| 中文摘要 | 第1-9页 |
| 英文摘要 | 第9-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-34页 |
| ·微生物脂肪酶的生产 | 第11-20页 |
| ·脂肪酶产生菌的筛选 | 第11-12页 |
| ·脂肪酶的生产 | 第12-14页 |
| ·脂肪酶的纯化及其酶学性质 | 第14-19页 |
| ·脂肪酶的固定化研究 | 第19-20页 |
| ·微生物脂肪酶催化拆分布洛芬的研究进展 | 第20-32页 |
| ·拆分方法的研究概况 | 第20-22页 |
| ·酶法拆分的研究进展 | 第22-27页 |
| ·酶法拆分布洛芬的研究进展 | 第27-32页 |
| ·本文的研究思路与主要内容 | 第32-34页 |
| 第二章 高立体选择性的脂肪酶产生菌的筛选 | 第34-46页 |
| ·材料与方法 | 第35-38页 |
| ·菌种 | 第35页 |
| ·培养基 | 第35-36页 |
| ·染色液 | 第36-37页 |
| ·种子培养 | 第37页 |
| ·摇瓶产酶 | 第37页 |
| ·脂肪酶活力的测定——分光光度计法 | 第37页 |
| ·立体选择性脂肪酶产生菌的筛选 | 第37-38页 |
| ·结果与讨论 | 第38-44页 |
| ·高效液相色谱检测方法的建立 | 第38-39页 |
| ·立体选择性脂肪酶产生菌的定量筛选 | 第39-41页 |
| ·脂肪酶产生菌产酶能力的定性筛选 | 第39-40页 |
| ·立体选择性脂肪酶产生菌的定量筛选 | 第40-41页 |
| ·筛选得到的产酶菌株的菌落、菌体形态及生理生化特征 | 第41-44页 |
| ·小结 | 第44-46页 |
| 第三章 Bacillus coagulans脂肪酶产酶条件的优化 | 第46-57页 |
| ·材料与方法 | 第47页 |
| ·菌种 | 第47页 |
| ·主要原料和试剂 | 第47页 |
| ·培养基 | 第47页 |
| ·发酵产酶试验 | 第47页 |
| ·酶活测定方法 | 第47页 |
| ·结果与讨论 | 第47-55页 |
| ·脂肪酶发酵条件的优化 | 第47-51页 |
| ·培养温度对产酶的影响 | 第47-48页 |
| ·转速对产酶的影响 | 第48-49页 |
| ·摇瓶装量对产酶的影响 | 第49页 |
| ·接种量对产酶的影响 | 第49-50页 |
| ·发酵周期对产酶的影响 | 第50-51页 |
| ·脂肪酶产酶培养基的优化 | 第51-55页 |
| ·碳源对产酶的影响 | 第51页 |
| ·氮源对产酶的影响 | 第51-52页 |
| ·不同磷酸盐对产酶的影响 | 第52-53页 |
| ·利用均匀设计法优化产酶培养基 | 第53-55页 |
| ·利用均匀设计法筛选产酶最佳培养基 | 第53-54页 |
| ·试验数据的回归分析及回归方程的建立 | 第54页 |
| ·优化结果的验证 | 第54-55页 |
| ·小结 | 第55-57页 |
| 第四章 Bacillus coagulans脂肪酶的纯化及酶学性质 | 第57-71页 |
| ·材料与方法 | 第58-60页 |
| ·主要试剂 | 第58页 |
| ·酶液的制备 | 第58页 |
| ·脂肪酶的纯化 | 第58-59页 |
| ·脂肪酶蛋白质浓度的测定 | 第59页 |
| ·SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS—PAGE) | 第59页 |
| ·脂肪酶酶学性质的研究 | 第59-60页 |
| ·结果与讨论 | 第60-70页 |
| ·CM-Sepbarose FF层析 | 第60-61页 |
| ·Sephacryl S200柱层析 | 第61-62页 |
| ·Bacillus coagulans ZJU318脂肪酶的纯化过程小结 | 第62-63页 |
| ·脂肪酶分子量的测定 | 第63-65页 |
| ·Bacillus coagulans ZJU318所产脂肪酶的酶学特性 | 第65-70页 |
| ·脂肪酶作用的最适温度 | 第65页 |
| ·脂肪酶的温度稳定性 | 第65-66页 |
| ·脂肪酶作用的最适pH | 第66-67页 |
| ·脂肪酶的pH稳定性 | 第67-68页 |
| ·金属离子及EDTA对脂肪酶活力的影响 | 第68-69页 |
| ·表面活性剂对脂肪酶活力的影响 | 第69-70页 |
| ·小结 | 第70-71页 |
| 第五章 Penillium expansum产酶条件的优化 | 第71-79页 |
| ·材料与方法 | 第72-73页 |
| ·材料 | 第72页 |
| ·方法 | 第72-73页 |
| ·结果与讨论 | 第73-78页 |
| ·发酵产酶培养基的优化 | 第73-75页 |
| ·碳源对产酶的影响 | 第73-74页 |
| ·氮源对产酶的影响 | 第74-75页 |
| ·初始pH对产酶的影响 | 第75页 |
| ·产酶培养基优化的均匀设计实验 | 第75-77页 |
| ·验证实验 | 第77-78页 |
| ·小结 | 第78-79页 |
| 第六章 Penicillium expansum脂肪酶的纯化及酶学性质 | 第79-90页 |
| ·材料与方法 | 第80-82页 |
| ·菌种 | 第80页 |
| ·主要试剂 | 第80页 |
| ·培养基 | 第80页 |
| ·方法 | 第80-82页 |
| ·产酶条件与方法 | 第80-81页 |
| ·脂肪酶活力测定方法——分光光度计法 | 第81页 |
| ·脂肪酶的纯化 | 第81页 |
| ·蛋白质浓度的测定 | 第81页 |
| ·SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第81-82页 |
| ·脂肪酶酶学性质的研究 | 第82页 |
| ·结果与讨论 | 第82-88页 |
| ·DEAE-Sepharose FF柱层析 | 第82-83页 |
| ·Sephacry1 S200柱层析 | 第83页 |
| ·脂肪酶纯化过程的小结 | 第83-85页 |
| ·脂肪酶分子量的测定 | 第85-86页 |
| ·Penicillium expansum TS414所产脂肪酶的酶学性质 | 第86-88页 |
| ·脂肪酶作用的最适温度 | 第86页 |
| ·脂肪酶的温度稳定性 | 第86-87页 |
| ·脂肪酶作用的最适pH | 第87页 |
| ·脂肪酶的pH稳定性 | 第87-88页 |
| ·小结 | 第88-90页 |
| 第七章 游离脂肪酶催化拆分布洛芬对映体的研究 | 第90-102页 |
| ·材料与方法 | 第91-92页 |
| ·材料 | 第91页 |
| ·方法 | 第91-92页 |
| ·脂肪酶催化拆分反应 | 第91页 |
| ·反应转化率(C)、对映体过量值(ee)及对映体选择率(E)测定 | 第91-92页 |
| ·结果与讨论 | 第92-101页 |
| ·布洛芬拆分适用的脂肪酶的确定 | 第92-94页 |
| ·pH对拆分反应的影响 | 第94页 |
| ·体系含水量对拆分反应的影响 | 第94-96页 |
| ·温度对拆分反应的影响 | 第96-97页 |
| ·底物醇的种类(酰基受体)对拆分反应的影响 | 第97-98页 |
| ·1-丙醇的量对脂肪酶活力及对映体选择性的影响 | 第98-99页 |
| ·脂肪酶的用量对酶促拆分反应的影响 | 第99-100页 |
| ·有机溶剂对酶促拆分反应的影响 | 第100-101页 |
| ·小结 | 第101-102页 |
| 第八章 固定化脂肪酶催化拆分布洛芬对映体的研究 | 第102-115页 |
| ·材料与方法 | 第102-104页 |
| ·材料 | 第102-103页 |
| ·PEL的提取 | 第103页 |
| ·固定化脂肪酶的制备 | 第103页 |
| ·固定化酶催化拆分(R,S)-布洛芬: | 第103页 |
| ·固定化酶的活力及对映体选择性的测定 | 第103-104页 |
| ·结果与讨论 | 第104-113页 |
| ·不同载体固定化PEL在非水相中催化性能的比较 | 第104-105页 |
| ·影响非水相中固定化PEL催化性能的因素 | 第105-109页 |
| ·酶量与树脂的比例对固定化脂肪酶活力及对映体选择性的影响 | 第105-106页 |
| ·pH对脂肪酶活力及对映体选择性的影响 | 第106页 |
| ·体系含水量对脂肪酶活力及对映体选择性的影响 | 第106-108页 |
| ·转速对固定化酶活力及对映体选择性的影响 | 第108-109页 |
| ·大孔吸附树脂固定化对PEL在非水相中的酶学性质的影响 | 第109-111页 |
| ·固定化对PEL最适反应温度的影响 | 第109页 |
| ·固定化对PEL热稳定性的影响 | 第109-110页 |
| ·固定化对PEL在非水体系中分散性的影响 | 第110-111页 |
| ·固定化对PEL拆分布洛芬的活力和选择性的影响 | 第111页 |
| ·固定化酶促拆分反应进程曲线 | 第111-112页 |
| ·大孔吸附树脂固定化PEL重复分批拆分(R,S)-布洛芬 | 第112-113页 |
| ·小结 | 第113-115页 |
| 第九章 固定化脂肪酶拆分布洛芬的酶反应器及反应动力学的研究 | 第115-127页 |
| ·材料与方法 | 第116页 |
| ·材料 | 第116页 |
| ·BSTR中大孔吸附树脂AB—8固定化PEL对(R,S)-布洛芬的拆分 | 第116页 |
| ·大孔吸附树脂AB—8固定化PEL拆分(R,S)-布洛芬的反应动力学研究 | 第116页 |
| ·结果与讨论 | 第116-126页 |
| ·BSTR中大孔吸附树脂AB—8固定化PEL拆分(R,S)-布洛芬的工艺参数的优化 | 第116-118页 |
| ·验证实验 | 第118-119页 |
| ·BSTR中固定化酶操作稳定性的研究 | 第119-120页 |
| ·固定化酶反应动力学的研究 | 第120-126页 |
| ·小结 | 第126-127页 |
| 第十章 结论与建议 | 第127-132页 |
| ·结论 | 第127-131页 |
| ·建议 | 第131-132页 |
| 参考文献 | 第132-149页 |
| 附录 | 第149-150页 |
| 致谢 | 第150页 |
