| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-15页 |
| 第一章 绪论 | 第15-40页 |
| ·抗冻蛋白的分类及其特点 | 第15-18页 |
| ·抗冻蛋白的分类 | 第15页 |
| ·抗冻蛋白的特性 | 第15-18页 |
| ·抗冻蛋白非依数性降低冰点的活性 | 第15页 |
| ·抗冻蛋白修饰冰晶形态的活性 | 第15-16页 |
| ·抗冻蛋白抑制冰晶发生重结晶的活性 | 第16-18页 |
| ·抗冻蛋白热滞活性的检测方法 | 第18-19页 |
| ·毛细管单晶生长法 | 第18页 |
| ·差示扫描量热法 | 第18页 |
| ·微量渗透压计法 | 第18页 |
| ·其它方法 | 第18-19页 |
| ·抗冻蛋白的分离纯化 | 第19-20页 |
| ·血清中抗冻蛋白的分离纯化 | 第19页 |
| ·动物组织中抗冻蛋白的分离纯化 | 第19页 |
| ·植物中抗冻蛋白的分离纯化 | 第19-20页 |
| ·抗冻蛋白的亲和分离纯化 | 第20页 |
| ·抗冻蛋白的结构研究 | 第20-23页 |
| ·鱼类抗冻蛋白 | 第20-22页 |
| ·植物抗冻蛋白 | 第22页 |
| ·昆虫抗冻蛋白 | 第22-23页 |
| ·抗冻蛋白的抗冻机理研究 | 第23-27页 |
| ·吸附－抑制模型 | 第23-24页 |
| ·晶格匹配模型 | 第24页 |
| ·偶极子－偶极子模型 | 第24-25页 |
| ·晶格占有模型 | 第25-26页 |
| ·氢原子结合模型 | 第26页 |
| ·刚体能量模型 | 第26页 |
| ·表面互补模型 | 第26-27页 |
| ·分子模拟研究抗冻蛋白抗冻机理 | 第27-29页 |
| ·分子模拟的基本方法 | 第27-28页 |
| ·分子模拟在抗冻蛋白研究中的应用 | 第28-29页 |
| ·抗冻蛋白的应用研究 | 第29-32页 |
| ·抗冻蛋白在食品工业中的应用 | 第29-30页 |
| ·抗冻蛋白在器官保藏中的应用 | 第30-31页 |
| ·抗冻蛋白在基因工程改善植物抗冻性的应用 | 第31页 |
| ·抗冻蛋白在其它行业中的应用 | 第31-32页 |
| ·课题的研究意义以及研究内容 | 第32页 |
| ·课题的研究意义 | 第32页 |
| ·课题的研究内容 | 第32页 |
| ·参考文献 | 第32-40页 |
| 第二章 抗冻蛋白抗冻活性检测方法的研究 | 第40-55页 |
| ·材料与方法 | 第40-43页 |
| ·实验材料 | 第40-41页 |
| ·实验设备 | 第41-42页 |
| ·实验方法 | 第42-43页 |
| ·红萝卜抗冻蛋白的制备 | 第42页 |
| ·SDS-PAGE | 第42页 |
| ·RP-HPLC 测定样品的纯度 | 第42页 |
| ·DSC 法测定样品THA | 第42-43页 |
| ·DSC 法测定样品THA 的稳定性、专一性和精密度的评价 | 第43页 |
| ·结果与讨论 | 第43-51页 |
| ·DcAFP 的分离纯化 | 第43-44页 |
| ·升降温速率对THA 的影响 | 第44-46页 |
| ·原料浓度对THA 的影响 | 第46-47页 |
| ·冰晶含量对THA 的影响 | 第47-49页 |
| ·DSC法检测THA 稳定性的研究 | 第49页 |
| ·DSC法检测THA 重复性的研究 | 第49页 |
| ·DSC法检测THA 精密度的研究 | 第49-51页 |
| ·结论 | 第51页 |
| ·参考文献 | 第51-55页 |
| 第三章 冬小麦麸皮抗冻蛋白分离纯化的研究 | 第55-69页 |
| ·材料与方法 | 第55-60页 |
| ·实验材料 | 第55页 |
| ·实验设备 | 第55-56页 |
| ·实验方法 | 第56-60页 |
| ·电泳 | 第56页 |
| ·样品基本成分的测定方法 | 第56页 |
| ·RP-HPLC测定样品的纯度 | 第56页 |
| ·特异亲和法分离纯化抗冻蛋白 | 第56-57页 |
| ·抗冻蛋白的筛选 | 第57页 |
| ·DSC 法测定样品THA | 第57页 |
| ·TaAFP 的传统分离方法 | 第57-58页 |
| ·TaAFP 的特异性亲和分离方法 | 第58-59页 |
| ·TaAFP 的条带切割分离方法 | 第59-60页 |
| ·结果与讨论 | 第60-66页 |
| ·抗冻蛋白的筛选结果 | 第60页 |
| ·冬小麦麸皮的基本成分 | 第60页 |
| ·TaAFP 的传统分离方法 | 第60-64页 |
| ·TaAFP 的特异性亲和分离方法 | 第64-65页 |
| ·TaAFP 的条带切割分离方法 | 第65-66页 |
| ·三种分离方法获得的TaAFP 的比较 | 第66页 |
| ·结论 | 第66-67页 |
| ·参考文献 | 第67-69页 |
| 第四章 冬小麦麸皮抗冻蛋白性质的研究 | 第69-85页 |
| ·材料与方法 | 第69-72页 |
| ·实验材料 | 第69-70页 |
| ·实验设备 | 第70页 |
| ·实验方法 | 第70-72页 |
| ·THA 的测定 | 第70页 |
| ·TaAFP 氨基酸组成分析 | 第70页 |
| ·TaAFP 热变性温度的测定 | 第70页 |
| ·溶液pH 值和阳离子种类对样品THA 的影响 | 第70-71页 |
| ·TaAFP 亲水性的测定 | 第71页 |
| ·TaAFP 表面疏水性的测定 | 第71页 |
| ·电泳 | 第71-72页 |
| ·使用金手指特异亲和法测定TaAFP 的分配系数 | 第72页 |
| ·结果与讨论 | 第72-80页 |
| ·TaAFP的电泳分析结果 | 第72页 |
| ·TaAFP的氨基酸组成 | 第72-75页 |
| ·TaAFP 的变性温度以及其THA 的变化 | 第75页 |
| ·pH 值和阳离子对TaAFP 的THA 活性的影响 | 第75-78页 |
| ·TaAFP的亲水能力 | 第78-79页 |
| ·TaAFP的疏水能力 | 第79页 |
| ·TaAFP在冰晶相和液相的分配系数 | 第79-80页 |
| ·结论 | 第80-81页 |
| ·参考文献 | 第81-85页 |
| 第五章 冬小麦麸皮抗冻蛋白结构的研究 | 第85-113页 |
| ·材料与方法 | 第85-88页 |
| ·实验材料与设备 | 第85页 |
| ·实验方法 | 第85-88页 |
| ·MALDI-TOF-MS测定蛋白的分子量 | 第85-86页 |
| ·N-末端的测定 | 第86页 |
| ·TaAFP 酶切的方法 | 第86页 |
| ·肽指纹图谱的检测 | 第86页 |
| ·紫外波长检测 | 第86页 |
| ·Raman 光谱检测 | 第86-87页 |
| ·FT-IR 光谱检测 | 第87页 |
| ·圆二色性光谱检测 | 第87-88页 |
| ·二级结构的预测 | 第88页 |
| ·结果与讨论 | 第88-107页 |
| ·TaAFP 相对分子质量的确定 | 第88-91页 |
| ·TaAFP 序列的分析和确定 | 第91页 |
| ·TaAFP 同源性分析结果 | 第91-94页 |
| ·TaAFP 紫外光谱检测结果 | 第94-95页 |
| ·TaAFP 圆二色性光谱检测结果 | 第95-96页 |
| ·TaAFP Raman 光谱检测结果 | 第96-99页 |
| ·TaAFP FT-IR 光谱检测结果 | 第99-103页 |
| ·使用生物信息学方法预测 TaAFP 二级结构的结果 | 第103-104页 |
| ·TaAFP 二级结构的总结 | 第104-107页 |
| ·结论 | 第107页 |
| ·参考文献 | 第107-113页 |
| 第六章 冬小麦麸皮抗冻蛋白抗冻机理的研究 | 第113-136页 |
| ·实验方法 | 第114-117页 |
| ·TaAFP 的同源建模 | 第114页 |
| ·蛋白表面的选择和划分 | 第114-115页 |
| ·冰面的构建 | 第115页 |
| ·TaAFP-冰晶相互结合的模拟 | 第115-116页 |
| ·分子力学理论计算最佳TaAFP-冰晶结合面 | 第116页 |
| ·量子力学理论计算最佳TaAFP-冰晶结合面 | 第116-117页 |
| ·结果与讨论 | 第117-132页 |
| ·TaAFP 的建模结果 | 第117-119页 |
| ·TaAFP 蛋白表面区域划分结果 | 第119-120页 |
| ·分子力学方法计算TaAFP 与冰晶面之间的相互作用能 | 第120-124页 |
| ·体系总能量对TaAFP 与冰晶面之间相互作用能的影响 | 第124-126页 |
| ·分子轨道重叠对TaAFP 与冰晶面之间相互作用能的影响 | 第126-127页 |
| ·电荷迁移作用对TaAFP 与冰晶面之间相互作用能的影响 | 第127-128页 |
| ·键级能对TaAFP 与冰晶面之间相互作用能的影响 | 第128页 |
| ·TaAFP 与冰面结合的模型 | 第128-132页 |
| ·结论 | 第132页 |
| ·参考文献 | 第132-136页 |
| 论文主要结论及主要创新点 | 第136-138页 |
| 攻读博士学位期间主要学术成果 | 第138-139页 |
| 致谢 | 第139-141页 |
| 附：灯 | 第141页 |
