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仿刺参微卫星DNA标记的筛选与应用及性别差异研究初探

摘要第1-6页
ABSTRACT第6-12页
引言第12-13页
第一章 文献综述第13-23页
 1 遗传标记及其应用第13-16页
   ·遗传标记的概念第13页
   ·遗传标记的分类第13-14页
   ·目前常用的分子标记第14-16页
 2 微卫星DNA 标记及其应用进展第16-20页
   ·微卫星DNA 的概念、分类第16-17页
   ·微卫星DNA 的形成机理和功能第17页
   ·微卫星DNA 技术的基本原理第17-18页
   ·微卫星DNA 位点获得的方法第18-19页
   ·微卫星DNA 标记在水产动物中的应用第19-20页
 3 水产动物性别鉴别进展第20-23页
   ·水产动物性别决定机制第20-21页
   ·水产动物性别鉴别方法第21-22页
   ·水产动物性别相关分子标记筛选研究进展第22-23页
第二章 仿刺参基因组微卫星DNA 分子标记的筛选第23-34页
 1 材料第23-24页
   ·样本来源与DNA 提取第23页
   ·试剂配制第23-24页
   ·主要软件第24页
 2 实验方法第24-29页
   ·小片段基因组文库的构建第24-26页
   ·微卫星DNA 的杂交筛选第26-27页
   ·连接与转化第27-28页
   ·阳性克隆的培养第28页
   ·含微卫星DNA 序列的重组子的筛选第28-29页
   ·测序与分析第29页
 3 结果第29-34页
   ·基因组DNA 提取结果第29-30页
   ·基因组DNA 的酶切结果第30页
   ·连接产物的PCR 扩增第30页
   ·基因组微卫星DNA 杂交筛选后的PCR 扩增结果第30-34页
第三章 不同自然地理群体海参遗传多样性分析第34-48页
 1 材料第34-36页
   ·样品采集及DNA 的提取第34页
   ·主要试剂的配制第34-35页
   ·主要软件第35-36页
 2 实验方法第36-39页
   ·微卫星DNA 引物的设计第36页
   ·微卫星DNA 引物的溶解第36-37页
   ·微卫星DNA 引物扩增条件的摸索第37页
   ·多态性检测及不同地理群体仿刺参的遗传多样性分析第37-39页
   ·数据统计及分析第39页
 3 结果第39-48页
   ·微卫星DNA 引物设计及扩增条件摸索结果第39-41页
   ·多态性检测及不同地理群体海参的遗传多样性分析结果第41-42页
   ·不同地理群体间的遗传结构分析第42-48页
第四章 仿刺参抗病相关微卫星DNA 标记筛选第48-56页
 1 材料第48页
   ·样品采集及筛选第48页
   ·主要试剂第48页
   ·主要软件第48页
 2 方法第48-49页
   ·基因组DNA 提取第48页
   ·PCR 反应体系第48页
   ·PAGE 电泳第48页
   ·数据统计与分析第48-49页
 3 结果第49-54页
   ·PCR 扩增以及PAGE 电泳结果第49页
   ·两个群体的特异性位点第49-52页
   ·多态性检测以及遗传多样性分析第52-54页
 4 讨论第54-56页
第五章 仿刺参性别差异的初步研究第56-78页
 第一节 仿刺参性别差异的组织学分析第56-63页
  1 材料第56-57页
   ·样本来源第56页
   ·试剂配制第56-57页
  2 实验方法第57-59页
   ·固定第57页
   ·脱水第57页
   ·透明第57页
   ·浸蜡第57-58页
   ·包埋第58页
   ·切片第58页
   ·展片第58页
   ·烤片第58-59页
   ·HE 染色第59页
   ·封片第59页
  3 实验结果第59-62页
   ·刺参体壁肌肉第59-60页
   ·雄参生殖孔第60-61页
   ·雌参生殖孔第61-62页
  4 讨论第62-63页
 第二节 仿刺参性别相关分子标记的筛选第63-78页
  1 材料第63-64页
   ·样本来源第63页
   ·所用接头和引物第63-64页
   ·主要试剂的配制第64页
  2 实验方法第64-66页
   ·基因组DNA 提取第64页
   ·基因组DNA 的酶切第64-65页
   ·酶切产物与接头的连接第65页
   ·预扩增反应第65页
   ·选择性扩增反应第65-66页
   ·PAGE 电泳第66页
   ·AFLP 数据统计与分析第66页
  3 结果第66-76页
   ·雌雄仿刺参基因组DNA 提取结果第66-67页
   ·仿刺参基因组DNA 酶切结果第67页
   ·预扩增结果第67-68页
   ·选择性扩增结果第68页
   ·AFLP 结果多态性分析及银染结果第68-70页
   ·雌雄个体差异第70-76页
  4. 讨论第76-78页
小结第78-79页
参考文献第79-84页
致谢第84页

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