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人类胚胎生殖细胞的分离克隆及生物学特性研究

文献综述第1-90页
 第一章 原始生殖细胞发育与分化第20-31页
  1 原始生殖细胞的起源第21-22页
   ·小鼠原始生殖细胞的起源第21页
   ·影响小鼠原始生殖细胞起源的因素第21-22页
   ·人类原始生殖细胞的起源第22页
  2 原始生殖细胞的发生第22-23页
   ·小鼠原始生殖细胞的发生第22页
   ·人类原始生殖细胞的发生第22-23页
  3 PGCs发生和发育的有关基因及分子特征第23-26页
   3 1 frigilis和stella第23-24页
   ·Oct-4基因第24页
   ·Nanog第24页
     ·其它相关基因第24-26页
  4 PGCs的迁移第26-28页
   ·PGCs的迁移路径第26-27页
   ·影响PGCs迁移的因素第27-28页
  5 原始生殖细胞与性别分化第28-29页
  6 生殖细胞的基因修饰第29-31页
 第二章 PGCs源的哺乳动物EG细胞研究进展第31-48页
  1 哺乳动物胚胎生殖细胞研究简史第31页
  2 胚胎生殖细胞的分离培养及影响因素第31-35页
   ·PGCs分离纯化和胚胎生殖细胞分离培养第31-32页
   ·影响胚胎生殖细胞分离培养的因素第32-35页
  3 胚胎生殖细胞的检测第35-38页
   ·形态学鉴定第35页
   ·细胞表面标志物第35-36页
   ·核型分析第36页
   ·EGN胞端粒酶活性第36页
   ·EGN胞的高度分化潜能第36-38页
  4 自PGCs分离克隆各种哺乳动物EGN胞的研究进展第38-42页
   ·小鼠第38-39页
   ·大鼠第39页
   ·兔第39-40页
   ·猪第40页
   ·羊第40-41页
   ·牛第41-42页
   ·人第42页
  5 影响PGCs与EG细胞生长增殖的机理第42-44页
   ·干细胞因子第42-43页
   ·bFGF和FGF受体第43页
   ·IL/LIF家族细胞因子第43-44页
  6 关于哺乳动物PGCs源EG细胞分离克隆的几个问题探讨第44-48页
   ·PGCs转化成EG细胞第44-45页
   ·EG细胞不能完全替代ES细胞第45-46页
   ·EG细胞分离克隆和诱导分化特性第46-48页
 第三章 人类胚胎干细胞的研究进展第48-64页
  1 人类胚胎干细胞的来源与培养方法第48-50页
   ·囊胚法(正常体内受精胚胎和体外受精胚胎)第48页
   ·克隆胚胎法第48-49页
   ·孤雌激活胚胎法第49页
   ·其他途径来源的hES细胞的分离培养第49-50页
  2 建立和维持hESCs系的条件第50-52页
   ·饲养层第50-51页
   ·培养基组成第51-52页
  3 hES细胞的生物学特性及鉴定方法第52-53页
  4 hES细胞的储藏第53-54页
   ·ES细胞的冷冻与解冻第53-54页
   ·hES细胞登记储存第54页
  5 人类胚胎干细胞研究进展第54-59页
   ·由早期胚胎分离克隆hES细胞第55-56页
   ·由克隆胚胎分离克隆ES细胞研究第56-57页
   ·hES细胞的遗传操作第57-58页
   ·hES细胞定向分化的研究第58-59页
  6 人类胚胎干细胞研究存在的问题及急需解决的问题第59-62页
   ·伦理道德之争第59页
   ·无饲养层和无血清培养体系高效快速大规模扩增hESCs体系的建立第59-60页
   ·ES细胞向特定类型重要功能细胞分化的技术第60页
   ·ES细胞源特定分化细胞的扩增与筛选纯化第60-61页
   ·ES细胞源细胞移植治疗的免疫排斥问题第61-62页
   ·ES细胞源细胞移植治疗的安全性问题第62页
  7 人类胚胎干细胞研究的趋势与前景第62-63页
  8 世界上一些已建系的实验室对人类ES细胞的管理规则第63-64页
 第四章 ES细胞体外定向诱导分化第64-83页
  1 胚胎干细胞增殖与分化的信号调节机制第64-66页
   ·STAT3 信号通路对胚胎干细胞增殖及分化的调节第64-65页
   ·ERK信号通路对胚胎干细胞增殖及分化的调节第65-66页
   ·Nanog对ES细胞多能性的维持第66页
  2 ES细胞体外诱导分化第66-81页
   ·ES细胞体外诱导分化的意义第66-67页
   ·ES细胞体外诱导分化的基本原理第67页
   ·ES细胞体外定向诱导分化方法第67-69页
   ·诱导分化程序第69-70页
   ·ES细胞体外诱导分化细胞类型第70-81页
  3 胚胎干细胞诱导分化研究展望第81-83页
 第五章 ES、EG细胞与生殖细胞第83-89页
  1 生殖细胞的发生和细胞标记第83-85页
   ·生殖细胞的发生第83-84页
   ·生殖细胞的特异性标记第84-85页
  2 ES、EG细胞与生殖细胞的关系第85-89页
   ·ES、EG细胞与生殖细胞的相似性第85-86页
   ·ES、EG细胞向生殖细胞分化第86-88页
   ·ES、EG细胞与生殖细胞的区别第88-89页
 结语第89-90页
试验研究第90-159页
 第六章 人胚胎性腺生殖细胞发育分化的研究第90-104页
  1 材料与方法第91-93页
   ·组织材料第91页
   ·试剂第91页
   ·方法第91-93页
  2 结果第93-101页
   ·人胚胎生殖嵴/性腺的形态与定位第93页
   ·HE染色观察结果第93-97页
   ·PAS染色观察结果第97-98页
   ·免疫组织化学染色观察结果第98-100页
   ·人胚胎性腺生殖细胞的AKP染色第100页
   ·人胚胎性腺生殖细胞的超微结构第100-101页
  3 讨论第101-103页
   ·人胚胎睾丸生殖细胞的发育分化第101-102页
   ·人胚胎卵巢生殖细胞的发育分化第102-103页
  4 小结第103-104页
 第七章 人类胚胎生殖细胞分离克隆体系的建立第104-123页
  1 材料和方法第104-106页
   ·材料第104-105页
   ·方法第105-106页
  2 结果第106-118页
   ·各种饲养层细胞的分离培养与生长第106-107页
   ·培养液对各种饲养层细胞生长的影响第107-109页
   ·流产胎儿对PGCs分离克隆的影响第109-110页
   ·消化液和消化时间及PERCOLL密度梯度纯化对流产儿PGCs分离克隆的影响第110-112页
   ·细胞外基质对人类胚胎生殖细胞分离克隆的影响第112页
   ·培养液及添加物对人类胚胎生殖细胞分离克隆的影响第112-117页
   ·饲养层第117-118页
  3 讨论第118-121页
   ·胎儿对人类胚胎生殖细胞分离克隆的影响第118-119页
   ·消化液和消化时间及PERCOLL密度梯度纯化对PGCs分离克隆的影响第119页
   ·细胞外基质与人类胚胎生殖细胞分离克隆第119页
   ·细胞因子对人类胚胎生殖细胞分离克隆的影响第119-121页
   ·条件培养液与人类胚胎生殖细胞分离克隆第121页
   ·饲养层细胞类型对人类胚胎生殖细胞分离克隆的影响第121页
  4 小结第121-123页
 第八章 人类EG细胞的无血清培养及检测第123-139页
  1 材料与方法第123-126页
   ·材料第123页
   ·方法第123-126页
  2 结果第126-136页
   ·人类EG细胞的无血清分离培养第127-130页
   ·人类EG细胞的检测第130-136页
  3 讨论第136-138页
   ·人类EG细胞的无血清分离培养第136-137页
   ·人类EG细胞的生物学特性及检测第137-138页
  4 小结第138-139页
 第九章 人类EG细胞体外定向诱导分化第139-151页
  1 材料与方法第139-142页
   ·材料第139页
   ·方法第139-142页
  2 结果第142-148页
   ·人类胚胎生殖细胞的分离培养和表面标记第142页
   ·人类EG细胞体外向心肌细胞诱导分化及检测第142-144页
   ·人类EG细胞体外向神经细胞分化及检测第144-146页
   ·人类EG细胞向胰岛素分泌细胞的诱导分化及检测第146-148页
  3 讨论第148-150页
   ·人类EG细胞向心肌细胞诱导分化第148-149页
   ·人类EG细胞向神经细胞诱导分化第149页
   ·人类EG细胞向胰岛素分泌细胞的诱导分化及检测第149-150页
  4 小结第150-151页
 第十章 人类胚胎生殖细胞转染心肌Α-ACTIN的研究第151-159页
  1 材料与方法第151-153页
   ·材料第151-152页
   ·方法第152-153页
  2 结果第153-156页
   ·hEGCs的转染、筛选与增殖第153-155页
   ·免疫组化检测第155页
   ·转染α-actin 的hEGCs向心肌细胞的诱导分化第155-156页
  3 讨论第156-158页
   ·hEGCs的转染、筛选与增殖第156-158页
   ·α-actin在hEGCs中的表达第158页
  4 小结第158-159页
结论第159-160页
创新点第160-161页
进一步研究的课题第161-162页
参考文献第162-177页
致谢第177-178页
作者简介第178页

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