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樱桃S基因型及自交(不)亲和机制研究

摘要第1-10页
英文摘要第10-13页
文献综述 植物及果树自交不亲和性研究进展第13-36页
 1 植物S基因及其S-RNase第14-20页
   ·S基因的多态性及结构特点第14-15页
   ·S基因的表达与作用机理第15-18页
   ·关于S位点第18-19页
   ·关于S位点相关基因(S-related gene)第19-20页
 2 果树自交不亲和性研究进展第20-28页
   ·梨SI研究进展第21-23页
   ·苹果SI研究进展第23-24页
   ·杏SI研究进展第24-25页
   ·扁桃SI研究进展第25页
   ·甜樱桃SI研究进展及SC品种的选育第25-28页
   ·SC品种不同的分子机制及应用设想第28页
 3 蔷薇科上确定S基因型的方法第28-33页
   ·等电聚焦凝胶电泳确定S基因型第29-30页
   ·PCR扩增确定S基因型第30-33页
 4 本研究的内容及目标第33-36页
第一部分 甜樱桃S基因的克隆及S基因型的鉴定第36-61页
 1 前言第36-37页
 2 材料和方法第37-41页
   ·材料第37-38页
   ·实验方法第38-41页
     ·基因组DNA提取第38页
     ·S基因特异PCR扩增第38-39页
     ·大肠杆菌感受态细胞的制备及转化第39-40页
       ·大肠杆菌感受态细胞的制备第39页
       ·连接反应第39页
       ·大肠杆菌感受态细胞的转化及阳性克隆的筛选第39-40页
     ·田间授粉试验第40页
       ·花粉采集第40页
       ·杂交授粉第40页
     ·樱桃各品种的RAPD分析第40-41页
 3 结果与分析第41-57页
   ·甜樱桃S基因克隆及S基因型的鉴定第41-49页
     ·S基因特异PCR体系的优化第41页
     ·S基因特异PCR扩增及S基因型的确定第41-43页
     ·S基因克隆片段的序列比较第43-49页
   ·甜樱桃品种S基因型与田间杂交座果率的关系第49-51页
   ·各S基因的频率统计第51-52页
   ·品种间的遗传距离与S基因频率分析第52-56页
   ·自交亲和品种分析第56-57页
 4 讨论第57-61页
   ·关于确定S基因型的方法和结论第57-58页
   ·关于S基因出现的频率第58-60页
   ·关于授粉树配置第60页
   ·关于S_4和S_4~’第60-61页
第二部分 樱桃自交(不)亲和性分子机制探讨第61-84页
 1 前言第61-62页
 2 材料与方法第62-67页
   ·材料第62页
   ·方法第62-67页
     ·花柱总RNA的提取第62-64页
     ·反转录cDNA第一链的合成第64页
     ·S基因cDNA中间片段的扩增第64-65页
     ·等电聚焦凝胶电泳分离花柱S-RNase第65-66页
       ·葡聚糖凝胶G-25层析柱的制作第65页
       ·花柱可溶性蛋白的提取第65页
       ·花柱可溶性蛋白的分离纯化第65页
       ·沉淀蛋白质第65页
       ·透析第65-66页
       ·定量第66页
       ·等电聚焦凝胶电泳第66页
     ·荧光显微镜观察花粉管生长第66-67页
 3 结果与分析第67-79页
   ·中国樱桃S基因分析第67-69页
   ·花柱可溶性蛋白及S-RNase分析第69-71页
     ·花柱可溶性活性蛋白含量测定第69-70页
     ·花柱可溶性活性蛋白等电聚焦凝胶分析第70-71页
   ·RT-PCR方法检测花柱中S基因的表达第71-75页
     ·花柱RNA的提取第71-72页
     ·S基因中间片段的扩增第72-73页
     ·冬季离体催花对RT-PCR分析的影响第73-75页
   ·甜樱桃SI花粉管形态学研究第75-79页
   ·中国樱桃与甜樱桃种间杂交第79页
 4 讨论第79-84页
   ·甜樱桃SI的机制探讨第79-80页
   ·中国樱桃自交亲和分子机制探讨第80-81页
   ·关于中国樱桃S基因第81-82页
   ·关于中国樱桃花柱中S-like-RNase第82页
   ·蔷薇科果树自交亲和的几种机理第82页
   ·自交亲和品种的标准探讨第82-83页
   ·关于中国樱桃和甜樱桃种间杂交第83-84页
结论第84-86页
参考文献第86-96页
致谢第96-97页

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