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多粘类芽孢杆菌(Paenibacillus polymyxa)Cp-S316抗真菌活性物质的发酵、分离纯化与性质研究

目录第1-10页
符号说明第10-11页
中文摘要第11-13页
Abstract第13-16页
第一章 文献综述第16-34页
 1 芽孢杆菌非核糖体肽的研究进展第16-26页
   ·芽孢杆菌非核糖体肽及其主要类型第16-21页
     ·脂肽抗生素第17-19页
     ·多肽抗生素第19-21页
     ·其它抗菌物质第21页
   ·芽孢杆菌非核糖体肽的生物合成机制第21-23页
   ·芽孢杆菌非核糖体肽的理化性质与抑/杀菌机制第23-25页
   ·芽孢杆菌非核糖体肽的应用前景第25-26页
 2 生物过程的优化第26-32页
   ·非统计优化方法第27页
   ·统计优化方法第27-32页
     ·响应面法第28-31页
       ·Placket-Burman设计法第28-29页
       ·部分因子试验设计(Fractional Factorial Design,FFD)第29-30页
       ·最陡爬坡试验(Steepest Accent Design)设计第30页
       ·中心组合试验设计(Centrol Composite design,CCD)第30-31页
     ·Box-Behnken设计法第31页
     ·模式识别法第31-32页
     ·单纯形法第32页
   ·统计优化实验设计和优化软件第32页
 3 本研究的目的意义第32-34页
第二章 Cp-S316抗真菌活性物质发酵条件与发酵培养基的优化第34-54页
 1 材料与方法第34-39页
   ·材料第34-35页
     ·菌株第34页
     ·培养基第34页
     ·主要仪器设备第34-35页
   ·方法第35-39页
     ·斜面菌种的制备第35页
     ·液体种子的制备第35页
     ·发酵液效价的生物测定第35-36页
       ·指示菌孢子的制备第35页
       ·生物活性检测混菌平板的制备第35页
       ·活性物质粗物的制备第35页
       ·活性物质粗物标准溶液的制备第35-36页
       ·标准曲线适宜浓度范围的确定第36页
       ·工作曲线的制作第36页
     ·活性物质发酵条件的筛选第36-37页
       ·不同接种量对活性物质产量的影响第36页
       ·不同发酵温度对活性物质产量的影响第36页
       ·不同装液量对活性物质产量的影响第36页
       ·不同发酵液初始pH对活性物质产量的影响第36-37页
     ·活性物质发酵培养基的优化第37-39页
       ·不同缓效碳源对活性物质产量的影响第37页
       ·不同速效碳源对活性物质产量的影响第37页
       ·不同氮源对活性物质产量的影响第37页
       ·不同C/N比对活性物质产量的影响第37页
       ·不同无机盐对活性物质产量的影响第37-38页
       ·无机盐的营养限制对活性物质产量的影响第38页
       ·部分因子试验设计第38-39页
       ·中心组合试验设计第39页
 2 结果与分析第39-53页
   ·杯碟法测定发酵液效价的标准曲线第39-41页
   ·活性物质发酵条件的筛选结果第41-43页
     ·不同接种量对活性物质产量的影响第41页
     ·不同温度对活性物质产量的影响第41页
     ·不同装液量对活性物质产量的影响第41-42页
     ·不同发酵液初始pH对活性物质产量的影响第42-43页
   ·活性物质发酵培养基的优化第43-53页
     ·不同缓效碳源对活性物质产量的影响第43-44页
     ·不同速效碳源对活性物质产量的影响第44-45页
     ·不同氮源对活性物质产量的影响第45页
     ·不同C/N比对活性物质产量的影响第45页
     ·不同无机盐对活性物质产量的影响第45-46页
     ·无机盐的营养限制对活性物质产量的影响第46-47页
     ·部分因子试验设计及其结果第47-49页
     ·最陡爬坡试验结果第49-50页
     ·中心组合试验设计及其结果第50-53页
   ·发酵条件与培养基优化结果的验证第53页
 3 小结第53-54页
第三章 Cp-S316抗真菌活性物质的分离纯化第54-70页
 1 材料与方法第54-60页
   ·材料第54-55页
     ·菌株第54页
     ·培养基第54页
     ·主要仪器设备第54-55页
     ·主要试验材料第55页
   ·方法第55-60页
     ·活性物质生物活性的检测和效价的测定第55页
     ·活性物质的粗提第55-57页
       ·活性物质粗物的制备第55-56页
       ·大孔吸附树脂的预处理第56页
       ·大孔吸附树脂吸附性能的比较第56页
       ·大孔吸附树脂解吸性能的比较第56页
       ·乙醇浓度对解吸效果的影响第56页
       ·HCl浓度对解吸效果的影响第56-57页
       ·X-5树脂对活性物质的吸附量的测定第57页
       ·X-5树脂静态解吸率的测定第57页
     ·活性物质的中间纯化第57-59页
       ·丙酮处理第57页
       ·DEAE Sepharose FF离子交换柱层析第57-58页
       ·CM Sepharose FF离子交换柱层析第58-59页
       ·Sephadex G50分子筛层析第59页
     ·活性物质的精制第59-60页
       ·活性物质的紫外光区全扫描第59页
       ·样品的处理第59页
       ·RP-HPLC色谱条件的选择第59页
       ·活性物质的RP-HPLC精制第59-60页
 2 结果与分析第60-68页
   ·活性物质的粗提第60-63页
     ·不同大孔吸附树脂吸附与解吸性能的比较第60-61页
     ·乙醇浓度对解吸效果的影响第61页
     ·HCl浓度对解吸效果的影响第61-62页
     ·X-5树脂对活性物质的吸附量第62-63页
     ·S X-5树脂对活性物质的静态解吸率第63页
   ·活性物质的中间纯化第63-68页
     ·丙酮处理结果第63页
     ·DEAE Sepharose FF离子交换柱层析第63-64页
     ·CM Sepharose FF离子交换柱层析第64-65页
     ·Sephadex G50分子筛层析第65-66页
     ·活性物质的精制第66-68页
       ·活性物质紫外光区全扫描结果第66页
       ·活性物质的制备第66-68页
 3 小结第68-70页
   ·活性物质的粗提第68页
   ·活性物质的中间纯化第68页
   ·活性物质的精制第68-70页
第四章 Cp-S316抗真菌活性物质的理化性质与生物学性质第70-80页
 1 材料与方法第70-74页
   ·材料第70-71页
     ·菌株第70页
     ·培养基第70-71页
     ·主要仪器设备第71页
   ·方法第71-74页
     ·活性物质粗物的制备第71页
     ·活性物质理化性质研究第71-72页
       ·对热的稳定性第71页
       ·对酸碱的稳定性第71-72页
       ·对紫外线的稳定性第72页
       ·对胰蛋白酶和蛋白酶K的稳定性第72页
       ·对有机溶剂的稳定性第72页
     ·Cp-S316抑菌谱的测定第72页
     ·活性物质粗物对烟草赤星病菌的抑制作用第72-73页
     ·活性物质粗物对绿僵的MIC和MFC的测定第73页
       ·药敏培养液的制备第73页
       ·菌悬液的制备第73页
       ·药敏平板的制备第73页
     ·活性物质的对家蚕的安全性试验第73-74页
 2 结果与分析第74-79页
   ·活性物质的稳定性第74-76页
     ·对热的稳定性第74页
     ·对酸碱的稳定性第74-75页
     ·对紫外线的稳定性第75页
     ·对胰蛋白酶和蛋白酶K的稳定性第75-76页
     ·对有机溶剂的稳定性第76页
   ·Cp-S316的抑菌谱第76页
   ·活性物质粗物对烟草赤星病菌的抑制作用第76-77页
   ·活性物质粗物对家蚕的安全性第77-79页
     ·活性物质粗物对绿僵的MIC和MFC的测定结果第77-78页
     ·活性物质粗物对家蚕的安全性第78-79页
 3 小结第79-80页
   ·活性物质的性质第79页
   ·活性物质对烟草赤星的抑制作用及其抑菌谱第79页
   ·活性物质的对家蚕安全性第79-80页
第五章 结论与讨论第80-86页
 1 讨论第80-84页
   ·关于抗真菌活性物质发酵条件与发酵培养基的优化第80-81页
   ·关于抗真菌活性物质的分离纯化第81页
   ·关于抗真菌活性物质的理化性质与生物学特性第81-82页
   ·关于多粘类芽孢杆菌及其产生的活性物质第82-83页
   ·关于进一步研究的设想第83-84页
 2 结论第84-86页
   ·抗真菌活性物质发酵条件与发酵培养基的优化第84页
   ·抗真菌活性物质的分离纯化第84-85页
   ·抗真菌活性物质的理化性质与生物学性质第85-86页
参考文献第86-94页
附录一 Cp-S316产生的抗细菌活性物质Q-TOF2分析第94-98页
附录二 Cp-S316菌株对多种动植物病原菌的拮抗作用第98-101页
附录三 活性物质理化性质测定图谱第101-102页
致谢第102-103页
硕士期间发表论文第103页

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