摘要 | 第1-10页 |
英文摘要 | 第10-13页 |
文献综述 植物及果树自交不亲和性研究进展 | 第13-36页 |
1 植物S基因及其S-RNase | 第14-20页 |
·S基因的多态性及结构特点 | 第14-15页 |
·S基因的表达与作用机理 | 第15-18页 |
·关于S位点 | 第18-19页 |
·关于S位点相关基因(S-related gene) | 第19-20页 |
2 果树自交不亲和性研究进展 | 第20-28页 |
·梨SI研究进展 | 第21-23页 |
·苹果SI研究进展 | 第23-24页 |
·杏SI研究进展 | 第24-25页 |
·扁桃SI研究进展 | 第25页 |
·甜樱桃SI研究进展及SC品种的选育 | 第25-28页 |
·SC品种不同的分子机制及应用设想 | 第28页 |
3 蔷薇科上确定S基因型的方法 | 第28-33页 |
·等电聚焦凝胶电泳确定S基因型 | 第29-30页 |
·PCR扩增确定S基因型 | 第30-33页 |
4 本研究的内容及目标 | 第33-36页 |
第一部分 甜樱桃S基因的克隆及S基因型的鉴定 | 第36-61页 |
1 前言 | 第36-37页 |
2 材料和方法 | 第37-41页 |
·材料 | 第37-38页 |
·实验方法 | 第38-41页 |
·基因组DNA提取 | 第38页 |
·S基因特异PCR扩增 | 第38-39页 |
·大肠杆菌感受态细胞的制备及转化 | 第39-40页 |
·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第39页 |
·连接反应 | 第39页 |
·大肠杆菌感受态细胞的转化及阳性克隆的筛选 | 第39-40页 |
·田间授粉试验 | 第40页 |
·花粉采集 | 第40页 |
·杂交授粉 | 第40页 |
·樱桃各品种的RAPD分析 | 第40-41页 |
3 结果与分析 | 第41-57页 |
·甜樱桃S基因克隆及S基因型的鉴定 | 第41-49页 |
·S基因特异PCR体系的优化 | 第41页 |
·S基因特异PCR扩增及S基因型的确定 | 第41-43页 |
·S基因克隆片段的序列比较 | 第43-49页 |
·甜樱桃品种S基因型与田间杂交座果率的关系 | 第49-51页 |
·各S基因的频率统计 | 第51-52页 |
·品种间的遗传距离与S基因频率分析 | 第52-56页 |
·自交亲和品种分析 | 第56-57页 |
4 讨论 | 第57-61页 |
·关于确定S基因型的方法和结论 | 第57-58页 |
·关于S基因出现的频率 | 第58-60页 |
·关于授粉树配置 | 第60页 |
·关于S_4和S_4~’ | 第60-61页 |
第二部分 樱桃自交(不)亲和性分子机制探讨 | 第61-84页 |
1 前言 | 第61-62页 |
2 材料与方法 | 第62-67页 |
·材料 | 第62页 |
·方法 | 第62-67页 |
·花柱总RNA的提取 | 第62-64页 |
·反转录cDNA第一链的合成 | 第64页 |
·S基因cDNA中间片段的扩增 | 第64-65页 |
·等电聚焦凝胶电泳分离花柱S-RNase | 第65-66页 |
·葡聚糖凝胶G-25层析柱的制作 | 第65页 |
·花柱可溶性蛋白的提取 | 第65页 |
·花柱可溶性蛋白的分离纯化 | 第65页 |
·沉淀蛋白质 | 第65页 |
·透析 | 第65-66页 |
·定量 | 第66页 |
·等电聚焦凝胶电泳 | 第66页 |
·荧光显微镜观察花粉管生长 | 第66-67页 |
3 结果与分析 | 第67-79页 |
·中国樱桃S基因分析 | 第67-69页 |
·花柱可溶性蛋白及S-RNase分析 | 第69-71页 |
·花柱可溶性活性蛋白含量测定 | 第69-70页 |
·花柱可溶性活性蛋白等电聚焦凝胶分析 | 第70-71页 |
·RT-PCR方法检测花柱中S基因的表达 | 第71-75页 |
·花柱RNA的提取 | 第71-72页 |
·S基因中间片段的扩增 | 第72-73页 |
·冬季离体催花对RT-PCR分析的影响 | 第73-75页 |
·甜樱桃SI花粉管形态学研究 | 第75-79页 |
·中国樱桃与甜樱桃种间杂交 | 第79页 |
4 讨论 | 第79-84页 |
·甜樱桃SI的机制探讨 | 第79-80页 |
·中国樱桃自交亲和分子机制探讨 | 第80-81页 |
·关于中国樱桃S基因 | 第81-82页 |
·关于中国樱桃花柱中S-like-RNase | 第82页 |
·蔷薇科果树自交亲和的几种机理 | 第82页 |
·自交亲和品种的标准探讨 | 第82-83页 |
·关于中国樱桃和甜樱桃种间杂交 | 第83-84页 |
结论 | 第84-86页 |
参考文献 | 第86-96页 |
致谢 | 第96-97页 |