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新型酶传感器的研究及其在环境毒物分析中的应用

摘要第1-15页
Abstract第15-19页
第1章 绪言第19-37页
 1.1 酶传感器第20-23页
  1.1.1 电化学酶传感器第20-23页
   1.1.1.1 基于人工合成电子媒介体的酶传感器第21-23页
   1.1.1.2 第三代酶传感器第23页
  1.1.2 光化学酶传感器第23页
 1.2 酶传感器制作中的生物分子固定化新技术第23-27页
  1.2.1 纳米技术第24-25页
  1.2.2 分子自组装技术第25页
  1.2.3 树枝状化合物的放大技术第25页
  1.2.4 溶胶-凝胶技术第25-26页
  1.2.5 酶的定向取向技术第26页
  1.2.6 聚电解质吸附组装技术第26页
  1.2.7 碳纳米管技术第26页
  1.2.8 提高酶传感器综合性能的其他技术第26-27页
 1.3 酶传感器用于环境毒物分析第27-32页
  1.3.1 酶抑制法的理论基础第27-29页
  1.3.2 研究进展第29-32页
   1.3.2.1 基于胆碱酯酶的传感器第29-30页
   1.3.2.2 基于酪氨酸酶的传感器第30-31页
   1.3.2.3 其他酶系统第31-32页
 1.4 DNA电化学传感器第32-35页
  1.4.1 DNA电化学传感器的原理第33-34页
  1.4.2 DNA电化学传感器的分类第34页
  1.4.3 DNA电化学传感器的应用第34-35页
 1.5 本研究工作的构思第35-37页
第2章 基于壳聚糖/纳米ZnO复合膜的安培型过氧化氢传感器第37-48页
 2.1 引言第37-38页
 2.2 实验部分第38-39页
  2.2.1 实验试剂与仪器第38页
  2.2.2 壳聚糖/ZnO溶液的制备第38页
  2.2.3 H_O_2传感器的制备第38-39页
   2.2.3.1 GCE/ZnO/CHIT/HRP电极的制备第38-39页
   2.2.3.2 GCE/CHIT/GLU/HRP电极的制备第39页
 2.3 结果与讨论第39-47页
  2.3.1 ZnO/CHIT与其包埋的HRP的相互作用第39页
  2.3.2 纳米ZnO/CHIT复合膜的表面形态第39-40页
  2.3.3 循环伏安行为第40-41页
  2.3.4 酶电极制备条件的优化第41-42页
  2.3.5 测量条件的优化第42-44页
   2.3.5.1 电子媒介的量的影响第42页
   2.3.5.2 电位的影响第42页
   2.3.5.3 pH的影响第42-44页
  2.3.6 电极性能第44-45页
   2.3.6.1 电极的响应性能第44-45页
   2.3.6.2 HRP酶电极的重复性和重现性第45页
   2.3.6.3 HRP酶电极的稳定性第45页
  2.3.7 固定酶的活性第45-46页
  2.3.8 应用第46-47页
 2.4 小结第47-48页
第3章 基于壳聚糖/改性纳米ZrO_2复合膜的安培型葡萄糖生物传感器第48-60页
 3.1 引言第48-49页
 3.2 实验部分第49-50页
  3.2.1 仪器与试剂第49页
  3.2.2 纳米ZrO_2的改性处理第49-50页
  3.2.3 壳聚糖/改性ZrO_2溶液的制备第50页
  3.2.4 葡萄糖生物传感器的制备第50页
   3.2.4.1 Pt/ZrO_2/CHIT/GO_X/Nafion电极的制备第50页
   3.2.4.2 Pt/CHIT/GLU/GO_x电极的制备第50页
 3.3 结果与讨论第50-59页
  3.3.1 改性ZrO_2/CHIT膜与其包埋酶的红外光谱(FTIR)分析第50-51页
  3.3.2 改性纳米ZrO_2/CHIT复合膜的表面形态第51页
  3.3.3 循环伏安特性第51-52页
  3.3.4 酶电极制备条件的优化第52-53页
  3.3.5 测量条件的优化第53-54页
   3.3.5.1 电位的影响第53-54页
   3.3.5.2 pH的影响第54页
  3.3.6 电极的响应性能第54-56页
   3.3.6.1 Pt/ZrO_2/CHIT/GO_X电极的响应第54-56页
   3.3.6.2 重复性和重现性第56页
   3.3.6.3 电极的稳定性第56页
  3.3.7 固定酶的活性第56-57页
  3.3.8 干扰第57-58页
  3.3.9 实际样品的测定第58-59页
 3.4 小结第59-60页
第4章 基于伴刀豆球蛋白-糖蛋白特异识别作用的脲酶生物传感器第60-68页
 4.1 引言第60页
 4.2 实验部分第60-62页
  4.2.1 仪器与试剂第60-61页
  4.2.2 PVC膜pH电极的制备及使用第61页
  4.2.3 脲酶电极的制备第61页
  4.2.4 实验方法第61-62页
 4.3 结果与讨论第62-67页
  4.3.1 PVC膜pH电极的响应特性第62页
  4.3.2 Ca~(2+)和Mn~(2+)对伴刀豆球蛋白的活化第62-64页
  4.3.3 组装膜层数的影响第64页
  4.3.4 与戊二醛交联固定酶法的比较第64页
  4.3.5 电极的响应性能第64-67页
  4.3.6 重现性及寿命第67页
  4.3.7 回收率实验第67页
 4.4 小结第67-68页
第5章 基于纳米金直接催化的第三代辣根过氧化物酶生物传感器第68-77页
 5.1 引言第68页
 5.2 实验部分第68-70页
  5.2.1 仪器与试剂第68-69页
  5.2.2 纳米金及金种子的合成的制备第69页
  5.2.3 纳米金吸附辣根过氧化物酶第69页
  5.2.4 HRP生物传感器的制备第69-70页
  5.2.5 测量方法第70页
  5.2.6 样品的测定第70页
 5.3 结果与讨论第70-76页
  5.3.1 HRP的直接电化学第70-71页
  5.3.2 纳米金对酶传感器响应性能的影响第71-72页
  5.3.3 Ca~(2+)和Mn~(2+)对伴刀豆球蛋白的活化第72页
  5.3.4 循环伏安行为第72页
  5.3.5 实验条件的优化第72-75页
   5.3.5.1 纳米金尺寸的影响第72-73页
   5.3.5.2 组装膜层数的影响第73-74页
   5.3.5.3 工作电位和pH对传感器响应的影响第74-75页
  5.3.6 传感器的响应性能第75页
  5.3.7 重现性及寿命第75页
  5.3.8 样品分析第75-76页
 5.4 小结第76-77页
第6章 抑制型胆碱氧化酶电极对尼古丁的测定第77-89页
 6.1 引言第77-78页
 6.2 实验部分第78-79页
  6.2.1 仪器与试剂第78页
  6.2.2 碳糊电极的制备第78页
  6.2.3 胆碱氧化酶电极的制备第78页
  6.2.4 测量方法第78-79页
   6.2.4.1 胆碱的测定第78-79页
   6.2.4.2 抑制剂的测定第79页
  6.2.5 样品的预处理第79页
 6.3 结果与讨论第79-88页
  6.3.1 循环伏安行为第79-81页
  6.3.2 实验条件的优化第81-83页
   6.3.2.1 电子媒介的用量影响第81页
   6.3.2.2 工作电位对电极响应电流的影响第81页
   6.3.2.3 pH值对胆碱测定的影响第81-83页
   6.3.2.4 胆碱浓度对响应电流的影响第83页
  6.3.3 电极的响应性能第83-87页
   6.3.3.1 电极对胆碱的响应第83-84页
   6.3.3.2 电极对尼古丁的响应性能第84-87页
  6.3.4 重现性、重复性及寿命第87页
  6.3.5 干扰第87页
  6.3.6 烟草样品分析第87-88页
 6.4 小结第88-89页
第7章 抑制型辣根过氧化物酶生物传感器用于硫化物的测定第89-101页
 7.1 引言第89-90页
 7.2 实验部分第90-91页
  7.2.1 试剂和仪器第90页
  7.2.2 金电极表面的预处理和半胱胺单层膜的修饰第90页
  7.2.3 酶电极的组装第90页
  7.2.4 对底物H_2O_2的循环伏安(CV)和计时电流的测定第90-91页
  7.2.5 酶抑制剂的测定步骤第91页
  7.2.6 泉水样品的检测第91页
 7.3 结果与讨论第91-100页
  7.3.1 原理第91-92页
  7.3.2 循环伏安行为第92-93页
  7.3.3 实验条件的优化第93-95页
   7.3.3.1 电子媒介体的量第93页
   7.3.3.2 工作电位的影响第93-95页
   7.3.3.3 H_2O_2的浓度对硫化物测定的影响第95页
   7.3.3.4 pH值的影响第95页
  7.3.4 电极的响应性能第95-100页
   7.3.4.1 HRP-SAM-修饰电极对H_2O_2的响应第95-97页
   7.3.4.2 HRP修饰电极对硫化物的测定第97-98页
   7.3.4.3 选择性第98-100页
   7.3.4.4 重现性和寿命第100页
  7.3.5 应用第100页
 7.4 小结第100-101页
第8章 乙酰胆碱酯酶传感器用于蔬菜样品中有机磷农药残留量的测定第101-116页
 8.1 引言第101-103页
 8.2 实验部分第103-105页
  8.2.1 仪器与试剂第103页
  8.2.2 改性纳米ZrO_2/CHIT溶液的制备第103页
  8.2.3 乙酰胆碱酯酶电极的制备第103-104页
  8.2.4 测定方法第104-105页
   8.2.4.1 巯基乙酰胆碱(ATCh)的测定第104页
   8.2.4.2 抑制剂有机磷农药的测定第104页
   8.2.4.3 蔬菜样品的处理及测定第104-105页
 8.3 结果与讨论第105-115页
  8.3.1 测定原理第105-107页
   8.3.1.1 AChE催化巯基乙酰胆碱水解的机理第105-107页
   8.3.1.2 有机磷化合物对乙酰胆碱酯酶的不可逆抑制第107页
  8.3.2 循环伏安行为第107-109页
  8.3.3 实验条件的优化第109-110页
   8.3.3.1 工作电位对电极响应电流的影响第109页
   8.3.3.2 pH值对巯基乙酰胆碱测定的影响第109-110页
   8.3.3.3 底物(ATCh)浓度对有机磷农药测定的影响第110页
  8.3.4 乙酰胆碱酯酶电极的响应性能第110-112页
   8.3.4.1 电极对巯基乙酰胆碱的响应第110-111页
   8.3.4.2 电极对抑制剂有机磷农药的响应第111-112页
  8.3.5 解磷定对乙酰胆碱酯酶活性的恢复第112-113页
  8.3.6 消除抗坏血酸对测定的影响第113-114页
  8.3.7 样品分析第114-115页
  8.3.8 重现性及寿命第115页
 8.4 小结第115-116页
第九章 基于自组装纳米金的可更新尿素生物传感器对汞离子抑制剂的测定第116-127页
 9.1 引言第116-117页
 9.2 实验部分第117-119页
  9.2.1 仪器与试剂第117页
  9.2.2 PVC膜pH电极的制备及使用第117页
  9.2.3 纳米金的制备第117-118页
  9.2.4 基于纳米金自组装的脲酶的固定第118页
  9.2.5 基于共价键和的脲酶的固定第118页
  9.2.6 分析程序第118-119页
   9.2.6.1 pH值的测量第118-119页
   9.2.6.2 脲酶底物的测量第119页
   9.2.6.3 抑制研究程序第119页
 9.3 结果与讨论第119-126页
  9.3.1 纳米金的形态第119-120页
  9.3.2 纳米金尺寸对尿素传感器响应的影响第120-121页
  9.3.3 不同固定化方法的比较第121页
  9.3.4 脲酶修饰电极的响应特性第121-124页
   9.3.4.1 脲酶修饰电极的尿素响应校正曲线第121-123页
   9.3.4.2 脲酶修饰电极测定汞的校正曲线第123-124页
  9.3.5 传感器的再生第124-125页
  9.3.6 重现性和寿命第125页
  9.3.7 干扰第125页
  9.3.8 应用第125-126页
 9.4 小结第126-127页
第10章 基于辣根过氧化物酶标记的结肠癌DNA传感器的研究第127-136页
 10.1 引言第127-128页
 10.2 实验部分第128-130页
  10.2.1 仪器与试剂第128页
  10.2.2 用HRP标记DNA检测探针第128-129页
  10.2.3 DNA捕获探针在金电极上的固定第129页
  10.2.4 制备DNA传感器用于测定特定序列的目标DNA第129-130页
  10.2.5 电化学检测10.3结果与讨论第130页
 10.3 结果与讨论第130-135页
  10.3.1 电化学测定原理第130-131页
  10.3.2 实验参数的优化第131-134页
   10.3.2.1 探针自组装时间第131-132页
   10.3.2.2 杂交培育时间第132页
   10.3.2.3 杂交温度第132-133页
   10.3.2.4 反应溶液pH值的影响第133-134页
  10.3.3 校正曲线第134页
  10.3.4 电极的选择性第134-135页
  10.3.5 电极的再生第135页
  10.3.6 电极的重现性第135页
 10.4 小结第135-136页
结论第136-138页
参考文献第138-159页
致谢第159-160页
附录A (攻读学位期间所发表的学术论文目录)第160-162页

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