| 摘要 | 第1-18页 |
| 第一章 前言与综述 | 第18-32页 |
| 1.金黄色葡萄球菌(staphylococcus aureus)的培养特性 | 第18页 |
| 2.金黄色葡萄球菌的毒素 | 第18-20页 |
| ·肠毒素(Staphylococcal Enterotoxin,SE) | 第19页 |
| ·溶血毒素 | 第19页 |
| ·剥脱毒素 | 第19-20页 |
| ·致热性外毒素 | 第20页 |
| ·杀白细胞素 | 第20页 |
| ·中毒性休克综合症毒素Ⅰ | 第20页 |
| 3.L型金葡菌 | 第20-21页 |
| 4.金黄色葡萄球菌的检测 | 第21-25页 |
| ·传统的酶检测试验 | 第21-22页 |
| ·血浆凝固酶试验 | 第21页 |
| ·耐热核酸酶试验 | 第21-22页 |
| ·生物化学为基础建立的快速检测技术 | 第22页 |
| ·色原或荧光底物及成套鉴定系统 | 第22页 |
| ·微生物专有酶快速反应系统 | 第22页 |
| ·免疫学方法为基础建立的快速检测技术 | 第22-23页 |
| ·免疫荧光技术 | 第23页 |
| ·酶免疫(enzyme immunoassay,EIA)测定技术 | 第23页 |
| ·免疫印迹(immunoblot)技术 | 第23页 |
| ·免疫组织化学方法 | 第23页 |
| ·以分子生物学为基础建立的快速检测技术 | 第23-25页 |
| ·聚合酶链式反应技术在微生物的检测中的应用 | 第23-25页 |
| ·核糖体RNA(rRNA)基因在检测中的应用 | 第24页 |
| ·金葡菌特殊基因在检测中的应用 | 第24-25页 |
| ·PNA(Peptide Nucleic Acid)FISH | 第25页 |
| 5.金黄色葡萄球菌的分型 | 第25-30页 |
| ·表型标记分型 | 第26页 |
| ·噬菌体分型 | 第26页 |
| ·血清学分型 | 第26页 |
| ·分子生物学分型 | 第26-30页 |
| ·质粒图谱分析 | 第26页 |
| ·脉冲场电泳分型 | 第26-27页 |
| ·任意引物PCR(Arbitrarily Primer PCR,AP-PCR) | 第27页 |
| ·重复片段PCR(Rep-PCR) | 第27-28页 |
| ·核糖体分型 | 第28页 |
| ·扩增片段长度多态性 | 第28页 |
| ·多位点序列分型 | 第28页 |
| ·青霉素结合蛋白基因指纹图谱 | 第28页 |
| ·DNA印迹和限制性片断长度多态性分析 | 第28-29页 |
| ·DNA序列测定 | 第29页 |
| ·利用PCR扩增特殊基因的分型 | 第29-30页 |
| ·凝固酶基因 | 第29页 |
| ·SPA基因 | 第29页 |
| ·Tar916-shida PCR | 第29-30页 |
| ·全细胞蛋白图谱分型 | 第30页 |
| 6.本文研究的目的和意义 | 第30页 |
| 7.本文研究内容 | 第30-32页 |
| 第二章 葡萄球菌的分离和经典方法鉴定及肠毒素的检测 | 第32-42页 |
| 1.材料和方法 | 第32-37页 |
| ·材料 | 第32-34页 |
| ·试验菌株 | 第32页 |
| ·培养基 | 第32-33页 |
| ·试验所用主要试剂 | 第33页 |
| ·仪器设备 | 第33-34页 |
| ·方法 | 第34-37页 |
| ·葡萄球菌的的采集、分离及纯化 | 第34页 |
| ·葡萄球菌的经典方法鉴定 | 第34-37页 |
| ·革兰氏染色 | 第34-35页 |
| ·BP平板培养 | 第35页 |
| ·触酶试验 | 第35页 |
| ·氧化酶试验 | 第35-36页 |
| ·科玛嘉显色培养基显色试验 | 第36页 |
| ·APIStaph试剂盒系列试验 | 第36-37页 |
| ·葡萄球菌的肠毒素测定 | 第37页 |
| 2.结果与分析 | 第37-42页 |
| ·菌种采集、分离及纯化 | 第37-38页 |
| ·材料采集培养基的配制 | 第37-38页 |
| ·葡萄球菌的经典方法鉴定 | 第38-40页 |
| ·形态学鉴定 | 第38-39页 |
| ·APIStaph试剂盒鉴定 | 第39-40页 |
| ·肠毒素检测 | 第40-42页 |
| 第三章 葡萄球菌属的ITS序列分析及REP指纹图谱研究 | 第42-56页 |
| 1.材料与方法 | 第42-50页 |
| ·材料 | 第42-44页 |
| ·试验菌株 | 第42页 |
| ·培养基 | 第42-43页 |
| ·试剂 | 第43页 |
| ·仪器设备 | 第43-44页 |
| ·方法 | 第44-50页 |
| ·菌株的培养 | 第44页 |
| ·DNA的提取 | 第44-45页 |
| ·DNA纯度的检测 | 第45-46页 |
| ·紫外光吸收检测 | 第45页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳检测 | 第45-46页 |
| ·rRNA基因ITS序列的PCR扩增 | 第46-48页 |
| ·扩增反应所用引物 | 第46页 |
| ·扩增反应体系 | 第46-47页 |
| ·扩增反应条件 | 第47页 |
| ·扩增产物检测 | 第47页 |
| ·ITS序列扩增产物的序列测定 | 第47-48页 |
| ·基于ITS序列的系统树的构建 | 第48页 |
| ·Rep-PCR扩增细菌重复片断 | 第48-50页 |
| ·扩增反应所用引物 | 第48页 |
| ·扩增反应体系 | 第48-49页 |
| ·扩增反应条件 | 第49-50页 |
| ·REP序列的扩增 | 第49页 |
| ·BOX序列的扩增 | 第49页 |
| ·ERIC序列的扩增 | 第49-50页 |
| ·Rep-PCR指纹图谱的构建 | 第50页 |
| 2.结果与分析 | 第50-56页 |
| ·菌株的培养 | 第50页 |
| ·DNA纯度的检测 | 第50-51页 |
| ·rRNA基因ITS序列的扩增 | 第51-52页 |
| ·序列测定 | 第52页 |
| ·菌株ITS序列Blastn比对 | 第52页 |
| ·系统树的构建 | 第52-53页 |
| ·Rep—PCR | 第53-56页 |
| ·REP序列扩增图谱 | 第53-54页 |
| ·ERIC序列扩增图谱 | 第54页 |
| ·BOX序列扩增 | 第54-56页 |
| 第四章 小节 | 第56-59页 |
| 1.经典方法与分子生物学方法对供试菌株鉴定结果比较 | 第56页 |
| 2.葡萄球菌的ITS序列分析及多重重复片断扩增图谱 | 第56-58页 |
| ·rRNA基因ITS片段的扩增 | 第57-58页 |
| ·rep-PCR序列扩增 | 第58页 |
| 3 展望 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-64页 |
| 论文发表情况 | 第64-65页 |
| 致谢 | 第65-66页 |
| 附录 | 第66-78页 |
| 原创性声明 | 第78页 |
| 关于学位论文使用授权的声明 | 第78页 |
