中文摘要 | 第1-6页 |
英文摘要 | 第6-11页 |
目录 | 第11-16页 |
符号说明 | 第16-18页 |
第一章 文献综述 | 第18-48页 |
1 毒力与致病作用 | 第18-23页 |
·Lm毒力因子及其与宿主细胞相互作用 | 第18-20页 |
·李斯特菌溶血素 | 第18-19页 |
·与Lm侵入细胞,胞内运动以及胞间转移有关的毒力因子 | 第19-20页 |
·实验室毒力检测:动物模型与细胞模型 | 第20-22页 |
·小鼠模型 | 第20-21页 |
·a 胃肠道途径感染 | 第20-21页 |
·b 神经系统感染模型 | 第21页 |
·其他动物模型 | 第21-22页 |
·细胞模型 | 第22页 |
·环境压力与毒力 | 第22-23页 |
·寒冷及植物分子对毒力基因表达的抑制 | 第22-23页 |
·对缺铁的反应 | 第23页 |
·酸耐受与酸压力 | 第23页 |
2 食品中Lm的检测 | 第23-27页 |
·传统分离鉴定法 | 第23-25页 |
·免疫学检测方法 | 第25-26页 |
·核酸检测方法 | 第26-27页 |
3 Lm的亚分型方法 | 第27-31页 |
·Lm的传统表型亚分型法 | 第28-29页 |
·血清分型 | 第28页 |
·噬菌体分型 | 第28页 |
·多区带酶电泳分型(MEE) | 第28-29页 |
·Lm的遗传亚分型 | 第29-30页 |
·脉冲场凝胶电泳 | 第29-30页 |
·核糖体分型 | 第30页 |
·以DNA序列为基础的亚分型 | 第30-31页 |
4 Lm分子亚分型的应用 | 第31-34页 |
·食源性疾病的监控和爆发的追踪 | 第31-33页 |
·不同致病性Lm的区分及对其进化树特征的描述 | 第33-34页 |
5 结语 | 第34-35页 |
6 参考文献 | 第35-48页 |
第二章 产单核细胞李斯特菌的PCR快速检测方法的建立 | 第48-61页 |
1 材料与方法 | 第49-52页 |
·菌株 | 第49-50页 |
·细菌DNA的提取 | 第50-51页 |
·溶菌酶-蛋白酶K法 | 第50-51页 |
·热裂解法 | 第51页 |
·反复冻融法 | 第51页 |
·PCR引物和扩增条件 | 第51页 |
·灵敏度实验 | 第51页 |
·DNA模板检测限实验 | 第51-52页 |
·人工污染模拟实验 | 第52页 |
·人工干扰实验 | 第52页 |
2 结果 | 第52-56页 |
·PCR检测结果 | 第52页 |
·三种DNA模板提取方法PCR结果的比较 | 第52-54页 |
·DNA模板检测限实验结果 | 第54页 |
·模拟样品的检测结果 | 第54-55页 |
·人工干扰实验结果 | 第55-56页 |
3 讨论 | 第56-57页 |
4 参考文献 | 第57-61页 |
第三章 市售食品及其环境污水中产单核细胞李斯特菌污染率调查研究 | 第61-76页 |
1 材料与方法 | 第63-64页 |
·食品样品的采集 | 第63页 |
·生食样品 | 第63页 |
·熟食样品 | 第63页 |
·生猪屠宰场的新鲜猪肉样品 | 第63-64页 |
·超市熟食样品 | 第64页 |
·Lm的分离 | 第64页 |
·Lm的PCR鉴定 | 第64页 |
2 结果 | 第64-70页 |
·扬州地区四个农贸市场生食样品中Lm污染率 | 第64-66页 |
·扬州地区四大市场熟食样品中Lm的污染率 | 第66-68页 |
·扬州市区某一生猪屠宰场猪肉中Lm污染率及其与四大市场生猪肉Lm污染率的比较 | 第68-69页 |
·扬州市区两超市熟食样品Lm污染率 | 第69-70页 |
3 讨论 | 第70-72页 |
4 参考文献 | 第72-76页 |
第四章 RAPD分析在产单核细胞李斯特菌分子亚分型中的应用 | 第76-92页 |
1 材料与方法 | 第77-79页 |
·菌株来源及培养 | 第77页 |
·Lm血清型分析 | 第77-78页 |
·Lm DNA的提取 | 第78页 |
·RAPD分析 | 第78-79页 |
·随机引物序列 | 第78页 |
·PCR扩增程序 | 第78-79页 |
·RAPD重复性实验 | 第79页 |
·RAPD指纹分析 | 第79页 |
2 结果 | 第79-86页 |
·血清型鉴定结果 | 第79页 |
·RAPD结果的可重复性 | 第79-82页 |
·RAPD指纹分析 | 第82-85页 |
·RTE食品中Lm污染源的追踪 | 第85-86页 |
·脑膜炎病人Lm感染菌株与食品中Lm菌株RAPD组合型的关系 | 第86页 |
3 讨论 | 第86-88页 |
4 参考文献 | 第88-92页 |
第五章 基于actA基因的产单核细胞李斯特菌遗传谱系研究 | 第92-113页 |
1 材料与方法 | 第93-98页 |
·Lm菌株 | 第93-96页 |
·actA基因3’末端的PCR扩增 | 第96-97页 |
·PCR产物的序列测定 | 第97页 |
·遗传进化树的构建 | 第97页 |
·Lm对Caco-2细胞的侵袭及其在Caco-2细胞内增殖实验 | 第97-98页 |
·Caco-2细胞、Lm菌株 | 第97-98页 |
·Lm对Caco-2细胞的侵袭实验 | 第98页 |
·Lm在Caco-2细胞内增殖的实验 | 第98页 |
2 结果 | 第98-104页 |
·Lm中国分离株的遗传进化与谱系分析 | 第98-99页 |
·中国与美国Lm分离株遗传谱系与actA基因型比较 | 第99页 |
·Lm中国分离株与美国分离株actA基因3’末段核苷酸序列与蛋白质序列的变化 | 第99-103页 |
·两个谱系细菌对Caco-2细胞的侵袭及其在Caco-2细胞内增殖实验结果 | 第103-104页 |
3 讨论 | 第104-107页 |
4 参考文献 | 第107-113页 |
致谢 | 第113-114页 |
攻读硕士学位期间发表的论文目录 | 第114页 |