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鸡贫血病病毒和马立克氏病毒实验室检测方法的建立和应用

一. 中文摘要第1-13页
二. 英文摘要第13-16页
三. 前言第16-31页
 (一) 鸡传染性贫血病的研究进展第17-23页
  1 鸡传染性贫血病及其病原第17-18页
  2 鸡传染性贫血病病毒及其特性第18-19页
  3 流行病学第19页
  4 临床及病理变化第19页
  5 CAV的发病机理第19-20页
  6 免疫抑制表现第20页
  7 免疫抑制机理第20-21页
  8 诊断方法第21-23页
 (二) 鸡马立克氏病的研究进展第23-29页
  1 鸡马立克氏病及其病原第23-24页
  2 鸡马立克氏病病毒及其特性第24-25页
  3 流行病学第25页
  4 致病机理第25-27页
  5 免疫抑制机理第27-28页
  6 免疫抑制表现第28页
  7 诊断方法第28-29页
 (三) 本研究的目的、意义第29-31页
四. 研究内容第31-80页
 实验一 鸡贫血病病毒检测方法的初步研究第31-59页
  1 材料与方法第32-35页
   ·病料来源第32页
   ·CAV易感细胞第32页
   ·病料的处理第32-33页
   ·病料组织DNA的制备第33页
   ·CAV易感细胞培养第33页
   ·病料感染MSB1细胞第33页
   ·病料感染细胞DNA的提取第33-34页
   ·间接免疫荧光反应(IFA)第34-35页
   ·PCR引物设计与合成第35页
  2 引物第35-40页
   ·克隆载体和宿主菌第35页
   ·PCR扩增反应第35-36页
   ·PCR产物DNA电泳第36页
   ·PCR产物的纯化第36-37页
   ·DNA的连接反应第37页
   ·BL21大肠杆菌感受态细胞的制备第37-38页
   ·连接产物的转化第38页
   ·质粒DNA的提取第38-40页
   ·阳性质粒DNA的酶切鉴定第40页
  3 结果第40-41页
   ·PCR检测结果第40-41页
   ·IFA检测结果第41页
   ·重组质粒酶切鉴定结果第41页
   ·阳性克隆序列测定结果第41页
  4 讨论第41-43页
  5 附图及序列分析第43-59页
 实验二 鸡贫血病病毒检测方法的初步应用第59-68页
  1 材料与方法第60-64页
   ·试验用病毒第60页
   ·试验用鸡胚第60页
   ·标记探针用DNA第60-61页
   ·地高辛标记检测试剂盒第61页
   ·试验设计第61页
   ·探针的标记第61-62页
   ·斑点杂交与PCR试验模板第62-63页
   ·标记探针对样品DNA的检测第63-64页
   ·PCR反应第64页
  2 结果第64-66页
   ·EID50结果第65页
   ·免疫器官指数第65页
   ·剖检变化第65页
   ·斑点杂交结果第65-66页
   ·PCR结果第66页
  3 讨论第66-67页
  4 附图第67-68页
 实验三 悬浮法IFA检测鸡外周血液淋巴细胞中MDV方法的初步研究与应用第68-74页
  1 材料与方法第70-72页
   ·MDV病毒第70页
   ·试验用鸡第70页
   ·动物接种与饲养试验第70页
   ·PBMCs的分离制备第70-71页
   ·IFA所用单抗第71页
   ·IFA试验第71-72页
  2 结果第72页
  3 讨论第72-73页
  4 附图第73-74页
 实验四、马立克氏病病毒感染鸡对新城疫疫苗和法氏囊疫苗免疫反应的影响第74-80页
  1 材料与方法第76-78页
   ·试验用MDV第76页
   ·试验用疫苗第76页
   ·试验用鸡第76页
   ·分组、免疫及攻毒第76-77页
   ·定期采血第77-78页
   ·血清NDV的HI抗体测定第78页
   ·血清IBDV抗体ELISA效价测定第78页
   ·数据处理第78页
  2 结果第78-79页
   ·MDV感染对疫苗免疫后的抗NDV的HI抗体的影响第78-79页
   ·MDV感染对疫苗免疫后的抗IBDV抗体反应的影响第79页
  3 、讨论第79-80页
五. 结论第80-81页
六. 参考文献第81-94页
七. 攻读学位期间发表的学术论文目录第94-95页
八. 致谢第95-96页

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