摘要 | 第1-11页 |
Abstract | 第11-13页 |
第一部分 用基因枪和花粉管法将水稻几丁质酶基因导入小麦的研究 | 第13-59页 |
Ⅰ 文献综述 | 第13-26页 |
1 小麦遗传转化研究进展 | 第13-14页 |
2 小麦遗传转化主要方法 | 第14-20页 |
·基因枪转化法 | 第14-17页 |
·农杆菌介导法 | 第17-18页 |
·花粉管通道法 | 第18-19页 |
·原生质体转化法 | 第19-20页 |
3 小麦遗传转化的报告基因和选择标记基因 | 第20-22页 |
·报告基因 | 第20-21页 |
·选择标记基因 | 第21-22页 |
4 转基因小麦的分子检测 | 第22页 |
5 外源基因在转基因小麦中的整合和表达 | 第22-24页 |
·外源基因在转基因小麦中的整合 | 第22-23页 |
·外源基因在转基因小麦中的表达 | 第23-24页 |
6 小麦基因转化中存在的主要问题和展望 | 第24-25页 |
7 本实验研究目的和意义 | 第25-26页 |
Ⅱ 材料与方法 | 第26-36页 |
1 用基因枪法将水稻几丁质酶基因导入小麦的研究 | 第26-33页 |
·植物材料 | 第26页 |
·质粒的构建、提取、检测和酶切分析 | 第26-28页 |
·质粒的构建 | 第26页 |
·质粒DNA的提取 | 第26-27页 |
·DNA的电泳检测 | 第27页 |
·紫外分光光度法测定DNA含量 | 第27页 |
·质粒DNA的酶切分析 | 第27-28页 |
·金粒的制备 | 第28页 |
·材料的渗透处理和微弹轰击 | 第28-29页 |
·转化体的筛选及植株的再生 | 第29页 |
·β-葡糖苷酸酶(gus)基因瞬间表达分析 | 第29页 |
·转基因再生植株的分子鉴定 | 第29-33页 |
·小麦基因组DNA的提取 | 第29-30页 |
·再生植株的PCR检测 | 第30-31页 |
·杂交探针的制备 | 第31页 |
·再生植株Southern杂交检测 | 第31-33页 |
·DNA的限制性内切酶酶切及电泳 | 第32页 |
·碱性条件下DNA向尼龙膜的毛细管转移 | 第32页 |
·与探针的杂交 | 第32页 |
·杂交信号的检测 | 第32-33页 |
·转基因小麦植株的形态学和性状表现观察和分析 | 第33页 |
·转基因小麦植株的田间抗条锈病试验 | 第33页 |
2 用花粉管法将水稻几丁质酶基因导入小麦的研究 | 第33-36页 |
·植物材料 | 第33-34页 |
·质粒的构建、提取、检测和酶切分析 | 第34-35页 |
·质粒的构建 | 第34页 |
·质粒DNA的提取 | 第34-35页 |
·DNA的电泳检测 | 第35页 |
·紫外分光光度法测定DNA含量 | 第35页 |
·质粒DNA的酶切分析 | 第35页 |
·小麦的花粉管法导入 | 第35页 |
·柱头切除滴加法 | 第35页 |
·子房注射法 | 第35页 |
·转化小麦的卡那霉素抗性筛选 | 第35-36页 |
·转化小麦植株的PCR鉴定 | 第36页 |
·小麦基因组DNA的提取 | 第36页 |
·转化小麦的PCR检测 | 第36页 |
Ⅲ 结果与分析 | 第36-54页 |
1 用基因枪法将水稻几丁质酶基因导入小麦的研究 | 第36-49页 |
·抗性愈伤组织筛选和植株再生 | 第36-41页 |
·基因型对小麦幼胚胚性愈伤组织诱导及分化的影响 | 第36-38页 |
·幼胚大小对小麦幼胚胚性愈伤组织诱导及分化的影响 | 第38-39页 |
·幼胚盾片接种方式对小麦幼胚胚性愈伤组织诱导及分化的影响 | 第39-40页 |
·幼胚不同预培养时间对小麦幼胚胚性愈伤组织诱导及分化的影响 | 第40-41页 |
·渗透处理对β-葡糖苷酸酶(gus)基因瞬时表达的影响 | 第41-42页 |
·蔗糖处理时间对GUS瞬时表达效果的影响 | 第41页 |
·轰击参数对GUS瞬时表达效果的影响 | 第41-42页 |
·质粒DNA的酶切分析 | 第42-43页 |
·转基因小麦植株的PCR分析 | 第43-45页 |
·转基因小麦植株的Southern杂交分析 | 第45-46页 |
·不同基因型转化效果的差异 | 第46-47页 |
·转基因小麦植株的形态学观察 | 第47-48页 |
·转基因小麦植株的田间抗条锈菌试验 | 第48-49页 |
2 用花粉管法将水稻几丁质酶基因导入小麦的研究 | 第49-54页 |
·花粉管介导法导入外源基因当代种子的表型 | 第49-50页 |
·转化体的筛选 | 第50-52页 |
·筛选剂卡那霉素浓度的确定 | 第50-51页 |
·卡那霉素对转化小麦植株的筛选 | 第51-52页 |
·转化小麦植株的PCR分析 | 第52-53页 |
·不同基因型转化效果的差异 | 第53-54页 |
Ⅳ 讨论 | 第54-59页 |
1 用基因枪法将水稻几丁质酶基因导入小麦的研究 | 第54-57页 |
2 用花粉管法将水稻几丁质酶基因导入小麦的研究 | 第57-59页 |
第二部分 两种荒漠植物的组织培养及植株再生 | 第59-71页 |
Ⅰ 前言 | 第59-60页 |
Ⅱ 材料与方法 | 第60-62页 |
1 骆驼蓬的组织培养及植株再生 | 第60-61页 |
·实验材料 | 第60页 |
·愈伤组织的诱导和继代培养 | 第60-61页 |
·苗的分化 | 第61页 |
·根的分化 | 第61页 |
·炼苗和移栽 | 第61页 |
2 半日花的组织培养及植株再生 | 第61-62页 |
·实验材料 | 第61页 |
·愈伤组织的诱导 | 第61-62页 |
·苗的分化 | 第62页 |
·根的分化 | 第62页 |
·炼苗和移栽 | 第62页 |
Ⅲ 结果与讨论 | 第62-70页 |
1 骆驼蓬的组织培养及植株再生 | 第62-66页 |
·不同培养基及激素组合对愈伤组织的形成的影响 | 第62-64页 |
·苗的分化及不同激素组合对苗的形成的影响 | 第64-65页 |
·根的分化和植株的移栽 | 第65-66页 |
2 半日花的组织培养及植株再生 | 第66-70页 |
·不同激素组合及培养基类型对愈伤组织形成的影响 | 第66-68页 |
·不同激素组合对苗分化的影响 | 第68-69页 |
·根的分化和再生苗的移栽 | 第69-70页 |
Ⅳ 结论 | 第70-71页 |
1 骆驼蓬的组织培养及植株再生 | 第70页 |
2 半日花的组织培养及植株再生 | 第70-71页 |
参考文献 | 第71-86页 |
图版说明 | 第86-90页 |