水稻矮缩病毒的检测及部分基因的比较分析
| 中文摘要 | 第1-7页 |
| 英文摘要 | 第7-9页 |
| 1 前言 | 第9-21页 |
| ·水稻矮缩病毒的研究概况 | 第9-18页 |
| ·病毒的形态特征及生物学特性 | 第10页 |
| ·病害的发生与分布 | 第10页 |
| ·病害症状及寄主范围 | 第10-11页 |
| ·病害的传毒介体与传毒特性 | 第11页 |
| ·病毒粒子在宿主植物和介体叶蝉体内的定位 | 第11页 |
| ·病毒基因组的结构与功能 | 第11-13页 |
| ·病毒蛋白及其功能 | 第13-16页 |
| ·结构蛋白 | 第13-15页 |
| ·非结构蛋白 | 第15-16页 |
| ·RDV的侵染、转录、表达、复制和组装 | 第16-18页 |
| ·水稻矮缩病毒的检测 | 第18页 |
| ·水稻矮缩病毒分子变异的研究 | 第18-19页 |
| ·RDV分子变异的研究概况 | 第18-19页 |
| ·病毒遗传变异的分析方法 | 第19页 |
| ·本项目研究的目的和意义 | 第19-21页 |
| 2 材料与方法 | 第21-31页 |
| ·材料 | 第21-23页 |
| ·病毒分离物的采集 | 第21页 |
| ·供试昆虫 | 第21页 |
| ·菌株和载体 | 第21页 |
| ·试剂 | 第21-22页 |
| ·引物 | 第22-23页 |
| ·实验方法 | 第23-31页 |
| ·病毒提纯 | 第23页 |
| ·电子显微镜技术 | 第23页 |
| ·病毒基因组提取 | 第23-24页 |
| ·dsRNA的定量 | 第24页 |
| ·dsRNA基因组的SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第24页 |
| ·RT-PCR | 第24-25页 |
| ·cDNA第一链的合成 | 第24-25页 |
| ·PCR扩增 | 第25页 |
| ·单引物扩增 | 第25-28页 |
| ·dsRNA与寡核苷酸片段的连接反应 | 第25页 |
| ·连接产物的切胶纯化 | 第25-26页 |
| ·反转录 | 第26页 |
| ·RNA降解和cDNA复性 | 第26页 |
| ·离心柱层析 | 第26-27页 |
| ·补平反应 | 第27页 |
| ·PCR扩增 | 第27-28页 |
| ·DNA片段的切胶纯化 | 第28页 |
| ·连接 | 第28页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备及转化 | 第28-29页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第28页 |
| ·连接反应物对宿主感受态细胞的转 | 第28-29页 |
| ·质粒的少量提纯(碱法) | 第29页 |
| ·重组克隆的酶切鉴定 | 第29页 |
| ·克隆子序列的测定及分析 | 第29页 |
| ·病毒的检测 | 第29-30页 |
| ·地高辛标记的DNA探针制备 | 第29页 |
| ·RNA点杂交 | 第29-30页 |
| ·生物学接种和病毒传播实验 | 第30-31页 |
| 3 结果、分析和讨论 | 第31-48页 |
| ·水稻矮缩病的症状和病毒粒子形态 | 第31-32页 |
| ·核酸的定量和基因组差异初步分析 | 第32-34页 |
| ·核酸的定量 | 第32-33页 |
| ·基因组差异初步分析 | 第33-34页 |
| ·序列比较分析 | 第34-45页 |
| ·S11基因片段 | 第34-36页 |
| ·PCR扩增及克隆 | 第34页 |
| ·S11序列和功能分析 | 第34-36页 |
| ·S12基因片段 | 第36-39页 |
| ·PCR扩增及克隆 | 第36-37页 |
| ·S12序列和功能分析 | 第37-39页 |
| ·S2基因片段 | 第39-41页 |
| ·PCR扩增及克隆 | 第39-40页 |
| ·S2序列和功能分析 | 第40-41页 |
| ·S3基因片段 | 第41-42页 |
| ·PCR扩增及克隆 | 第41-42页 |
| ·S3序列和功能分析 | 第42页 |
| ·讨论 | 第42-45页 |
| ·水稻矮缩病毒的检测和介体昆虫传毒能力的分析 | 第45-48页 |
| ·生物学接种 | 第45-46页 |
| ·斑点杂交 | 第46-47页 |
| ·结果与分析 | 第47-48页 |
| 4 小结 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-56页 |
| 致谢 | 第56-57页 |
| 附录 | 第57页 |