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牛雄性生殖干细胞分离培养特性及移植研究

摘要第1-7页
Abstract第7-13页
文献综述第13-56页
 第一章 哺乳动物雄性生殖干细胞的来源第13-19页
   ·哺乳动物生殖细胞分化图谱第13-14页
   ·PGCs 的基本特性及其雄性化机理第14-15页
   ·哺乳动物雄性化机理第15-19页
     ·哺乳动物雄性化器官发生机理(图1-3)第15-16页
     ·哺乳动物PGCs 雄性化机理第16-19页
 第二章 哺乳动物雄性生殖干细胞的生物学特征第19-29页
   ·mGSC 的生物学特性第19-25页
     ·mGSCs 数量第19-20页
     ·精原干细胞的自我更新和分化特性第20-24页
     ·mGSCs 微环境第24页
     ·mGSC 不确定的细胞周期第24-25页
     ·mGSCs 的迁移能力第25页
   ·雄性生殖干细胞体内富集第25-26页
   ·mGSC 形态学和分子标志及免疫学特性第26-29页
     ·mGSC 的形态学第26-27页
     ·mGSC 的分子标志第27-29页
 第三章 哺乳动物雄性生殖干细胞的分离纯化第29-34页
   ·哺乳动物睾丸的形态结构特性第29页
   ·雄性生殖干细胞的制备第29-34页
     ·睾丸组织细胞的解离第29-31页
     ·mGSCs 的分离纯化第31-34页
 第四章 哺乳动物雄性生殖干细胞体外培养的影响因素第34-44页
   ·培养基及血清第35-36页
     ·基础培养液的确定第35页
     ·血清第35-36页
   ·其他细胞的作用第36-37页
     ·饲养层细胞的利用第36页
     ·支持细胞(sertoli cells, SCs) 的作用第36-37页
   ·细胞因子第37-41页
     ·干细胞因子(stem cell factor, SCF)第37-39页
     ·白血病抑制因子(LIF)第39-40页
     ·胶质细胞源神经营养因子(glial cell line-derived neurotrophic factor ,GDNF)第40-41页
     ·表皮生长因子(epidermal growth factor,EGF)第41页
   ·添加剂、激素和维生素的应用第41-43页
     ·添加剂第41页
     ·激素及维生素第41-43页
   ·培养温度的确定第43-44页
 第五章 哺乳动物生殖细胞减数分裂及移植研究进展第44-56页
   ·雄性生殖细胞体外减数分裂研究进展第44-52页
     ·体外睾丸细胞株的建立第44-45页
     ·曲细精管培养法第45-47页
     ·胚胎干细胞减数分裂研究第47-48页
     ·精原干细胞的减数分裂研究第48-52页
   ·体内移植m GSCs 诱导精子发生过程恢复研究进展第52-56页
     ·mGSC 同种间移植第52页
     ·mGSC 异种间移植第52-54页
     ·mGSCs 移植的方法第54-56页
试验研究第56-120页
 前言第56-57页
 第六章 牛生殖细胞的生长发育及新生牛MGSC 的分离纯化第57-74页
   ·材料与方法第57-62页
     ·材料第57-58页
     ·方法第58-62页
   ·结果与分析第62-67页
     ·不同发育阶段牛睾丸组织结构比较第62-63页
     ·不同消化方式处理新生牛睾丸曲细精管细胞分散程度第63-64页
     ·新生牛mGSCs 贴壁速率差法分离纯化效果第64-65页
     ·新生牛mGSCs Percoll 法分离纯化效果第65-66页
     ·新生牛mGSCs 形态特征第66-67页
   ·讨论第67-69页
     ·睾丸组织的细胞类型和酶消化法的最佳方案第67页
     ·纯化新生牛mGSCs 不同方法第67-68页
     ·分离纯化的新生牛mGSCs 形态特征第68-69页
   ·小结第69-74页
 第七章 新生牛MGSCS 的体外培养行为第74-100页
   ·材料方法第74-79页
     ·材料第74页
     ·方法第74-79页
   ·结果第79-87页
     ·MEF 和BSCs 饲养层细胞增殖和存活规律第79-81页
     ·mGSCs 生长规律第81-87页
   ·讨论第87-89页
     ·支持细胞(SCs)体外培养第87页
     ·培养系统对新生牛mGSCs 生长增殖分化的影响第87-88页
     ·无饲养层系统中mGSCs 的生长行为第88-89页
     ·新生牛mGSCs 两类集落的形成及特性第89页
   ·小结第89-100页
 第八章 体外诱导新生牛MGSCS 向单倍体细胞分化第100-112页
   ·材料与方法第100-102页
     ·材料第100-101页
     ·方法第101-102页
   ·结果第102-104页
     ·不同RA 浓度诱导新生牛mGSCs 形成精子样细胞的效率第102页
     ·RA 诱导新生牛mGSCs 形成精子样细胞第102-103页
     ·RA 和OA 联合诱导新生牛mGSCs 的效果第103页
     ·诱导产生的精子样细胞的形态第103-104页
     ·流式细胞仪分拣精子样细胞第104页
     ·牛卵母细胞ICSI 试验第104页
   ·讨论第104-106页
     ·生殖细胞体外减数分裂的实现第104-105页
     ·体外诱导形成精子样细胞的检测第105-106页
   ·小结第106-112页
 第九章 无内源性生殖细胞模型兔制作与新生牛MGSCS 的移植第112-120页
   ·材料与方法第112-113页
     ·材料第112页
     ·方法第112-113页
   ·结果第113-115页
     ·无内源性生殖细胞模型兔构建第113-115页
     ·新生牛mGSCs 向模型兔睾丸体内移植及观察第115页
   ·讨论第115-117页
     ·皮下注射白消安对受体兔的影响第115-116页
     ·mGSCs 异体移植后的免疫排斥分析第116页
     ·mGSCs 移植方法与效果第116-117页
   ·小结第117-120页
结论第120-122页
本研究的创新点第122页
进一步研究的内容第122-123页
参考文献第123-139页
致谢第139-140页
作者简介第140页

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