| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-10页 |
| 缩略词 | 第10-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-26页 |
| ·植物在低温胁迫下的伤害机制 | 第11-12页 |
| ·低温驯化 | 第11页 |
| ·低温引起的细胞伤害 | 第11-12页 |
| ·植物对低温胁迫的反应 | 第12-14页 |
| ·Ca~(2+)细胞内转导低温信号的第二信使 | 第12-13页 |
| ·冷信号转导中的蛋白质磷酸化和去磷酸化反应 | 第13页 |
| ·ABA在低温信号传导中的作用 | 第13-14页 |
| ·低温驯化植物的生理生化变化 | 第14-16页 |
| ·基因表达与膜的低温稳定性 | 第14-16页 |
| ·抗氧化酶 | 第16页 |
| ·植物转录因子的结构和功能 | 第16-18页 |
| ·DNA结合域 | 第16-17页 |
| ·转录调控域 | 第17页 |
| ·核定位信号 | 第17页 |
| ·寡聚化位点 | 第17页 |
| ·转录因子的生物学功能 | 第17-18页 |
| ·转录激活因子CBF与植物抗冻性 | 第18-23页 |
| ·CBF基因家族 | 第18-19页 |
| ·CBF对抗冻基因的调控 | 第19-20页 |
| ·CBF低温响应途径在冷驯化中的主导地位 | 第20-22页 |
| ·CBF低温响应途径的广泛存在 | 第22页 |
| ·用CBF转录激活因子提高作物抗逆性 | 第22-23页 |
| ·其他类型与逆境相关的转录因子 | 第23-26页 |
| ·MYB类转录因子 | 第23-24页 |
| ·bZIP类转录因子 | 第24页 |
| ·WRKY类转录因子 | 第24-25页 |
| ·NAC类转录因子 | 第25-26页 |
| 第二章 拟南芥CBF3等位基因AtCRAP2的克隆及抗寒功能研究 | 第26-55页 |
| ·材料 | 第26-27页 |
| ·实验材料 | 第26页 |
| ·酶以及试剂 | 第26-27页 |
| ·主要仪器 | 第27页 |
| ·常用溶液的配置 | 第27-29页 |
| ·培养基的配置 | 第27页 |
| ·一般溶液的配置 | 第27-28页 |
| ·实验试剂的配置 | 第28-29页 |
| ·实验方法 | 第29-39页 |
| ·拟南芥基因组DNA的提取 | 第29页 |
| ·从基因组中克隆目的基因 | 第29-30页 |
| ·PCR产物的电泳回收 | 第30页 |
| ·连接T载体 | 第30-31页 |
| ·T载体连接产物的转化 | 第31页 |
| ·质粒的提取 | 第31页 |
| ·质粒的酶切(20μl体系) | 第31-32页 |
| ·从质粒上扩增所需要的片段 | 第32页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第32-33页 |
| ·植物表达载体的构建 | 第33页 |
| ·连接反应 | 第33页 |
| ·重组子导入大肠杆菌 | 第33页 |
| ·农杆菌感受态细胞的制备 | 第33-34页 |
| ·质粒转化农杆菌的电激转化 | 第34页 |
| ·根瘤农杆菌介导的转化 | 第34-35页 |
| ·鉴定转基因植株 | 第35-36页 |
| ·转基因拟南芥表型变化分析 | 第36页 |
| ·转基因拟南芥正常生长时的生物量及产量的变化 | 第36-37页 |
| ·过量表达CBF3基因、转AtCRAP2基因对低温胁迫下拟南芥生理生化指标的影响 | 第37页 |
| ·拟南芥总RNA的提取 | 第37-38页 |
| ·RT-PCR扩增拟南芥冷诱导基因 | 第38-39页 |
| ·结果与分析 | 第39-55页 |
| ·AtCRAP2基因的克隆 | 第39-41页 |
| ·AtCRAP2推测编码蛋白的氨基酸序列分析 | 第41-42页 |
| ·植物表达载体构建 | 第42-43页 |
| ·转基因拟南芥植株的获得 | 第43页 |
| ·阳性植株的PCR检测 | 第43-44页 |
| ·部分T1代种子的抗性筛选比率 | 第44-45页 |
| ·转基因拟南芥生长发育的变化 | 第45-50页 |
| ·转基因拟南芥植株抗寒性的鉴定 | 第50-54页 |
| ·AtCRAP2基因在拟南芥抗寒分子信号传递中的作用 | 第54-55页 |
| 第三章 讨论 | 第55-57页 |
| 结论 | 第57-58页 |
| 参考文献 | 第58-63页 |
| 附录 | 第63-64页 |
| 致谢 | 第64页 |
