摘要 | 第1-6页 |
ABSTRACT | 第6-10页 |
第一章 体细胞核移植中核的重编程与组蛋白乙酰化的研究进展 | 第10-21页 |
一、体细胞核移植中核的重编程 | 第10-13页 |
(一) 体细胞种类对核移植效果的影响 | 第10-12页 |
(二) 供体细胞核的重编程不完全 | 第12-13页 |
二、组蛋白乙酰化的研究 | 第13-20页 |
(一) 组蛋白研究概述 | 第14-15页 |
(二) 组蛋白乙酰基转移酶(HATs)和去乙酰基酶(HDACs) | 第15-17页 |
(三) 组蛋白乙酰化的作用 | 第17-20页 |
三、本研究的目的和意义 | 第20-21页 |
第二章 组蛋白乙酰化相关基因表达的检测方法建立 | 第21-40页 |
1.材料与方法 | 第22-31页 |
·实验材料 | 第22-23页 |
·实验方法 | 第23-31页 |
2.结果与分析 | 第31-35页 |
·总RNA的检测 | 第31页 |
·PCR扩增目的片断 | 第31-32页 |
·序列测定以及同源性分析 | 第32-34页 |
·扩增效率的鉴定 | 第34页 |
·实时荧光定量PCR条件的优化 | 第34-35页 |
3.讨论 | 第35-39页 |
·引物对实时荧光定量PCR的影响 | 第35-36页 |
·模板、引物模板配比关系对实时荧光定量PCR的影响 | 第36-37页 |
·溶解曲线与实时荧光定量PCR的特异性 | 第37页 |
·基因表达的相对定量 | 第37-38页 |
·内参基因的选择对基因表达相对定量结果的影响 | 第38-39页 |
4.结论 | 第39-40页 |
第三章 水牛供体细胞组蛋白乙酰化与核移植胚胎发育能力相关性的研究 | 第40-56页 |
1.材料与方法 | 第41-44页 |
·实验材料 | 第41-42页 |
·实验方法 | 第42-43页 |
·试验设计 | 第43-44页 |
·数据统计分析 | 第44页 |
2.结果与分析 | 第44-52页 |
·Real-time PCR技术检测TSA对基因HAT1 mRNA表达水平的影响 | 第44-45页 |
·Real-time PCR技术检测TSA对基因HDAC1 mRNA表达水平的影响 | 第45-47页 |
·供体细胞组蛋白乙酰化水平与核移植胚胎发育率的关系 | 第47-48页 |
·免疫荧光染色抗体浓度的优化 | 第48-50页 |
·各类型胚胎组蛋白乙酰化水平变化规律 | 第50-52页 |
3.讨论 | 第52-55页 |
·TSA处理后HAT1、HDAC1 mRNA表达水平的动态变化 | 第52-53页 |
·供体细胞组蛋白乙酰化水平对核移植胚胎发育率的影响 | 第53-54页 |
·胚胎组蛋白乙酰化水平与发育能力的相关性 | 第54-55页 |
4.结论 | 第55-56页 |
参考文献 | 第56-63页 |
附表:主要缩写词(ABBREVIATIONS) | 第63-64页 |
附图: | 第64-68页 |
附图1:各基因扩增曲线和溶解曲线 | 第64-65页 |
附图2:各类型胚胎发育过程中组蛋白乙酰化水平的动态变化 | 第65-68页 |
致谢 | 第68-69页 |
攻读学位期间发表论文情况 | 第69页 |