| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-9页 |
| 第一章 引言 | 第9-15页 |
| ·本研究的目的与意义 | 第9页 |
| ·均一化全长cDNA文库构建的意义 | 第9-10页 |
| ·表达序列标签的概述 | 第10-11页 |
| ·鱼类性腺发育相关基因的研究进展 | 第11-14页 |
| ·本研究的技术路线 | 第14-15页 |
| 第二章 大黄鱼性腺线性化cDNA文库构建及ESTs分析 | 第15-37页 |
| ·材料与方法 | 第15-21页 |
| ·材料 | 第15-16页 |
| ·方法 | 第16-21页 |
| ·结果 | 第21-31页 |
| ·大黄鱼性腺总RNA的抽提和mRNA的分离纯化 | 第21页 |
| ·cDNA文库构建和质量检测 | 第21-22页 |
| ·ESTs聚类和微卫星分析 | 第22-25页 |
| ·ESTs同源分析和注释 | 第25-31页 |
| ·部分性腺发育相关基因在性腺的表达分析 | 第31页 |
| ·讨论 | 第31-37页 |
| ·线性化文库构建效率 | 第31-33页 |
| ·含微卫星序列的EST序列分析 | 第33-34页 |
| ·性腺发育相关基因及表达分析 | 第34-37页 |
| 第三章 大黄鱼性腺发育相关基因克隆及器官表达 | 第37-75页 |
| ·材料与方法 | 第37页 |
| ·材料 | 第37页 |
| ·方法 | 第37-41页 |
| ·各器官RNA的提取 | 第37页 |
| ·SMART-RACE技术获取基因全长 | 第37-40页 |
| ·合成RT-PCR cDNA第一链和PCR扩增 | 第40页 |
| ·割胶纯化基因片段 | 第40页 |
| ·与质粒载体连接 | 第40页 |
| ·连接产物转化 | 第40-41页 |
| ·质粒插入片段的检测 | 第41页 |
| ·质粒测序及测序结果拼接 | 第41页 |
| ·目的基因的生物信息学分析 | 第41页 |
| ·荧光定量PCR分析各基因在各器官的表达 | 第41页 |
| ·结果 | 第41-75页 |
| ·总RNA的抽提结果 | 第41页 |
| ·RACE-PCR扩增结果 | 第41-42页 |
| ·RT-PCR扩增结果 | 第42-43页 |
| ·Cyp19a基因序列分析及在各器官中的表达 | 第43-49页 |
| ·Cyp19b基因序列分析及在各器官中的表达 | 第49-55页 |
| ·Cyp19b基因序列分析及在各器官中的表达 | 第55-60页 |
| ·CDC2基因序列分析及在各器官中的表达 | 第60-64页 |
| ·UBE2D基因序列分析及在各器官中的表达 | 第64-66页 |
| ·UBC9基因序列分析及在各器官中的表达 | 第66-70页 |
| ·讨论 | 第70-75页 |
| 第四章 结论与展望 | 第75-76页 |
| 致谢 | 第76-78页 |
| 参考文献 | 第78-90页 |
| 在学期间发表的学术论文和研究成果 | 第90页 |