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香菇交配型因子次级重组体及与交配型因子连锁的分子标记的鉴定

中文摘要第1-12页
ABSTRACT第12-14页
缩略语表第14-16页
第一章 文献综述第16-47页
 1 香菇概述第16-17页
   ·营养经济价值第16页
   ·分类地位第16-17页
   ·资源分布第17页
 2 蕈菌的交配和不亲和性系统第17-19页
   ·蕈菌的交配系统第17-18页
     ·初级同宗结合第17页
     ·次级同宗结合第17-18页
     ·二极性异宗结合第18页
     ·四极性异宗结合第18页
   ·蕈菌的体细胞不亲和性第18-19页
 3 蕈菌交配型基因的研究进展第19-37页
   ·蕈菌交配型基因的定位第20页
   ·四极性蕈菌交配型基因的结构与功能第20-29页
     ·A交配型基因座位第20-25页
     ·B交配型基因座位第25-29页
   ·二极性蕈菌交配型基因的结构与功能第29-32页
   ·蕈菌交配型基因的克隆第32-33页
     ·通过功能互补法克隆交配型基因第32页
     ·通过染色体步移法克隆交配型基因第32页
     ·通过序列相似性克隆交配型基因第32-33页
   ·蕈菌交配型基因的起源第33-34页
   ·交配型基因的进化第34-35页
   ·蕈菌交配型因子的复等位现象第35-37页
 4 分子标记在蕈菌研究中的应用第37-47页
   ·分子标记的种类第37-41页
     ·限制性片段长度多态性(RFLP)第38页
     ·简单重复序列(SSR)第38页
     ·随机扩增多态性DNA(RAPD)第38-39页
     ·代表性差异分析(RDA)第39页
     ·扩增片段长度多态性(AELP)第39-40页
     ·相关序列扩增多态性(SRAP)第40页
     ·靶位区域扩增多态性(TRAP)第40-41页
   ·分子标记在蕈菌研究中的应用第41-47页
     ·不同菌株遗传差异的鉴定第41-42页
     ·遗传多样性和亲缘关系的分析第42-43页
     ·杂交育种中亲本选择和杂交子的鉴定第43-45页
     ·基因定位和克隆及遗传连锁图谱构建第45-47页
第二章 香菇孢子单核体交配型因子的准确鉴定第47-61页
 1 引言第47-48页
 2 材料与方法第48-55页
   ·试验材料第48-50页
     ·供试香菇双核菌株第48-49页
     ·供试培养基第49页
     ·试验所用仪器、设备第49-50页
     ·原生质体制备用试剂第50页
   ·试验方法第50-55页
     ·双核菌株的栽培第50页
     ·孢子印的获得第50页
     ·孢子单核体的制备第50-51页
     ·原生质体单核化方法确定标准测交菌株T_1和T_2第51-52页
     ·标准测交菌株T_3和T_4的确定第52页
     ·单核体交配型的鉴定第52页
     ·OWE-SOJ技术第52-53页
     ·核迁移试验第53-55页
 3 结果与分析第55-59页
   ·原生质体单核体的鉴定及标准测交菌株T_1、T_2的确定第55页
   ·标准测交菌株T_3、T_4的确定及孢子单核体交配型的常规分析第55-56页
   ·四类孢子单核体菌株交配型的准确鉴定第56-59页
     ·OWE-SOJ技术与交配型的准确鉴定第56-58页
     ·核迁移试验与交配型的准确鉴定第58页
     ·交配型鉴定结果第58-59页
 4 讨论第59-60页
   ·关于OWE-SOJ技术第59页
   ·关于核迁移试验第59-60页
   ·标准测交菌株法鉴定交配型第60页
 5 结论第60-61页
第三章 香菇交配型因子次级重组体的鉴定第61-70页
 1 引言第61-62页
 2 材料与方法第62页
   ·供试香菇菌株第62页
   ·不亲和组合与亲和组合比值的x~2检验第62页
   ·次级重组体交配型的鉴定第62页
   ·次级重组体结实性能考察第62页
 3 结果与分析第62-68页
   ·供试菌株交配型鉴定中不亲和与亲和配对的比例第63页
   ·次级重组体的鉴定第63-67页
   ·A、B交配型因子的亚单位组成第67页
   ·结实性能考查第67-68页
 4 讨论第68-69页
   ·交配型因子的次级重组第68页
   ·未来研究方向第68-69页
 5 结论第69-70页
第四章 与香菇交配型因子连锁的分子标记的鉴定第70-94页
 1 引言第70-71页
 2 材料与方法第71-82页
   ·试验材料第71页
   ·试验所用仪器、设备第71-72页
   ·试验所用试剂第72-74页
     ·主要试剂及来源第72-73页
     ·贮存液第73页
     ·DNA提取液第73-74页
     ·大肠杆菌感受态细胞的制备试剂第74页
     ·质粒提取缓冲液第74页
   ·扩增反应的引物第74-76页
     ·RAPD(随机扩增多态性DNA)引物第74-75页
     ·RDA(代表性差异分析)引物第75页
     ·简并引物第75-76页
   ·试验方法第76-82页
     ·香菇基因组DNA的制备第76-77页
     ·BSA(集团分离分析)和RAPD第77-78页
     ·RDA第78-80页
     ·简并引物PCR第80-81页
     ·克隆与测序第81-82页
     ·SCAR标记验证第82页
 3 结果与分析第82-91页
   ·RAPD/BSA扩增及搜寻结果第82-83页
   ·RDA扩增及搜寻结果第83-84页
   ·简并引物PCR获取的与B_2因子相关的特异片段第84-89页
     ·B_2因子片段的获得第84-87页
     ·BLAST分析结果第87-89页
     ·次级重组体的分子证据第89页
   ·简并引物PCR获取的与MIP基因相关的特异片段第89-91页
     ·MIP基因片段的获得第89-90页
     ·BLAST分析结果第90-91页
 4 讨论第91-93页
   ·关于简并引物PCR第92页
   ·关于RAPD方法的局限性第92-93页
   ·关于RDA第93页
 5 结论第93-94页
第五章 香菇B因子片段和MIP基因片段的染色体步移第94-109页
 1 引言第94-96页
 2 材料与方法第96-100页
   ·试验材料第96页
   ·反向PCR第96-97页
     ·引物设计第96页
     ·模板的制备第96-97页
     ·PCR扩增条件第97页
   ·TAIL-PCR第97-100页
     ·引物设计第97-98页
     ·PCR扩增条件第98-100页
   ·克隆与测序第100页
 3 结果与分析第100-107页
   ·对MIP基因片段的步移第100-105页
     ·用TAIL-PCR进行第一次步移第100-101页
     ·用TAIL-PCR进行第二次步移第101-102页
     ·用反向PCR进行第二次步移第102页
     ·对MIP片段步移的综合结果第102-104页
     ·生物信息学方法对MIP基因片段的分析第104-105页
   ·B因子片段的步移第105-107页
     ·步移结果第105-107页
     ·生物信息学方法对B因子片段的分析第107页
 4 讨论第107-108页
   ·关于反向PCR第107页
   ·关于TAIL-PCR第107-108页
   ·未来研究方向第108页
 5 结论第108-109页
本论文主要创新点第109-110页
参考文献(References)第110-124页
致谢第124-125页
在读期间已发表与课题相关的文章第125页

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