| 中文摘要 | 第1-7页 |
| 英文摘要 | 第7-9页 |
| 引言 | 第9-27页 |
| 1.苏云金芽孢杆菌概述 | 第9页 |
| 2.苏云金芽孢杆菌毒素 | 第9-10页 |
| 3.苏云金芽孢杆菌ICPs基因 | 第10-16页 |
| ·ICPs基因的存在模式 | 第10-11页 |
| ·ICPs基因的命名与分类 | 第11-12页 |
| ·cry基因的表达调空机制 | 第12-16页 |
| 4.苏云金芽孢杆菌杀虫晶体蛋白的作用机理 | 第16-19页 |
| ·晶体蛋白的结构 | 第16-17页 |
| ·晶体蛋白的作用机理和模型 | 第17-19页 |
| 5.苏云金芽孢杆菌的研究应用现状 | 第19-24页 |
| ·抗性管理研究 | 第20页 |
| ·定点突变研究 | 第20-21页 |
| ·利用转座子构建重组质粒和重组菌株研究 | 第21-22页 |
| ·转cry基因植物的研究 | 第22-23页 |
| ·融合基因的研究 | 第23-24页 |
| 6.关于虎纹毒素-Ⅰ的概述 | 第24-25页 |
| 7.工程菌研究 | 第25-26页 |
| ·杀虫防病工程菌的构建 | 第25页 |
| ·延长残效期工程菌的构建 | 第25-26页 |
| ·杀虫固氮工程菌的构建 | 第26页 |
| ·延缓抗性工程菌的构建 | 第26页 |
| 8.立题依据和意义 | 第26-27页 |
| 材料与方法 | 第27-39页 |
| 1.材料 | 第27-31页 |
| ·菌株与质粒 | 第27-28页 |
| ·培养基和抗生素 | 第28页 |
| ·试剂和引物 | 第28-30页 |
| ·供试昆虫 | 第30-31页 |
| ·仪器设备 | 第31页 |
| 2.方法 | 第31-39页 |
| ·融合基因的构建 | 第31-34页 |
| ·融合基因表达载体的构建 | 第34-35页 |
| ·表达载体pXL43电转化无晶体突变株XBU001 | 第35-36页 |
| ·融合基因在无晶体突变株中的表达 | 第36-37页 |
| ·融合基因在Bt4.0718中的表达研究 | 第37页 |
| ·重组菌株XL004的生物活性测定 | 第37-39页 |
| 结果与分析 | 第39-55页 |
| 1.融合基因的构建 | 第39-43页 |
| ·Bt4.0718菌株质粒的抽提 | 第39-40页 |
| ·含有上游启动序列的crylAc基因的PCR扩增 | 第40-41页 |
| ·优化设计hwtx-1序列 | 第41页 |
| ·hwtx-1序列片段的磷酸化退火连接 | 第41-42页 |
| ·PCR扩增hwtx-1片段 | 第42页 |
| ·融合基因的PCR扩增 | 第42-43页 |
| 2.融合基因表达载体构建 | 第43-48页 |
| ·中间重组质粒pUA19的构建 | 第44页 |
| ·中间重组质粒pUAH19的构建 | 第44-47页 |
| ·表达载体pXL43的构建 | 第47页 |
| ·融合基因片段上下游序列分析 | 第47-48页 |
| 3.融合基因在无晶体突变株XBU001中的表达 | 第48-52页 |
| ·表达载体pXL43电转化无晶体突变株XBU001和鉴定 | 第48-49页 |
| ·融合蛋白的分离提取和SDS-PAGE检测 | 第49-50页 |
| ·重组晶体蛋白的AFM观察 | 第50页 |
| ·重组晶体蛋白的生测分析 | 第50-51页 |
| ·重组晶体蛋白中20kb-DNA的来源简要分析 | 第51-52页 |
| 4.融合基因在Bt4.0718菌株的表达分析 | 第52页 |
| 5.重组菌株XL004的生测分析 | 第52-55页 |
| 讨论 | 第55-61页 |
| 1.以crylAc基因为基础构建杀虫融合基因研究 | 第55页 |
| 2.PCR扩增crylAc全长基因研究 | 第55-56页 |
| 3.构建融合基因方法的探讨 | 第56页 |
| 4.融合基因表达系统的构建策略 | 第56-58页 |
| 5.融合蛋白形成晶体的研究 | 第58页 |
| 6.融合蛋白的毒理研究 | 第58-59页 |
| 7.重组菌株XL002晶体蛋白中20kb-DNA片段的来源初步分析 | 第59页 |
| 8.重组质粒转化Bt4.0718菌株的表达探讨 | 第59-61页 |
| 结语 | 第61-63页 |
| 1.融合基因的克隆和表达 | 第61页 |
| 2.工程菌株研究 | 第61页 |
| 3.今后工作设想 | 第61-63页 |
| 参考文献 | 第63-75页 |
| 附录 | 第75-77页 |
| 致谢 | 第77-79页 |
| 原创性声明 | 第79页 |
