| 摘要 | 第1-4页 |
| ABSTRACT | 第4-8页 |
| 第1章 文献综述 | 第8-18页 |
| ·鱼类的配子发生及受精生物学 | 第8-11页 |
| ·鱼类的配子发生 | 第8-9页 |
| ·鱼类的受精生物学 | 第9-11页 |
| ·鱼类的雌核发育(gynogenesis)生殖方式 | 第11-13页 |
| ·三倍体萍乡红鲫遗传背景与雌核发育生殖方式的初步研究 | 第13-14页 |
| ·卵透明带ZP3与受精作用的研究概况 | 第14-16页 |
| ·本研究的内容、目的及意义 | 第16-18页 |
| 第2章 萍乡红鲫ZP3基因SMART cDNA的合成 | 第18-31页 |
| ·材料与方法 | 第18-24页 |
| ·样品采集 | 第18页 |
| ·主要仪器和设备 | 第18-19页 |
| ·主要试剂 | 第19页 |
| ·萍乡红鲫总RNA的提取 | 第19-20页 |
| ·SMART cDNA的合成 | 第20页 |
| ·随机引物设计及ZP3中间序列的获得 | 第20-21页 |
| ·RACE-PCR扩增 | 第21-22页 |
| ·RACE产物切胶回收 | 第22页 |
| ·RACE产物的克隆与鉴定 | 第22-24页 |
| ·ZP3 cDNA序列拼接及同源性分析 | 第24页 |
| ·结果 | 第24-29页 |
| ·萍乡红鲫总RNA提取结果 | 第24-25页 |
| ·ZP3中间片段PCR扩增结果 | 第25页 |
| ·RACE-PCR产物及目的片段切胶回收结果 | 第25-26页 |
| ·RACE产物T-A克隆的鉴定 | 第26-27页 |
| ·萍乡红鲫ZP3 cDNA序列拼接与分析 | 第27-28页 |
| ·萍乡红鲫ZP3同源性分析 | 第28-29页 |
| ·讨论 | 第29-31页 |
| 第3章 萍乡红鲫ZP3基因的克隆表达与纯化 | 第31-43页 |
| ·材料与方法 | 第31-35页 |
| ·实验材料及主要仪器和试剂 | 第31页 |
| ·特异性表达引物的设计 | 第31页 |
| ·表达片段的PCR扩增 | 第31-32页 |
| ·PCR产物切胶回收 | 第32页 |
| ·pGEM-T-ZP3质粒的构建与鉴定 | 第32-33页 |
| ·重组表达质粒的构建及诱导表达 | 第33页 |
| ·亲和层析纯化表达的蛋白 | 第33-35页 |
| ·Bradford法测定蛋白质浓度 | 第35页 |
| ·结果 | 第35-40页 |
| ·目的表达片段PCR扩增结果 | 第35-36页 |
| ·PCR产物回收结果 | 第36-37页 |
| ·pGEM-T-ZP3重组质粒的双酶切鉴定 | 第37页 |
| ·目的蛋白的诱导表达 | 第37-39页 |
| ·ZP3融合蛋白的纯化 | 第39页 |
| ·ZP3融合蛋白的浓度测定 | 第39-40页 |
| ·讨论 | 第40-43页 |
| 致谢 | 第43-44页 |
| 参考文献 | 第44-48页 |
| 附录 | 第48-53页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第53页 |
