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钩端螺旋体L11蛋白甲基化位点的确定及其功能研究

摘要第1-5页
Abstract第5-9页
1 前言第9-17页
   ·钩端螺旋体研究现状第9-12页
     ·钩端螺旋体简介第9-11页
     ·钩端螺旋体研究现状第11-12页
   ·L11修饰的研究现状与研究意义第12-17页
     ·蛋白质翻译后修饰对蛋白质功能的影响第12-13页
     ·核糖体蛋白质L11研究进展第13-16页
     ·核糖体蛋白L11的甲基化修饰和胁迫功能研究的意义第16-17页
2 材料和方法第17-34页
   ·材料、试剂与仪器第17-22页
     ·菌株和质粒第17页
     ·购买试剂第17-19页
     ·自备试剂第19-21页
     ·仪器第21-22页
   ·试验方案第22页
   ·方法第22-34页
     ·钩端螺旋体PrmA和liL11及其突变体基因的PCR扩增第22-25页
     ·pET22b-liPrmA和pET28a-liL11及其突变体质粒的构建第25-28页
     ·liPrmA在大肠杆菌中的表达与纯化第28-31页
     ·liL11以及突变体蛋白的表达和纯化第31-33页
     ·甲基化转移酶的酶活测定第33页
     ·在NaCl胁迫条件下E.coli菌斑计数第33-34页
3 结果与分析第34-46页
   ·liL11甲基化位点的确定第34-43页
     ·liPrmA PCR产物酶切鉴定第34页
     ·liPrmA重组质粒的酶切鉴定第34-35页
     ·liL11及其突变体PCR产物酶切鉴定第35-36页
     ·liL11及其突变体重组质粒产物酶切鉴定第36-37页
     ·liPrmA的表达条件第37-38页
     ·liL11以及突变体的表达条件第38-40页
     ·liPrmA蛋白的纯化第40页
     ·liL11及其突变体蛋白的纯化第40-42页
     ·liPrmA酶活的鉴定以及liL11甲基化位点的确定第42-43页
   ·在NaCl胁迫条件下liL11甲基化对E.coli生长的影响第43-46页
4 讨论第46-52页
   ·liPrmA蛋白表达条件的优化第46-47页
   ·liL11基化位点位于其N端序列第47-48页
   ·在NaCl胁迫下liL11甲基化可以促进E.coli的生长第48-49页
   ·liPrmA在功能与结构上的保守性第49-52页
结论第52-53页
参考文献第53-61页
在校期间发表的文章第61-62页
致谢第62-63页

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