摘要 | 第1-5页 |
ABSTRACT | 第5-11页 |
第一章 前言 | 第11-20页 |
·β-葡萄糖苷酶研究概况 | 第11-14页 |
·纤维素与纤维素酶简介 | 第11-13页 |
·β-葡萄糖苷酶简介 | 第13页 |
·β-葡萄糖苷酶的应用 | 第13-14页 |
·宏基因组学简介 | 第14-16页 |
·红树林研究概况 | 第16-17页 |
·本论文研究的目的和意义 | 第17-19页 |
·研究内容 | 第19-20页 |
第二章 红树林土壤宏基因组文库的构建及β-葡萄糖苷酶基因的筛选 | 第20-39页 |
·引言 | 第20页 |
·实验材料 | 第20-24页 |
·土壤样品 | 第20页 |
·培养基 | 第20-21页 |
·菌种与载体 | 第21页 |
·酶、抗生素、试剂盒和其他试剂 | 第21-22页 |
·常用溶液的配制 | 第22-23页 |
·主要仪器 | 第23-24页 |
·试验方法 | 第24-29页 |
·土壤基因组的提取及其纯化 | 第24-25页 |
·基因组文库的构建 | 第25-29页 |
·实验结果和分析 | 第29-36页 |
·土壤基因组的提取及纯化 | 第29-30页 |
·土壤基因组的酶切 | 第30-31页 |
·宏基因组文库的质量分析 | 第31-32页 |
·宏基因组文库的筛选 | 第32-33页 |
·阳性克隆子的酶切验证 | 第33-34页 |
·测序分析 | 第34-36页 |
·讨论 | 第36-39页 |
第三章 β-葡萄糖苷酶的原核表达和酶学性质研究 | 第39-67页 |
·引言 | 第39页 |
·实验材料 | 第39-42页 |
·缓冲液及其它试剂的配置 | 第39-41页 |
·质粒与菌株 | 第41页 |
·酶与试剂盒 | 第41页 |
·培养基 | 第41页 |
·常用仪器设备 | 第41-42页 |
·试验方法 | 第42-52页 |
·感受态的制备 | 第42页 |
·wz-2 表达载体的构建 | 第42-45页 |
·转化 | 第45页 |
·重组子的筛选和鉴定 | 第45-46页 |
·重组质粒在原核表达宿主中的表达 | 第46-47页 |
·目的基因的诱导表达 | 第47页 |
·目的基因诱导条件的优化 | 第47-48页 |
·粗酶液的制备 | 第48页 |
·标准曲线的制作 | 第48-50页 |
·β-葡萄糖苷酶酶活的测定 | 第50-51页 |
·β-葡萄糖苷酶酶学性质分析 | 第51-52页 |
·实验结果和分析 | 第52-64页 |
·WZ-2 表达载体的构建 | 第52-54页 |
·WZ-2 重组表达载体的验证 | 第54-55页 |
·IPTG 对重组克隆子的诱导 | 第55-58页 |
·温度对β-葡萄糖苷酶活性的影响 | 第58-59页 |
·pH 对酶活性的影响 | 第59-61页 |
·金属离子对酶活性的影响 | 第61-62页 |
·不同化合物对酶活性的影响 | 第62-63页 |
·酶促动力学研究 | 第63-64页 |
·讨论 | 第64-67页 |
·表达体系的选择 | 第64-65页 |
·诱导表达条件的优化 | 第65页 |
·β-葡萄糖苷酶最适反应条件 | 第65-66页 |
·金属离子对酶活的影响 | 第66-67页 |
第四章 结论与展望 | 第67-69页 |
1. 结论 | 第67-68页 |
2. 展望 | 第68-69页 |
参考文献 | 第69-76页 |
缩略词 | 第76-77页 |
致谢 | 第77页 |