缩略词 | 第1-5页 |
中文摘要 | 第5-6页 |
ABSTRACT | 第6-13页 |
第一章 绪论 | 第13-26页 |
·纤维素与纤维素酶 | 第13页 |
·β-葡萄糖苷酶的研究概况 | 第13-23页 |
·β-葡萄糖苷酶的来源 | 第13-14页 |
·β-葡萄糖苷酶的分类 | 第14-15页 |
·β-葡萄糖苷酶的催化机制 | 第15页 |
·β-葡萄糖苷酶的酶学性质 | 第15-17页 |
·l β-葡萄糖苷酶的相对分子量 | 第15-16页 |
·β-葡萄糖苷酶的等电点,最适 pH 及 pH 稳定性 | 第16页 |
·β-葡萄糖苷酶的最适温度及热稳定性 | 第16-17页 |
·β-葡萄糖苷酶的底物特异性 | 第17页 |
·β-葡萄糖苷酶的抑制和激活 | 第17页 |
·β-葡萄糖苷酶的测定方法 | 第17-18页 |
·分光光度法 | 第17-18页 |
·荧光法 | 第18页 |
·电化学法 | 第18页 |
·β-葡萄糖苷酶的分离纯化 | 第18-19页 |
·β-葡萄糖苷酶的固定化技术 | 第19-20页 |
·β-葡萄糖苷酶的应用 | 第20-22页 |
·β-葡萄糖苷酶在工业中的应用 | 第20页 |
·β-葡萄糖苷酶在农业中的应用 | 第20-21页 |
·β-葡萄糖苷酶在医学领域中的应用 | 第21页 |
·β-葡萄糖苷酶作为风味酶的应用 | 第21-22页 |
·β-葡萄糖苷酶的分子生物学研究 | 第22-23页 |
·黑曲霉 | 第23-24页 |
·研究的目的及内容 | 第24-26页 |
·研究目的、意义 | 第24页 |
·研究内容 | 第24-25页 |
·技术路线 | 第25-26页 |
第二章 响应面法优化黑曲霉 3.2130 产β-葡萄糖苷酶发酵条件的研究 | 第26-47页 |
·材料与方法 | 第26-29页 |
·试验材料 | 第26-27页 |
·试验菌株 | 第26页 |
·培养基 | 第26-27页 |
·主要试剂 | 第27页 |
·试验仪器 | 第27页 |
·试验方法 | 第27-29页 |
·酶活的测定 | 第27页 |
·黑曲霉 3.2130 产酶曲线的测定 | 第27-28页 |
·营养因素筛选 | 第28页 |
·发酵培养基的单因素试验 | 第28页 |
·发酵工艺条件的单因素试验 | 第28页 |
·发酵培养基的响应面试验设计 | 第28页 |
·发酵工艺条件的响应面试验设计 | 第28-29页 |
·结果与分析 | 第29-46页 |
·β-葡萄糖苷酶的活力计算 | 第29页 |
·黑曲霉 3.2130 最佳产酶时间的确定 | 第29-30页 |
·营养因素对产酶活力的影响 | 第30-33页 |
·碳源对产酶活力的影响 | 第30-31页 |
·氮源对产酶活力的影响 | 第31页 |
·诱导物对产酶活力的影响 | 第31-32页 |
·表面活性剂对产酶活力的影响 | 第32-33页 |
·刺激剂对产酶活力的影响 | 第33页 |
·培养基单因素确定 | 第33-36页 |
·麸皮的用量对产酶活力的影响 | 第33-34页 |
·硫酸铵+蛋白胨的用量对产酶活力的影响 | 第34-35页 |
·水杨苷+CMC 的用量对产酶活力的影响 | 第35页 |
·初始 pH 对产酶活力的影响 | 第35-36页 |
·工艺条件单因素确定 | 第36-38页 |
·装液量 | 第36-37页 |
·接种量 | 第37-38页 |
·摇床转速 | 第38页 |
·响应面分析法优化培养基 | 第38-42页 |
·二次回归拟合及方差分析 | 第38-41页 |
·试验结果分析与优化 | 第41-42页 |
·模型的验证 | 第42页 |
·响应面分析法优化工艺条件 | 第42-46页 |
·二次回归拟合及方差分析 | 第42-44页 |
·试验结果分析与优化 | 第44-46页 |
·模型的验证 | 第46页 |
·本章小结 | 第46-47页 |
第三章 黑曲霉原生质体 DES 诱变酸性蛋白酶缺陷菌株选育 | 第47-59页 |
·材料与方法 | 第47-50页 |
·试验材料 | 第47-48页 |
·试验菌株 | 第47-48页 |
·培养基 | 第48页 |
·主要试剂 | 第48页 |
·试验仪器 | 第48页 |
·试验方法 | 第48-50页 |
·酸性蛋白酶活力测定 | 第48页 |
·β-葡萄糖苷酶活力测定 | 第48-49页 |
·原生质体的制备方法 | 第49页 |
·原生质体的再生 | 第49页 |
·硫酸二乙酯(DES)诱变处理 | 第49页 |
·平板初筛 | 第49-50页 |
·摇瓶培养复筛 | 第50页 |
·结果与分析 | 第50-58页 |
·蛋白酶活力计算 | 第50-51页 |
·原生质体的释放 | 第51-53页 |
·酶配比对原生质体的影响 | 第51页 |
·酶解时间对原生质体的影响 | 第51-53页 |
·促进剂对原生质体的影响 | 第53页 |
·酶解条件的正交试验 | 第53-54页 |
·黑曲霉原生质体诱变条件结果分析 | 第54-56页 |
·诱变时间对黑曲霉原生质体的致死效应的结果分析 | 第54-55页 |
·诱变剂用量对黑曲霉原生质体的致死效应的结果分析 | 第55-56页 |
·原生质体稀释倍数的致死效应的结果分析 | 第56页 |
·诱变条件的正交试验 | 第56-58页 |
·黑曲霉原生质体诱变后酶活性分析 | 第58页 |
·本章小结 | 第58-59页 |
第四章 黑曲霉 3.316β-葡萄糖苷酶的分离纯化及特性研究 | 第59-72页 |
·材料与方法 | 第59-62页 |
·试验材料 | 第59-60页 |
·试验菌株 | 第59页 |
·培养基 | 第59-60页 |
·主要试剂 | 第60页 |
·试验仪器 | 第60页 |
·试验方法 | 第60-62页 |
·β-葡萄糖苷酶活力测定 | 第60页 |
·蛋白质含量的测定 | 第60页 |
·硫酸铵分级沉淀 | 第60-61页 |
·乙醇分级沉淀 | 第61页 |
·DEAE-Sephadex A-50 阴离子交换层析分离纯化β-葡萄糖苷 酶 | 第61页 |
·Sephadex G-100 凝胶层析分离纯化β-葡萄糖苷酶 | 第61页 |
·β-葡萄糖苷酶电泳纯度鉴定 | 第61页 |
·β-葡萄糖苷酶酶学性质的测定[114-118] | 第61-62页 |
·结果与分析 | 第62-71页 |
·两种沉淀方法的比较 | 第62-63页 |
·β-葡萄糖苷酶的分离纯化 | 第63-65页 |
·DEAE-Sephadex A-50 阴离子交换层析分离β-葡萄糖苷酶 | 第63-64页 |
·Sephadex G-100 凝胶层析分离β-葡萄糖苷酶 | 第64页 |
·β-葡萄糖苷酶纯化总表 | 第64-65页 |
·β-葡萄糖苷酶的电泳纯度鉴定及分子量的测定 | 第65-67页 |
·β-葡萄糖苷酶电泳纯度鉴定 | 第65-66页 |
·β-葡萄糖苷酶分子量的测定 | 第66-67页 |
·β-葡萄糖苷酶酶学性质研究 | 第67-71页 |
·β-葡萄糖苷酶最适反应温度 | 第67页 |
·β-葡萄糖苷酶的热稳定性 | 第67-68页 |
·β-葡萄糖苷酶的最适 pH 值 | 第68页 |
·β-葡萄糖苷酶的 pH 稳定性 | 第68-69页 |
·底物浓度对β-葡萄糖苷酶活力的影响 | 第69页 |
·金属离子、EDTA 对β-葡萄糖苷酶活力的影响 | 第69-70页 |
·β-葡萄糖苷酶动力学常数-米氏常数 Km | 第70-71页 |
·本章小结 | 第71-72页 |
第五章 黑曲霉 3.316bgl 基因的克隆及序列分析 | 第72-85页 |
·材料与方法 | 第72-75页 |
·试验材料 | 第72-73页 |
·菌种、克隆载体 | 第72页 |
·培养基 | 第72-73页 |
·主要试剂 | 第73页 |
·试验仪器 | 第73页 |
·试验方法 | 第73-75页 |
·引物设计 | 第73页 |
·黑曲霉的种子培养及样品处理 | 第73页 |
·黑曲霉基因组 DNA 的提取 | 第73-74页 |
·PCR 扩增 | 第74页 |
·重组质粒的构建与鉴定 | 第74页 |
·基因测序与分析验证 | 第74-75页 |
·结果与分析 | 第75-84页 |
·基因组 DNA 提取 | 第75页 |
·bgl 基因的扩增 | 第75-76页 |
·重组菌的筛选与检测 | 第76页 |
·序列测定与分析 | 第76-78页 |
·bgl 基因 cDNA 序列的推导与分析 | 第78-84页 |
·黑曲霉 3.316bgl 蛋白的氨基酸序列分析 | 第81-82页 |
·黑曲霉 3.316bgl 蛋白信号肽分析 | 第82-83页 |
·黑曲霉 3.316bgl 蛋白二、三级结构预测与分析 | 第83-84页 |
·本章小结 | 第84-85页 |
第六章 全文总结 | 第85-87页 |
·结论 | 第85-86页 |
·创新点 | 第86页 |
·后续试验 | 第86-87页 |
参考文献 | 第87-95页 |
发表论文和参加科研情况说明 | 第95-96页 |
致谢 | 第96页 |