第一章 文献综述 | 第1-25页 |
·呼吸系统及其肺损伤机制 | 第13-16页 |
·呼吸系统的结构及其与疾病的关系 | 第13-14页 |
·肺损伤发生的机制 | 第14-15页 |
·猪常见的呼吸系统疾病及其研究进展 | 第15-16页 |
·基因差异表达的研究方法 | 第16-24页 |
·差示筛选(diferential screening) | 第17页 |
·消减杂交(subtractive hybridization) | 第17页 |
·差异显示反转录PCR技术(DDRT—PCR) | 第17-18页 |
·代表性差示分析法(representational difference analysis,RDA) | 第18页 |
·基因表达系列分析(Serial Analysis of Gene Expression,SAGE) | 第18-19页 |
·抑制性消减杂交(Suppression subttactive hybridization SSH) | 第19-22页 |
·交互扣除RNA差别显示技术(RSDD) | 第22-23页 |
·差异消减展示(differential subtraction display,DSD) | 第23页 |
·微阵列分析(microarray assay) | 第23-24页 |
·研究意义 | 第24-25页 |
第二章 构建猪肺组织炎症抗性相关cDNA文库 | 第25-40页 |
·前言 | 第25页 |
·材料和方法 | 第25-36页 |
·材料 | 第25-27页 |
·方法 | 第27-36页 |
·结果 | 第36-39页 |
·肺部组织中总RNA提取、mRNA纯化及检测 | 第36-37页 |
·双链cDNA(dscDNA)合成与酶切 | 第37页 |
·接头连接效率检测 | 第37-38页 |
·消减产物第二次PCR结果 | 第38页 |
·消减效率检测 | 第38-39页 |
·消减文库中插入片段的PCR鉴定 | 第39页 |
·讨论 | 第39-40页 |
第三章 猪肺组织中差异表达基因片段的克隆测序和功能分析 | 第40-55页 |
·前言 | 第40页 |
·材料与方法 | 第40-44页 |
·主要试剂 | 第40页 |
·主要仪器设备 | 第40-41页 |
·杂交所用溶液配制 | 第41页 |
·差异筛选探针的标记 | 第41-42页 |
·探针标记效率检测 | 第42页 |
·插入片段的扩增与点膜 | 第42-43页 |
·反Northern斑点杂交与显色 | 第43页 |
·差异表达克隆选取 | 第43页 |
·测序 | 第43页 |
·差异表达EST生物信息学分析 | 第43-44页 |
·结果 | 第44-50页 |
·探针标记效率检测结果 | 第44页 |
·反Northern斑点杂交筛选结果 | 第44-50页 |
·结论 | 第50-55页 |
·猪免疫球蛋白IgG重链基因(L0C396781) | 第50页 |
·核转录因子-κB基因(NF-κB) | 第50-51页 |
·补体分子Clq基因(ClQC) | 第51-52页 |
·钙粒蛋白B基因(S100A9)(Calgranulin B gen) | 第52-53页 |
·α—平滑肌激动蛋白基因(ACTA2) | 第53-54页 |
·核糖体蛋白基因(RPS11)(RPS20) | 第54-55页 |
第四章 全文结论 | 第55-56页 |
参考文献 | 第56-63页 |
致谢 | 第63-64页 |
附录 | 第64-65页 |
作者简历 | 第65页 |