一. 中文摘要 | 第1-13页 |
二. 英文摘要 | 第13-16页 |
三. 前言 | 第16-31页 |
(一) 鸡传染性贫血病的研究进展 | 第17-23页 |
1 鸡传染性贫血病及其病原 | 第17-18页 |
2 鸡传染性贫血病病毒及其特性 | 第18-19页 |
3 流行病学 | 第19页 |
4 临床及病理变化 | 第19页 |
5 CAV的发病机理 | 第19-20页 |
6 免疫抑制表现 | 第20页 |
7 免疫抑制机理 | 第20-21页 |
8 诊断方法 | 第21-23页 |
(二) 鸡马立克氏病的研究进展 | 第23-29页 |
1 鸡马立克氏病及其病原 | 第23-24页 |
2 鸡马立克氏病病毒及其特性 | 第24-25页 |
3 流行病学 | 第25页 |
4 致病机理 | 第25-27页 |
5 免疫抑制机理 | 第27-28页 |
6 免疫抑制表现 | 第28页 |
7 诊断方法 | 第28-29页 |
(三) 本研究的目的、意义 | 第29-31页 |
四. 研究内容 | 第31-80页 |
实验一 鸡贫血病病毒检测方法的初步研究 | 第31-59页 |
1 材料与方法 | 第32-35页 |
·病料来源 | 第32页 |
·CAV易感细胞 | 第32页 |
·病料的处理 | 第32-33页 |
·病料组织DNA的制备 | 第33页 |
·CAV易感细胞培养 | 第33页 |
·病料感染MSB1细胞 | 第33页 |
·病料感染细胞DNA的提取 | 第33-34页 |
·间接免疫荧光反应(IFA) | 第34-35页 |
·PCR引物设计与合成 | 第35页 |
2 引物 | 第35-40页 |
·克隆载体和宿主菌 | 第35页 |
·PCR扩增反应 | 第35-36页 |
·PCR产物DNA电泳 | 第36页 |
·PCR产物的纯化 | 第36-37页 |
·DNA的连接反应 | 第37页 |
·BL21大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第37-38页 |
·连接产物的转化 | 第38页 |
·质粒DNA的提取 | 第38-40页 |
·阳性质粒DNA的酶切鉴定 | 第40页 |
3 结果 | 第40-41页 |
·PCR检测结果 | 第40-41页 |
·IFA检测结果 | 第41页 |
·重组质粒酶切鉴定结果 | 第41页 |
·阳性克隆序列测定结果 | 第41页 |
4 讨论 | 第41-43页 |
5 附图及序列分析 | 第43-59页 |
实验二 鸡贫血病病毒检测方法的初步应用 | 第59-68页 |
1 材料与方法 | 第60-64页 |
·试验用病毒 | 第60页 |
·试验用鸡胚 | 第60页 |
·标记探针用DNA | 第60-61页 |
·地高辛标记检测试剂盒 | 第61页 |
·试验设计 | 第61页 |
·探针的标记 | 第61-62页 |
·斑点杂交与PCR试验模板 | 第62-63页 |
·标记探针对样品DNA的检测 | 第63-64页 |
·PCR反应 | 第64页 |
2 结果 | 第64-66页 |
·EID50结果 | 第65页 |
·免疫器官指数 | 第65页 |
·剖检变化 | 第65页 |
·斑点杂交结果 | 第65-66页 |
·PCR结果 | 第66页 |
3 讨论 | 第66-67页 |
4 附图 | 第67-68页 |
实验三 悬浮法IFA检测鸡外周血液淋巴细胞中MDV方法的初步研究与应用 | 第68-74页 |
1 材料与方法 | 第70-72页 |
·MDV病毒 | 第70页 |
·试验用鸡 | 第70页 |
·动物接种与饲养试验 | 第70页 |
·PBMCs的分离制备 | 第70-71页 |
·IFA所用单抗 | 第71页 |
·IFA试验 | 第71-72页 |
2 结果 | 第72页 |
3 讨论 | 第72-73页 |
4 附图 | 第73-74页 |
实验四、马立克氏病病毒感染鸡对新城疫疫苗和法氏囊疫苗免疫反应的影响 | 第74-80页 |
1 材料与方法 | 第76-78页 |
·试验用MDV | 第76页 |
·试验用疫苗 | 第76页 |
·试验用鸡 | 第76页 |
·分组、免疫及攻毒 | 第76-77页 |
·定期采血 | 第77-78页 |
·血清NDV的HI抗体测定 | 第78页 |
·血清IBDV抗体ELISA效价测定 | 第78页 |
·数据处理 | 第78页 |
2 结果 | 第78-79页 |
·MDV感染对疫苗免疫后的抗NDV的HI抗体的影响 | 第78-79页 |
·MDV感染对疫苗免疫后的抗IBDV抗体反应的影响 | 第79页 |
3 、讨论 | 第79-80页 |
五. 结论 | 第80-81页 |
六. 参考文献 | 第81-94页 |
七. 攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第94-95页 |
八. 致谢 | 第95-96页 |