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水稻矮缩病毒的检测及部分基因的比较分析

中文摘要第1-7页
英文摘要第7-9页
1 前言第9-21页
   ·水稻矮缩病毒的研究概况第9-18页
     ·病毒的形态特征及生物学特性第10页
     ·病害的发生与分布第10页
     ·病害症状及寄主范围第10-11页
     ·病害的传毒介体与传毒特性第11页
     ·病毒粒子在宿主植物和介体叶蝉体内的定位第11页
     ·病毒基因组的结构与功能第11-13页
     ·病毒蛋白及其功能第13-16页
       ·结构蛋白第13-15页
       ·非结构蛋白第15-16页
     ·RDV的侵染、转录、表达、复制和组装第16-18页
     ·水稻矮缩病毒的检测第18页
   ·水稻矮缩病毒分子变异的研究第18-19页
     ·RDV分子变异的研究概况第18-19页
     ·病毒遗传变异的分析方法第19页
   ·本项目研究的目的和意义第19-21页
2 材料与方法第21-31页
   ·材料第21-23页
     ·病毒分离物的采集第21页
     ·供试昆虫第21页
     ·菌株和载体第21页
     ·试剂第21-22页
     ·引物第22-23页
   ·实验方法第23-31页
     ·病毒提纯第23页
     ·电子显微镜技术第23页
     ·病毒基因组提取第23-24页
     ·dsRNA的定量第24页
     ·dsRNA基因组的SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳第24页
     ·RT-PCR第24-25页
       ·cDNA第一链的合成第24-25页
       ·PCR扩增第25页
     ·单引物扩增第25-28页
       ·dsRNA与寡核苷酸片段的连接反应第25页
       ·连接产物的切胶纯化第25-26页
       ·反转录第26页
       ·RNA降解和cDNA复性第26页
       ·离心柱层析第26-27页
       ·补平反应第27页
       ·PCR扩增第27-28页
     ·DNA片段的切胶纯化第28页
     ·连接第28页
     ·大肠杆菌感受态细胞的制备及转化第28-29页
       ·大肠杆菌感受态细胞的制备第28页
       ·连接反应物对宿主感受态细胞的转第28-29页
     ·质粒的少量提纯(碱法)第29页
     ·重组克隆的酶切鉴定第29页
     ·克隆子序列的测定及分析第29页
     ·病毒的检测第29-30页
       ·地高辛标记的DNA探针制备第29页
       ·RNA点杂交第29-30页
     ·生物学接种和病毒传播实验第30-31页
3 结果、分析和讨论第31-48页
   ·水稻矮缩病的症状和病毒粒子形态第31-32页
   ·核酸的定量和基因组差异初步分析第32-34页
     ·核酸的定量第32-33页
     ·基因组差异初步分析第33-34页
   ·序列比较分析第34-45页
     ·S11基因片段第34-36页
       ·PCR扩增及克隆第34页
       ·S11序列和功能分析第34-36页
     ·S12基因片段第36-39页
       ·PCR扩增及克隆第36-37页
       ·S12序列和功能分析第37-39页
     ·S2基因片段第39-41页
       ·PCR扩增及克隆第39-40页
       ·S2序列和功能分析第40-41页
     ·S3基因片段第41-42页
       ·PCR扩增及克隆第41-42页
       ·S3序列和功能分析第42页
     ·讨论第42-45页
   ·水稻矮缩病毒的检测和介体昆虫传毒能力的分析第45-48页
     ·生物学接种第45-46页
     ·斑点杂交第46-47页
     ·结果与分析第47-48页
4 小结第48-49页
参考文献第49-56页
致谢第56-57页
附录第57页

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