农杆菌介导的双价抗虫基因转入大豆的研究
| 中文摘要 | 第1-5页 |
| 英文摘要 | 第5-9页 |
| 引言 | 第9-21页 |
| 1. 我国大豆生产的基本概况 | 第9-10页 |
| 2. 转基因大豆的生产概况 | 第10页 |
| 3. 植物虫害的基本概况及应对策略简介 | 第10-11页 |
| 4. 抗虫基因的抗虫原理及其应用现状 | 第11-16页 |
| ·抗虫基因的分类 | 第11-12页 |
| ·Bt 基因的抗虫原理 | 第12-13页 |
| ·Bt 杀虫蛋白的基本分子结构 | 第13页 |
| ·Bt 杀虫蛋白基因定位及其表达和修饰 | 第13-15页 |
| ·Bt 杀虫蛋白基因定位 | 第13-14页 |
| ·Bt 基因的表达和修饰 | 第14页 |
| ·Bt 杀虫基因的改造和载体的构建 | 第14-15页 |
| ·第二代抗虫基因 | 第15-16页 |
| 5. 转双价抗虫基因植物的研究 | 第16-17页 |
| ·转双价抗虫基因植物的提出 | 第16-17页 |
| ·获得转双价抗虫基因植物的研究现状 | 第17页 |
| 6. 大豆农杆菌介导法发展概况 | 第17-18页 |
| 7. 农杆菌介导的遗传转化机理 | 第18-20页 |
| 8. 本研究的意义 | 第20-21页 |
| 材料和方法 | 第21-30页 |
| 1. 材料 | 第21-22页 |
| ·试材 | 第21页 |
| ·菌株和质粒 | 第21页 |
| ·试剂 | 第21-22页 |
| ·仪器设备 | 第22页 |
| 2. 方法 | 第22-30页 |
| ·培养基的配制 | 第22-24页 |
| ·大肠杆菌培养基 | 第22页 |
| ·农杆菌培养基 | 第22-23页 |
| ·大豆转化培养基 | 第23-24页 |
| ·基本培养基 B5、MS | 第23页 |
| ·生长培养基 GM | 第23页 |
| ·共培养培养基 S、M_卫1 | 第23页 |
| ·筛选诱芽培养基 MSE | 第23-24页 |
| ·生根培养基 | 第24页 |
| ·大豆幼胚培养基 | 第24页 |
| ·大豆的转化流程 | 第24-26页 |
| ·菌液的制备 | 第24-25页 |
| ·灭菌过程 | 第25页 |
| ·接种大豆 | 第25页 |
| ·转化过程 | 第25页 |
| ·筛选诱芽培养 | 第25-26页 |
| ·根的诱导 | 第26页 |
| ·移栽 | 第26页 |
| ·大豆幼胚的组织培养流程 | 第26页 |
| ·卡那霉素筛选愈伤组织的梯度试验方法 | 第26-27页 |
| ·转基因植株的检测 | 第27-30页 |
| ·GUS 组织化学分析 | 第27页 |
| ·PCR检测 | 第27-30页 |
| ·DNA 的提取与纯化 | 第27-28页 |
| ·引物序列 | 第28页 |
| ·PCR 反应体系 | 第28-29页 |
| ·PCR 反应程序 | 第29页 |
| ·电泳检测 | 第29-30页 |
| 结果与分析 | 第30-36页 |
| 1.大豆幼胚组织培养再生苗的获得 | 第30-32页 |
| 2. 卡那霉素筛选愈伤组织的梯度实验 | 第32页 |
| 3. 转基因大豆的获得 | 第32-34页 |
| 4. 转基因大豆的检测 | 第34-36页 |
| 讨论 | 第36-37页 |
| 结论 | 第37-38页 |
| 参考文献 | 第38-42页 |
| 致谢 | 第42页 |
