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红树林土壤宏基因组文库中新型β-葡萄糖苷酶的筛选及其酶学性质研究

摘要第1-5页
ABSTRACT第5-11页
第一章 前言第11-20页
   ·β-葡萄糖苷酶研究概况第11-14页
     ·纤维素与纤维素酶简介第11-13页
     ·β-葡萄糖苷酶简介第13页
     ·β-葡萄糖苷酶的应用第13-14页
   ·宏基因组学简介第14-16页
   ·红树林研究概况第16-17页
   ·本论文研究的目的和意义第17-19页
   ·研究内容第19-20页
第二章 红树林土壤宏基因组文库的构建及β-葡萄糖苷酶基因的筛选第20-39页
   ·引言第20页
   ·实验材料第20-24页
     ·土壤样品第20页
     ·培养基第20-21页
     ·菌种与载体第21页
     ·酶、抗生素、试剂盒和其他试剂第21-22页
     ·常用溶液的配制第22-23页
     ·主要仪器第23-24页
   ·试验方法第24-29页
     ·土壤基因组的提取及其纯化第24-25页
     ·基因组文库的构建第25-29页
   ·实验结果和分析第29-36页
     ·土壤基因组的提取及纯化第29-30页
     ·土壤基因组的酶切第30-31页
     ·宏基因组文库的质量分析第31-32页
     ·宏基因组文库的筛选第32-33页
     ·阳性克隆子的酶切验证第33-34页
     ·测序分析第34-36页
   ·讨论第36-39页
第三章 β-葡萄糖苷酶的原核表达和酶学性质研究第39-67页
   ·引言第39页
   ·实验材料第39-42页
     ·缓冲液及其它试剂的配置第39-41页
     ·质粒与菌株第41页
     ·酶与试剂盒第41页
     ·培养基第41页
     ·常用仪器设备第41-42页
   ·试验方法第42-52页
     ·感受态的制备第42页
     ·wz-2 表达载体的构建第42-45页
     ·转化第45页
     ·重组子的筛选和鉴定第45-46页
     ·重组质粒在原核表达宿主中的表达第46-47页
     ·目的基因的诱导表达第47页
     ·目的基因诱导条件的优化第47-48页
     ·粗酶液的制备第48页
     ·标准曲线的制作第48-50页
     ·β-葡萄糖苷酶酶活的测定第50-51页
     ·β-葡萄糖苷酶酶学性质分析第51-52页
   ·实验结果和分析第52-64页
     ·WZ-2 表达载体的构建第52-54页
     ·WZ-2 重组表达载体的验证第54-55页
     ·IPTG 对重组克隆子的诱导第55-58页
     ·温度对β-葡萄糖苷酶活性的影响第58-59页
     ·pH 对酶活性的影响第59-61页
     ·金属离子对酶活性的影响第61-62页
     ·不同化合物对酶活性的影响第62-63页
     ·酶促动力学研究第63-64页
   ·讨论第64-67页
     ·表达体系的选择第64-65页
     ·诱导表达条件的优化第65页
     ·β-葡萄糖苷酶最适反应条件第65-66页
     ·金属离子对酶活的影响第66-67页
第四章 结论与展望第67-69页
 1. 结论第67-68页
 2. 展望第68-69页
参考文献第69-76页
缩略词第76-77页
致谢第77页

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