| 前言 | 第1-12页 |
| 第一篇 文献综述 | 第12-52页 |
| 第一章 犬瘟热病毒研究进展 | 第12-26页 |
| 1 CDV的生物学性状 | 第12-13页 |
| 2 CDV分子生物学特性 | 第13-22页 |
| 3 CDV致病机理和CD的临床症状 | 第22-24页 |
| 4 我国CD流行现状及其病原生态学概况 | 第24-26页 |
| 第二章 犬瘟热疫苗的研究进展 | 第26-40页 |
| 1 常规疫苗的研究进展 | 第26-29页 |
| 2 新型疫苗的研究进展 | 第29-40页 |
| 第三章 腺病毒载体的研究进展 | 第40-52页 |
| 1 腺病毒的分子生物学特性 | 第40-41页 |
| 2 腺病毒载体的优缺点 | 第41-42页 |
| 3 腺病毒载体的改进 | 第42-46页 |
| 4 重组犬腺病毒载体的研究进展 | 第46-52页 |
| 第二篇 研究内容 | 第52-164页 |
| 第一章 犬瘟热病毒小熊猫株核蛋白和融合蛋白基因克隆及遗传进化分析 | 第52-74页 |
| 1 材料与方法 | 第53-58页 |
| 2 结果 | 第58-70页 |
| ·N蛋白基因的扩增、克隆及重组质粒pMD18-N的鉴定 | 第58-59页 |
| ·F蛋白基因的扩增、克隆及重组质粒pMD18-F的鉴定 | 第59-60页 |
| ·N蛋白基因核苷酸序列及推导的氨基酸序列分析 | 第60-64页 |
| ·F蛋白基因核苷酸序列及推导的氨基酸序列分析 | 第64-68页 |
| ·N蛋白和F蛋白疏水性、抗原表位和表面极性预测分析 | 第68-70页 |
| 3 讨论 | 第70-73页 |
| ·大片段目的基因CDVLP株N蛋白和F蛋白基因的RT-PCR扩增 | 第70-72页 |
| ·CDV LP株N蛋白和F蛋白基因遗传进化分析 | 第72-73页 |
| 4 小结 | 第73-74页 |
| 第二章 犬瘟热病毒基因疫苗表达载体的构建及其在真核细胞中的表达 | 第74-84页 |
| 1 材料与方法 | 第75-78页 |
| 2 结果 | 第78-81页 |
| ·重组真核表达载体pCIN的酶切及PCR鉴定 | 第78-79页 |
| ·重组真核表达载体pCIF的酶切及PCR鉴定 | 第79-80页 |
| ·重组真核表达载体在MDCK细胞中的瞬间表达及检测 | 第80-81页 |
| 3 讨论 | 第81-83页 |
| ·关于目的基因的选择 | 第81-82页 |
| ·关于基因疫苗真核表达载体的选择 | 第82-83页 |
| ·关于基因疫苗表达载体质粒pCIN和pCIF在真核细胞中的表达 | 第83页 |
| 4 小结 | 第83-84页 |
| 第三章 犬瘟热病毒核蛋白重组犬腺病毒的构建与鉴定 | 第84-104页 |
| 1 材料与方法 | 第85-90页 |
| 2 结果 | 第90-100页 |
| ·犬瘟热病毒核蛋白重组犬腺病毒的构建 | 第90-93页 |
| ·犬瘟热病毒核蛋白重组犬腺病毒的鉴定 | 第93-98页 |
| ·犬瘟热病毒核蛋白在重组犬腺病毒中表达的检测 | 第98-99页 |
| ·重组病毒CAV-2-pVAXLPN的遗传稳定性 | 第99-100页 |
| 3 讨论 | 第100-102页 |
| ·腺病毒载体系统的选择 | 第100页 |
| ·穿梭质粒pVAX△E3LPN和重组质粒pCAV-2-pVAXLPN的构建 | 第100-101页 |
| ·重组病毒的鉴定及其表达目的蛋白的检测 | 第101-102页 |
| 4 小结 | 第102-104页 |
| 第四章 基于pVAX1载体表达元件的犬瘟热病毒融合蛋白重组犬腺病毒的构建与鉴定 | 第104-124页 |
| 1 材料与方法 | 第105-111页 |
| 2 结果 | 第111-121页 |
| ·犬瘟热病毒融合蛋白重组犬腺病毒的构建 | 第111-114页 |
| ·犬瘟热病毒融合蛋白重组犬腺病毒的鉴定 | 第114-119页 |
| ·犬瘟热病毒融合蛋白在重组犬腺病毒中表达的检测 | 第119-120页 |
| ·重组病毒CAV-2-pVAXLPF的遗传稳定性 | 第120-121页 |
| 3 讨论 | 第121-123页 |
| ·CDV融合蛋白基因(F基因)作为目的基因的选择 | 第121页 |
| ·CAV-2 E3区的缺失对病毒复制和包装的影响 | 第121-122页 |
| ·重组腺病毒的构建方法 | 第122-123页 |
| 4 小结 | 第123-124页 |
| 第五章 基于pCI载体表达元件的犬瘟热病毒融合蛋白重组犬腺病毒的构建与鉴定 | 第124-148页 |
| 1 材料与方法 | 第125-131页 |
| 2 结果 | 第131-142页 |
| ·犬瘟热病毒融合蛋白重组犬腺病毒的构建 | 第131-134页 |
| ·犬瘟热病毒融合蛋白重组犬腺病毒的鉴定 | 第134-139页 |
| ·重组病毒CAV-2-pCILPF中F蛋白表达的检测 | 第139-140页 |
| ·利用不同载体表达元件构建的重组病毒中F蛋白表达差异的比较 | 第140-141页 |
| ·重组病毒CAV-2-pCILPF的遗传稳定性 | 第141-142页 |
| 3 讨论 | 第142-146页 |
| ·pCI表达载体的选择 | 第142-143页 |
| ·外源基因的表达 | 第143-144页 |
| ·阳离子脂质体介导的重组质粒转染真核细胞技术 | 第144-146页 |
| 4 小结 | 第146-148页 |
| 第六章 犬瘟热病毒基因疫苗与重组犬腺病毒实验免疫研究 | 第148-164页 |
| 1 材料与方法 | 第149-154页 |
| 2 结果 | 第154-159页 |
| ·免疫小鼠抗CDV抗体检测 | 第154-156页 |
| ·免疫小鼠的淋巴细胞转化检测 | 第156页 |
| ·免疫犬抗CDV抗体检测 | 第156-157页 |
| ·免疫犬抗CAV HI抗体检测 | 第157页 |
| ·免疫犬淋巴细胞转化检测 | 第157-158页 |
| ·攻毒保护试验结果 | 第158-159页 |
| 3 讨论 | 第159-162页 |
| ·免疫动物体液免疫和细胞免疫应答 | 第159-160页 |
| ·影响基因疫苗和重组病毒免疫效果的因素 | 第160-161页 |
| ·基因疫苗和重组病毒活载体疫苗的安全性及其应用前景 | 第161-162页 |
| 4 小结 | 第162-164页 |
| 结论 | 第164-166页 |
| 参考文献 | 第166-178页 |
| 中文摘要 | 第178-182页 |
| 英文摘要 | 第182-186页 |
| 致谢 | 第186-188页 |
| 导师简介 | 第188-189页 |
| 作者简介 | 第189页 |
