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豆豉产纤溶酶菌株的分离、鉴定及其基因的真核表达研究

摘要第1-4页
Abstract第4-8页
1 绪论第8-21页
   ·纤溶酶的研究概况第8-18页
     ·血栓的形成及溶栓机制第9-10页
     ·纳豆和纳豆激酶第10-11页
     ·豆豉和豆豉纤溶酶第11页
     ·纳豆激酶与豆豉纤溶酶的理化特性及酶学特性第11-12页
     ·纳豆激酶与豆豉溶栓酶的溶栓活性及作用机制第12-13页
     ·纳豆激酶与豆豉纤溶酶的分子结构第13-15页
     ·纳豆激酶与豆豉溶栓酶的分子生物学研究第15-16页
     ·纤溶活性的测定方法第16-17页
     ·展望第17-18页
   ·酿酒酵母第18-19页
     ·酿酒酵母的发展第18页
     ·酿酒酵母的表达系统第18-19页
     ·酿酒酵母菌的质粒-pYES2第19页
     ·应用及前景第19页
   ·研究目的和意义第19-21页
2 豆豉纤溶酶产生菌的分离及分类鉴定第21-36页
   ·材料第21-22页
     ·豆豉、载体与菌株第21页
     ·工具酶和试剂第21页
     ·仪器第21页
     ·试剂配制第21-22页
   ·方法第22-29页
     ·豆豉纤溶酶产生菌的筛选第22-23页
     ·菌种的分类鉴定第23-26页
     ·16S rDNA基因的制备第26-27页
     ·16S rDNA基因的克隆第27-29页
     ·重组质粒的核苷酸序列测定第29页
   ·结果第29-34页
     ·豆豉纤溶酶产生菌的筛选第29页
     ·菌种鉴定第29-31页
     ·16S rDNA基因的PCR扩增结果第31页
     ·重组克隆载体的鉴定第31-32页
     ·16S rDNA基因的序列测定结果及系统发育分析第32-34页
   ·讨论第34-35页
   ·小结第35-36页
3 豆豉纤溶酶(DFE)基因的克隆第36-47页
   ·材料第36-37页
     ·载体与菌株第36页
     ·工具酶与试剂第36页
     ·仪器第36页
     ·试剂配制第36-37页
   ·方法第37-40页
     ·豆豉纤溶酶(DFE)基因的制备第37-38页
     ·重组克隆载体pYES2-DFE的构建第38-39页
     ·重组克隆载体pYES2-DFE的克隆第39-40页
     ·重组质粒的核苷酸序列测定第40页
   ·结果第40-45页
     ·豆豉纤溶酶(DFE)基因的扩增第40页
     ·重组克隆载体的鉴定第40-41页
     ·豆豉纤溶酶(DFE)基因的序列分析第41-45页
   ·讨论第45页
   ·小结第45-47页
4 豆豉纤溶酶(DFE)基因的在酿酒酵母中的表达第47-53页
   ·材料第47-48页
     ·菌株与载体第47页
     ·主要试剂第47页
     ·仪器第47页
     ·主要试剂配制第47-48页
     ·培养基成分第48页
   ·方法第48-51页
     ·重组质粒在酿酒酵母中的克隆第48-49页
     ·重组质粒在酿酒酵母H158中的诱导表达第49-51页
   ·结果第51-52页
     ·酵母转化子的鉴定第51页
     ·重组菌的诱导表达及纤溶活性测定第51-52页
   ·讨论第52页
   ·小结第52-53页
结论第53-54页
参考文献第54-57页
攻读学位期间发表的学术论文第57-58页
致谢第58-59页

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