| 目录 | 第1-9页 |
| 摘要 | 第9-11页 |
| ABSTRACT | 第11-14页 |
| 缩略词表 | 第14-15页 |
| 第一部分 文献综述 | 第15-43页 |
| 第一章 牦牛的改良途径及杂种一代犏牛雄性不育研究进展 | 第15-25页 |
| 1 牦牛遗产改良的三个方向 | 第16-17页 |
| ·本品种的选育 | 第16页 |
| ·引入野牦牛外血 | 第16-17页 |
| ·种间杂交 | 第17页 |
| 2 犏牛雄性不育的研究 | 第17-23页 |
| ·细胞遗传学的研究 | 第17-18页 |
| ·生化遗传学研究 | 第18-19页 |
| ·组织形态学生殖内分泌学 | 第19-20页 |
| ·促进育性恢复研究 | 第20-23页 |
| 参考文献 | 第23-25页 |
| 第二章 精子的发生及调控精子发生的相关基因 | 第25-31页 |
| 1 精子发生的基因调控 | 第25-28页 |
| ·精子细胞中CREM基因的表达调控 | 第25-26页 |
| ·SCF/C-KIT系统 | 第26页 |
| ·热休克蛋白家族(heat shock protein,HSP) | 第26-27页 |
| ·DAZ基因家族 | 第27页 |
| ·Bcl-2家族 | 第27-28页 |
| ·其他基因 | 第28页 |
| 2 研究与展望 | 第28-29页 |
| 参考文献 | 第29-31页 |
| 第三章 DAZ基因家族研究进展和原位杂交技术原理 | 第31-43页 |
| 1 DAZ基因家族研究现状 | 第31-34页 |
| ·DAZ基因家族的发现和研究进展 | 第31-34页 |
| ·基因家族的结构和进化分析 | 第34页 |
| 2 原位杂交组织化学技术的原理 | 第34-35页 |
| 3 原位杂交探针的种类 | 第35-38页 |
| ·按探针的核酸性质分类 | 第35-36页 |
| ·按探针的标记物分类 | 第36-37页 |
| ·按探针的来源分类 | 第37页 |
| ·原位杂交探针的标记法 | 第37-38页 |
| ·原位杂交的关键技术 | 第38页 |
| 4 结论 | 第38-39页 |
| 参考文献 | 第39-43页 |
| 第二部分 试验研究 | 第43-83页 |
| 第四章:牦牛、犏牛DAZL基因的克隆和序列分析及表达的研究 | 第43-59页 |
| 1 材料与方法 | 第43-48页 |
| ·实验动物 | 第43-44页 |
| ·主要试剂和仪器 | 第44页 |
| ·组织总RNA提取和反转录 | 第44-45页 |
| ·引物设计与合成 | 第45-46页 |
| ·RT-PCR反应和产物回收及克隆测序 | 第46页 |
| ·荧光实时定量PCR | 第46-48页 |
| ·系统发育树的构建 | 第48页 |
| 2 结果与分析 | 第48-53页 |
| ·牦牛、犏牛DAZL基因RT-PCR扩增结果 | 第48-49页 |
| ·牦牛、犏牛DAZL基因编码区的序列分析 | 第49-51页 |
| ·黄牛、牦牛、犏牛DAZL基因二级结构的预测 | 第51页 |
| ·系统发育分析 | 第51-53页 |
| ·黄牛、牦牛和犏牛睾丸组织DAZL基因mRNA表达水平分析 | 第53页 |
| 3 讨论 | 第53-57页 |
| 参考文献 | 第57-59页 |
| 第五章:牦牛、犏牛BOULE基因的克隆和序列分析及表达的研究 | 第59-71页 |
| 1 材料与方法 | 第59-62页 |
| ·试验动物 | 第59页 |
| ·主要试剂和仪器 | 第59-60页 |
| ·组织总RNA提取和反转录 | 第60页 |
| ·引物设计与合成 | 第60页 |
| ·PCR反应和产物回收及克隆测序 | 第60页 |
| ·荧光实时定量PCR | 第60-61页 |
| ·系统发育树的构建 | 第61-62页 |
| 2 结果与分析 | 第62-66页 |
| ·牦牛、犏牛BOULE基因RT-PCR扩增结果 | 第62页 |
| ·牦牛、犏牛BOULE基因编码区的序列分析 | 第62-64页 |
| ·牦牛、犏牛BOULE基因二级结构的预测 | 第64-65页 |
| ·系统发育分析 | 第65-66页 |
| ·黄牛、牦牛和犏牛睾丸组织BOULE基因mRNA表达水平分析 | 第66页 |
| 3 讨论 | 第66-69页 |
| 参考文献 | 第69-71页 |
| 第六章:原位杂交检测BOULE在黄牛睾丸组织中的表达 | 第71-83页 |
| 1 材料与方法 | 第71-76页 |
| ·试验动物 | 第71页 |
| ·主要仪器和试剂 | 第71-72页 |
| ·探针的设计和制备 | 第72-73页 |
| ·试验方法 | 第73页 |
| ·石蜡组织切片的制备 | 第73-75页 |
| ·杂交过程 | 第75-76页 |
| 2 结果与分析 | 第76-78页 |
| ·黄牛和犏牛睾丸组织切片观察结果 | 第76-77页 |
| ·黄牛睾丸组织原位杂交观察结果 | 第77-78页 |
| 3 讨论 | 第78-79页 |
| 4 小结 | 第79-81页 |
| 参考文献 | 第81-83页 |
| 全文结论 | 第83-85页 |
| 全文创新 | 第85-87页 |
| 附录 | 第87-89页 |
| 1 组织切片试剂配制 | 第87页 |
| ·磷酸缓冲盐溶液(PBS) | 第87页 |
| ·10%中性甲醛固定液 | 第87页 |
| ·生理盐水 | 第87页 |
| 2 RNA提取所需DEPC水的配制 | 第87页 |
| 3 聚丙烯酰胺电泳及银染配方 | 第87-88页 |
| ·PAGE电泳 | 第87-88页 |
| ·银染 | 第88页 |
| 4 琼脂糖电泳试剂配制 | 第88-89页 |
| 致谢 | 第89-91页 |
| 攻读硕士学位期间发表的论文 | 第91页 |
