第12页 |
| ·细胞培养和转染 | 第12-13页 |
| 2 实验方法 | 第13-17页 |
| ·荧光素酶活性测试实验 | 第13页 |
| ·GST沉淀实验(GST pulldown) | 第13-14页 |
| ·免疫共沉淀 | 第14页 |
| ·免疫荧光染色实验 | 第14-15页 |
| ·细胞毒性实验 | 第15页 |
| ·RNA干涉实验 | 第15页 |
| ·两步免疫共沉淀实验 | 第15-16页 |
| ·激酶实验 | 第16页 |
| ·凝胶阻滞实验 | 第16-17页 |
| 第二部分 结果 | 第17-47页 |
| 1.IKK与CUEDC2相互作用研究 | 第17-23页 |
| ·IKK与CUEDC2在体内外相互作用的验证 | 第17-19页 |
| ·IKK与CUEDC2相互作用区域的确定 | 第19-21页 |
| ·CUEDC2与IKK相互作用区域的确定 | 第21-23页 |
| 2.CUEDC2减少了TNF诱导的IKK的磷酸化 | 第23-26页 |
| ·稳定表达CUEDC2的HeLa细胞株的筛选 | 第23页 |
| ·CUEDC2减少了TNF诱导的IKK的磷酸化 | 第23-24页 |
| ·CUEDC2使TNF诱导的IKK激酶活性下调 | 第24-26页 |
| ·CUEDC2表达下调后,使TNF诱导的IKK磷酸化增加 | 第26页 |
| 3.CUEDC2下调了IKK介导的NF-κB的转录活性 | 第26-30页 |
| ·CUEDC2抑制了TNF诱导的NF-κB的转录活性 | 第26-28页 |
| ·CUEDC2抑制了IL-1诱导的NF-κB的转录活性 | 第28页 |
| ·CUEDC2不同结构域对TNF诱导的NF-κB的转录活性的影响 | 第28-29页 |
| ·CUEDC2表达下调增加了TNF诱导的NF-κB的转录活性 | 第29-30页 |
| 4.CUEDC2下调了NF-κB下游靶基因的表达,抑制了NF-κB的活力 | 第30-33页 |
| ·CUEDC2下调了NF-κB下游靶基因的表达 | 第30-32页 |
| ·CUEDC2抑制了TNF诱导的NF-κB的p65亚基入核 | 第32页 |
| ·CUEDC2抑制了TNF诱导的NF-κB的DNA结合能力 | 第32-33页 |
| 5.CUEDC2通过抑制IKK而下调了NF-κB信号通路 | 第33-36页 |
| ·CUEDC2抑制了由TNF家族成员分子引起的NF-κB的转录激活 | 第33-35页 |
| ·CUEDC2对UV照射引起NF-κB的激活没有影响 | 第35-36页 |
| 6.CUEDC2抑制IKK磷酸化的机制探讨 | 第36-42页 |
| ·CUEDC2与GADD34在酵母细胞中能够发生相互作用 | 第36-37页 |
| ·CUEDC2能与PP1c发生相互作用 | 第37-38页 |
| ·IKK能与CUEDC2、GADD34发生相互作用 | 第38-39页 |
| ·IKK能与CUEDC2、PP1c存在同一个复合体中 | 第39-40页 |
| ·CUEDC2介导了PP1c招募到IKK复合体 | 第40-41页 |
| ·CUEDC2与GADD34-PP1c结合的区域确定 | 第41-42页 |
| 7.CUEDC2通过招募GADD34-PP1c到IKK复合体,介导了IKK的去磷酸化,进而抑制NF-κB活性 | 第42-47页 |
| ·CUEDC2-GADD34-PP1c介导了IKK的去磷酸化 | 第42-43页 |
| ·CUEDC2-GADD34-PP1c抑制了NF-κB的转录活性 | 第43-44页 |
| ·PP1c介导了对IKK的去磷酸化 | 第44-45页 |
| ·CUEDC2增加了HeLa细胞对TNF诱导的凋亡敏感性 | 第45-47页 |
| 第三部分 讨论 | 第47-49页 |
| 总结 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-54页 |
| 致谢 | 第54-55页 |
| 附录 | 第55-57页 |
| 英文缩略词 | 第55-57页 |
| 文章发表与交流 | 第57-73页 |
