摘要 | 第1-6页 |
ABSTRACT | 第6-12页 |
引言 | 第12-13页 |
第一章 文献综述 | 第13-23页 |
1 遗传标记及其应用 | 第13-16页 |
·遗传标记的概念 | 第13页 |
·遗传标记的分类 | 第13-14页 |
·目前常用的分子标记 | 第14-16页 |
2 微卫星DNA 标记及其应用进展 | 第16-20页 |
·微卫星DNA 的概念、分类 | 第16-17页 |
·微卫星DNA 的形成机理和功能 | 第17页 |
·微卫星DNA 技术的基本原理 | 第17-18页 |
·微卫星DNA 位点获得的方法 | 第18-19页 |
·微卫星DNA 标记在水产动物中的应用 | 第19-20页 |
3 水产动物性别鉴别进展 | 第20-23页 |
·水产动物性别决定机制 | 第20-21页 |
·水产动物性别鉴别方法 | 第21-22页 |
·水产动物性别相关分子标记筛选研究进展 | 第22-23页 |
第二章 仿刺参基因组微卫星DNA 分子标记的筛选 | 第23-34页 |
1 材料 | 第23-24页 |
·样本来源与DNA 提取 | 第23页 |
·试剂配制 | 第23-24页 |
·主要软件 | 第24页 |
2 实验方法 | 第24-29页 |
·小片段基因组文库的构建 | 第24-26页 |
·微卫星DNA 的杂交筛选 | 第26-27页 |
·连接与转化 | 第27-28页 |
·阳性克隆的培养 | 第28页 |
·含微卫星DNA 序列的重组子的筛选 | 第28-29页 |
·测序与分析 | 第29页 |
3 结果 | 第29-34页 |
·基因组DNA 提取结果 | 第29-30页 |
·基因组DNA 的酶切结果 | 第30页 |
·连接产物的PCR 扩增 | 第30页 |
·基因组微卫星DNA 杂交筛选后的PCR 扩增结果 | 第30-34页 |
第三章 不同自然地理群体海参遗传多样性分析 | 第34-48页 |
1 材料 | 第34-36页 |
·样品采集及DNA 的提取 | 第34页 |
·主要试剂的配制 | 第34-35页 |
·主要软件 | 第35-36页 |
2 实验方法 | 第36-39页 |
·微卫星DNA 引物的设计 | 第36页 |
·微卫星DNA 引物的溶解 | 第36-37页 |
·微卫星DNA 引物扩增条件的摸索 | 第37页 |
·多态性检测及不同地理群体仿刺参的遗传多样性分析 | 第37-39页 |
·数据统计及分析 | 第39页 |
3 结果 | 第39-48页 |
·微卫星DNA 引物设计及扩增条件摸索结果 | 第39-41页 |
·多态性检测及不同地理群体海参的遗传多样性分析结果 | 第41-42页 |
·不同地理群体间的遗传结构分析 | 第42-48页 |
第四章 仿刺参抗病相关微卫星DNA 标记筛选 | 第48-56页 |
1 材料 | 第48页 |
·样品采集及筛选 | 第48页 |
·主要试剂 | 第48页 |
·主要软件 | 第48页 |
2 方法 | 第48-49页 |
·基因组DNA 提取 | 第48页 |
·PCR 反应体系 | 第48页 |
·PAGE 电泳 | 第48页 |
·数据统计与分析 | 第48-49页 |
3 结果 | 第49-54页 |
·PCR 扩增以及PAGE 电泳结果 | 第49页 |
·两个群体的特异性位点 | 第49-52页 |
·多态性检测以及遗传多样性分析 | 第52-54页 |
4 讨论 | 第54-56页 |
第五章 仿刺参性别差异的初步研究 | 第56-78页 |
第一节 仿刺参性别差异的组织学分析 | 第56-63页 |
1 材料 | 第56-57页 |
·样本来源 | 第56页 |
·试剂配制 | 第56-57页 |
2 实验方法 | 第57-59页 |
·固定 | 第57页 |
·脱水 | 第57页 |
·透明 | 第57页 |
·浸蜡 | 第57-58页 |
·包埋 | 第58页 |
·切片 | 第58页 |
·展片 | 第58页 |
·烤片 | 第58-59页 |
·HE 染色 | 第59页 |
·封片 | 第59页 |
3 实验结果 | 第59-62页 |
·刺参体壁肌肉 | 第59-60页 |
·雄参生殖孔 | 第60-61页 |
·雌参生殖孔 | 第61-62页 |
4 讨论 | 第62-63页 |
第二节 仿刺参性别相关分子标记的筛选 | 第63-78页 |
1 材料 | 第63-64页 |
·样本来源 | 第63页 |
·所用接头和引物 | 第63-64页 |
·主要试剂的配制 | 第64页 |
2 实验方法 | 第64-66页 |
·基因组DNA 提取 | 第64页 |
·基因组DNA 的酶切 | 第64-65页 |
·酶切产物与接头的连接 | 第65页 |
·预扩增反应 | 第65页 |
·选择性扩增反应 | 第65-66页 |
·PAGE 电泳 | 第66页 |
·AFLP 数据统计与分析 | 第66页 |
3 结果 | 第66-76页 |
·雌雄仿刺参基因组DNA 提取结果 | 第66-67页 |
·仿刺参基因组DNA 酶切结果 | 第67页 |
·预扩增结果 | 第67-68页 |
·选择性扩增结果 | 第68页 |
·AFLP 结果多态性分析及银染结果 | 第68-70页 |
·雌雄个体差异 | 第70-76页 |
4. 讨论 | 第76-78页 |
小结 | 第78-79页 |
参考文献 | 第79-84页 |
致谢 | 第84页 |