中文摘要 | 第1-12页 |
ABSTRACT | 第12-14页 |
缩略语表 | 第14-16页 |
第一章 文献综述 | 第16-47页 |
1 香菇概述 | 第16-17页 |
·营养经济价值 | 第16页 |
·分类地位 | 第16-17页 |
·资源分布 | 第17页 |
2 蕈菌的交配和不亲和性系统 | 第17-19页 |
·蕈菌的交配系统 | 第17-18页 |
·初级同宗结合 | 第17页 |
·次级同宗结合 | 第17-18页 |
·二极性异宗结合 | 第18页 |
·四极性异宗结合 | 第18页 |
·蕈菌的体细胞不亲和性 | 第18-19页 |
3 蕈菌交配型基因的研究进展 | 第19-37页 |
·蕈菌交配型基因的定位 | 第20页 |
·四极性蕈菌交配型基因的结构与功能 | 第20-29页 |
·A交配型基因座位 | 第20-25页 |
·B交配型基因座位 | 第25-29页 |
·二极性蕈菌交配型基因的结构与功能 | 第29-32页 |
·蕈菌交配型基因的克隆 | 第32-33页 |
·通过功能互补法克隆交配型基因 | 第32页 |
·通过染色体步移法克隆交配型基因 | 第32页 |
·通过序列相似性克隆交配型基因 | 第32-33页 |
·蕈菌交配型基因的起源 | 第33-34页 |
·交配型基因的进化 | 第34-35页 |
·蕈菌交配型因子的复等位现象 | 第35-37页 |
4 分子标记在蕈菌研究中的应用 | 第37-47页 |
·分子标记的种类 | 第37-41页 |
·限制性片段长度多态性(RFLP) | 第38页 |
·简单重复序列(SSR) | 第38页 |
·随机扩增多态性DNA(RAPD) | 第38-39页 |
·代表性差异分析(RDA) | 第39页 |
·扩增片段长度多态性(AELP) | 第39-40页 |
·相关序列扩增多态性(SRAP) | 第40页 |
·靶位区域扩增多态性(TRAP) | 第40-41页 |
·分子标记在蕈菌研究中的应用 | 第41-47页 |
·不同菌株遗传差异的鉴定 | 第41-42页 |
·遗传多样性和亲缘关系的分析 | 第42-43页 |
·杂交育种中亲本选择和杂交子的鉴定 | 第43-45页 |
·基因定位和克隆及遗传连锁图谱构建 | 第45-47页 |
第二章 香菇孢子单核体交配型因子的准确鉴定 | 第47-61页 |
1 引言 | 第47-48页 |
2 材料与方法 | 第48-55页 |
·试验材料 | 第48-50页 |
·供试香菇双核菌株 | 第48-49页 |
·供试培养基 | 第49页 |
·试验所用仪器、设备 | 第49-50页 |
·原生质体制备用试剂 | 第50页 |
·试验方法 | 第50-55页 |
·双核菌株的栽培 | 第50页 |
·孢子印的获得 | 第50页 |
·孢子单核体的制备 | 第50-51页 |
·原生质体单核化方法确定标准测交菌株T_1和T_2 | 第51-52页 |
·标准测交菌株T_3和T_4的确定 | 第52页 |
·单核体交配型的鉴定 | 第52页 |
·OWE-SOJ技术 | 第52-53页 |
·核迁移试验 | 第53-55页 |
3 结果与分析 | 第55-59页 |
·原生质体单核体的鉴定及标准测交菌株T_1、T_2的确定 | 第55页 |
·标准测交菌株T_3、T_4的确定及孢子单核体交配型的常规分析 | 第55-56页 |
·四类孢子单核体菌株交配型的准确鉴定 | 第56-59页 |
·OWE-SOJ技术与交配型的准确鉴定 | 第56-58页 |
·核迁移试验与交配型的准确鉴定 | 第58页 |
·交配型鉴定结果 | 第58-59页 |
4 讨论 | 第59-60页 |
·关于OWE-SOJ技术 | 第59页 |
·关于核迁移试验 | 第59-60页 |
·标准测交菌株法鉴定交配型 | 第60页 |
5 结论 | 第60-61页 |
第三章 香菇交配型因子次级重组体的鉴定 | 第61-70页 |
1 引言 | 第61-62页 |
2 材料与方法 | 第62页 |
·供试香菇菌株 | 第62页 |
·不亲和组合与亲和组合比值的x~2检验 | 第62页 |
·次级重组体交配型的鉴定 | 第62页 |
·次级重组体结实性能考察 | 第62页 |
3 结果与分析 | 第62-68页 |
·供试菌株交配型鉴定中不亲和与亲和配对的比例 | 第63页 |
·次级重组体的鉴定 | 第63-67页 |
·A、B交配型因子的亚单位组成 | 第67页 |
·结实性能考查 | 第67-68页 |
4 讨论 | 第68-69页 |
·交配型因子的次级重组 | 第68页 |
·未来研究方向 | 第68-69页 |
5 结论 | 第69-70页 |
第四章 与香菇交配型因子连锁的分子标记的鉴定 | 第70-94页 |
1 引言 | 第70-71页 |
2 材料与方法 | 第71-82页 |
·试验材料 | 第71页 |
·试验所用仪器、设备 | 第71-72页 |
·试验所用试剂 | 第72-74页 |
·主要试剂及来源 | 第72-73页 |
·贮存液 | 第73页 |
·DNA提取液 | 第73-74页 |
·大肠杆菌感受态细胞的制备试剂 | 第74页 |
·质粒提取缓冲液 | 第74页 |
·扩增反应的引物 | 第74-76页 |
·RAPD(随机扩增多态性DNA)引物 | 第74-75页 |
·RDA(代表性差异分析)引物 | 第75页 |
·简并引物 | 第75-76页 |
·试验方法 | 第76-82页 |
·香菇基因组DNA的制备 | 第76-77页 |
·BSA(集团分离分析)和RAPD | 第77-78页 |
·RDA | 第78-80页 |
·简并引物PCR | 第80-81页 |
·克隆与测序 | 第81-82页 |
·SCAR标记验证 | 第82页 |
3 结果与分析 | 第82-91页 |
·RAPD/BSA扩增及搜寻结果 | 第82-83页 |
·RDA扩增及搜寻结果 | 第83-84页 |
·简并引物PCR获取的与B_2因子相关的特异片段 | 第84-89页 |
·B_2因子片段的获得 | 第84-87页 |
·BLAST分析结果 | 第87-89页 |
·次级重组体的分子证据 | 第89页 |
·简并引物PCR获取的与MIP基因相关的特异片段 | 第89-91页 |
·MIP基因片段的获得 | 第89-90页 |
·BLAST分析结果 | 第90-91页 |
4 讨论 | 第91-93页 |
·关于简并引物PCR | 第92页 |
·关于RAPD方法的局限性 | 第92-93页 |
·关于RDA | 第93页 |
5 结论 | 第93-94页 |
第五章 香菇B因子片段和MIP基因片段的染色体步移 | 第94-109页 |
1 引言 | 第94-96页 |
2 材料与方法 | 第96-100页 |
·试验材料 | 第96页 |
·反向PCR | 第96-97页 |
·引物设计 | 第96页 |
·模板的制备 | 第96-97页 |
·PCR扩增条件 | 第97页 |
·TAIL-PCR | 第97-100页 |
·引物设计 | 第97-98页 |
·PCR扩增条件 | 第98-100页 |
·克隆与测序 | 第100页 |
3 结果与分析 | 第100-107页 |
·对MIP基因片段的步移 | 第100-105页 |
·用TAIL-PCR进行第一次步移 | 第100-101页 |
·用TAIL-PCR进行第二次步移 | 第101-102页 |
·用反向PCR进行第二次步移 | 第102页 |
·对MIP片段步移的综合结果 | 第102-104页 |
·生物信息学方法对MIP基因片段的分析 | 第104-105页 |
·B因子片段的步移 | 第105-107页 |
·步移结果 | 第105-107页 |
·生物信息学方法对B因子片段的分析 | 第107页 |
4 讨论 | 第107-108页 |
·关于反向PCR | 第107页 |
·关于TAIL-PCR | 第107-108页 |
·未来研究方向 | 第108页 |
5 结论 | 第108-109页 |
本论文主要创新点 | 第109-110页 |
参考文献(References) | 第110-124页 |
致谢 | 第124-125页 |
在读期间已发表与课题相关的文章 | 第125页 |